檢測所需材料(未提供):
酶標儀(450±10nm)
洗板機
吸水紙
蒸餾水
移液器
儲存條件:
儲存于2~8℃的環境下時在有效期內穩定。過了有效期的試劑請勿使用。開封了的試劑必須儲存于2~8℃的環境下。微孔板也必須儲存于2-8℃的環境下。鋁鉑金屬袋一旦打開,就應當小心把它重新密封起來。開封的試劑盒如儲存于如上所述環境下,其活性可維持六周。
檢測步驟:
每次檢測都會有一條標準曲線。
1.將所需數量的板條置于板架上
2.將標準品、質控品和樣品分別25µL置于板架上
3.室溫下溫育5分鐘
4.在每一微孔中加入200µL酶標物
5.充分混合10秒鐘,在這一步驟中充分混合非常重要
6.室溫下溫育60分鐘
7.快速振蕩微孔內成分,每孔用400µL洗滌液清洗微孔3次,在吸水紙上拍干
特別注意:洗滌步驟的正確操作與否明顯影響整個實驗的靈敏度和準確度
8.每一微孔中加入200µL底物液
9.室溫下溫育30分鐘10)
10.每一微孔中加入100µL終止液以終止酶免反應
11.加終止液后10分鐘之內在450±10nm的酶標儀上讀取OD值