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蛋白酶K的作用及保存方法

時間：2024/1/2閱讀：945

作用：
蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于雜交前的處理，它具有消化包圍靶DNA蛋白質的作用，以增強探針與靶核酸結合的機會，提高雜交信號。
但蛋白酶K濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時，都會對細胞結構有一定的破壞，導致組織切片脫落，細胞核的消失，從而影響雜交結果。
EDTA緩沖液可以代替蛋白酶K的作用，解決上述出現的問題，并能達到理想的染色效果。

保存方法：
保存在-20℃的冰箱里，避免反復凍融，有效保證12個月。
孵育溫度為55-65℃，理想孵育溫度為58℃，孵育時間為15分鐘至48小時，理想孵育時間為2小時