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技術文章

抗原修復鍋的使用

點擊次數:1207 發布時間:2017-4-17

抗原修復鍋(Antigen Retriever)

    免疫組織化學方法成功與否關鍵在于抗原決定簇的保存和暴露。組織經甲醛固定,甲醛的醛基與抗原蛋白的氨基交聯,使決定簇的構像改變,從而影響檢測蛋白表達。要充分暴露抗原決定簇,通常用到抗原修復鍋。強烈推薦EMS有競爭力的一款產品,適于甲醛固定的組織經石蠟包埋后進行免疫染色前的處理,配合特別的抗原修復緩沖液確保得到zui高質量的免疫染色效果。

  • 一次可以在6種不同緩沖液中運行,進行抗原暴露
    • 僅暴露抗原決定簇,不損傷組織的形態
    • 實驗結果穩定,結果重現性高
    • 系列的玻片在獨立環境中經過處理

 

抗原修復鍋怎樣工作?

    看上去,抗原修復鍋似我們烹飪的高壓鍋。這是一款功能*的“高壓鍋”,主要用于抗原暴露的工作,主要的工作原理也是裝玻片的幾個分室可以達到高溫(>120°C)高壓。靈敏的傳感控制器來保持一定的溫度和壓力及一定的時間,這些工作參數都是經過嚴格的科學實驗得到的數據。當達到需要的溫度,抗原修復鍋會在該溫度下保持幾分鐘,之后鍋內玻片被冷卻2個多小時,特殊設材質的內鍋體控制了鍋和玻片的冷卻速度。

 

誰是受益人?

  • 研究病理的實驗室,那里需要高質量染色圖片(用來發表)的工作人員
  • 缺乏技術人員的實驗室,學生和博士后均可以處理玻片進行組織染色,且不需要很多時間來摸索
  • 小型病理實驗室,每天處理的玻片數量有限
  • 樣本昂貴稀有,或如組織芯片,或如*的組織樣本,利用抗原修復鍋,簡單可靠

 

怎樣選擇一種緩沖液(Buffer)?

    如果你已經知道哪種緩沖液用在微波的某種組織抗原修復,那么用抗原修復鍋時,這種緩沖液也同時適用的機會很大。我們提供四種即用型緩沖液R-Buffer A/B/C/U,同時也提供同種更加溫和的組織處理緩沖液,我們稱之為G系列,R-Buffer AG/BG/CG/UG。

    選擇Buffer,主要考慮以下兩點:

1.  抗原的自然特性以及所選擇的抗體

抗原自身特性和抗原的位置都是首要考慮。我們建議你剛開始的時候選擇抗原表達環境的zui適Buffer。以下是經驗供大家參考:

Most of the nuclear antigens (apoptosis-related, survival-related, proliferation-related) R: Buffer A (or AG).

Cell adhesion molecules, cell membrane antigens (extracellular domain) R: Buffer A (or AG)

Cytoskeleton and cytoskeleton-associated molecules – R:Buffer A (or AG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer B (or BG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer C (or CG)

Most of antibodies raised against a linear peptide – R: Buffer U (or UG)

2.  固定液以及固定程度

建議的組織切片的抗原修復處理是一種針對普通的適化狀態切片。如果用來切片的組織塊沒有充分固定,或者過固定(留在福爾馬林溶液中時間過長),或者用了其它的固定液,那么,處理組織切片的流程方案需要重新修訂,zui便利的辦法是選擇使用G系列緩沖液。對于過固定的材料一般推薦用U buffer,或者在同一Buffer里面增加循環。

 

產品參數:

335 mm

Capacity

9 litres

Max. Instrument length

228 mm

Width.

340 mm

Net Weight

4.5 kilos

Internal chamber Dimensions (d/h)

210/230 mm

Max. Load Weight

3.0kg

Max. Single Fault Temperature

133.3°C

 

使用抗原修復鍋進行染色的效果示例

1.福爾馬林固定,石蠟包埋,人乙狀結腸組織切片,經抗原修復鍋進行抗原暴露,R-Buffer C (pH 6.0),組織玻片降溫過夜,抗體MIB-1,抗原Ki-67,R-Detect HRP系統染色

2.福爾馬林固定,石蠟包埋,人乙狀結腸組織切片,經抗原修復鍋進行抗原暴露,R-Buffer A (pH 8.1),組織玻片降溫過夜,抗體#4B11,抗原CD8 (cell membrane),R-Detect HRP系統染色。

 

 

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