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北京西美杰科技有限公司
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- 型號 MIR 6700
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更新時間：2017-11-30 13:46:33瀏覽次數：911
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轉染江湖風起云涌，群雄紛爭不斷。近年來，病毒載體在基因/細胞治療領域的廣泛應用，讓市場對病毒包裝的質量和效率要求日益提升。Mirus經歷兩年，專攻AAV與Lentivirus病毒載體包裝制備的新產品TransIT®-VirusGEN™ Transfection Reagent終于問世，與各路轉染高手過招，精彩紛呈。欲知詳情，且看下文分解。
1.TransIT®-VirusGEN™招式解析
TransIT®-VirusGEN™ 依然采用Mirus多聚物轉染方法，無動物源成分，主要針對腺相關病毒（AAV）包裝而研發，對部分慢病毒（Lentivirus）包裝系統也有很強優勢，這兩種病毒都需要HEK 293細胞系生產，所以該轉染試劑適用于包括懸浮和貼壁的各種類型HEK 293細胞系，能大幅提高轉染效率和病毒產量，從而在有限的時間和資源里實現zui大收獲。
2.AAV包裝實戰分析
在相同培養條件下，用不同轉染試劑分別在懸浮的293-F和貼壁的293T/17兩種細胞系共轉pAAV-hrGFP, pAAV-RC, and pAAV-Helper三種質粒包裝AAV重組病毒，然后利用GFP標簽在HT1080細胞上檢測AAV滴度。結果顯示，不論是懸浮還是貼壁293細胞系，采用TransIT®-VirusGEN™轉染產出的AAV滴度遠遠高于其他幾款轉染試劑。
3.慢病毒包裝實戰分析
在相同培養條件下，用不同轉染試劑分別在懸浮的293-F和貼壁的293T/17兩種細胞系轉染pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™ 穿梭質粒 和慢病毒包裝質粒Mix powered（MISSION®）包裝Lentivirus重組病毒，然后利用GFP標簽在293T/17細胞上檢測Lentivirus滴度。結果顯示，不論是懸浮還是貼壁293細胞系，采用TransIT®-VirusGEN™轉染產出的重組慢病毒滴度都遠遠高于其他幾款轉染試劑。
4.轉染體系放大可提高AAV產量
采用TransIT®-VirusGEN™在6孔板和250mL培養瓶中轉染293-F懸浮細胞系包裝AAV，在6孔板和10cm平皿中轉染293T/17貼壁細胞系包裝AAV，兩組實驗在不同大小培養體系產出的重組病毒滴度比較結果顯示，當體系從6孔板→250mL培養瓶（或6孔板→10cm平皿）放大后，病毒產量也會相應提升20%左右，表明該轉染試劑適用于包裝重組病毒的工藝放大。
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