EM ICE是將光刺激與快速冷凍固定相結(jié)合的高壓冷凍設(shè)備，也是神經(jīng)生物學(xué)研究中使用最多的一種光遺傳學(xué)方法。同時(shí)這種方法對于制藥或化妝品行業(yè)也非常值得研究，可用來深入了解UV（紫外線）照射對其目標(biāo)結(jié)構(gòu)的影響。本文舉例說明UV（紫外線）照射對防曬霜超微結(jié)構(gòu)的影響。
高壓冷凍
將防曬霜*小心地涂抹在3 mm鍍銅/鍍金載體的100 μm切口上，再蓋上3 mm的藍(lán)寶石圓盤。使用Leica EM ICE對防曬霜樣本進(jìn)行高壓冷凍，然后在沒有光刺激的情況下再次高壓冷凍。實(shí)際冷凍之前，光刺激樣本在UV（紫外線）光照下曝光500毫秒（連續(xù)曝光）。
轉(zhuǎn)移、鍍膜和Cryo-SEM
在一個(gè)預(yù)冷的Leica EM VCM冷凍工作站中，將3mm樣品托和藍(lán)寶石片與冷凍后的樣品形成的三明治結(jié)構(gòu)固定在一個(gè)通用型樣品臺上，然后通過Leica EM VCT500傳輸桿將樣品臺傳輸進(jìn)Leica EM ACE600中。樣品在-110℃下（等待10分鐘后），用壓裂刀將藍(lán)寶石圓盤（頂面）剝離樣本進(jìn)行壓裂。
接下來在-100℃下對樣品進(jìn)行部分升華（保持15秒）再濺射2nm厚度鉑金膜。然后使用Leica EM VCT500傳輸桿將樣品轉(zhuǎn)移到FEI Inspect S50掃描電子顯微鏡（SEM）的Leica EM VCT500低溫冷凍臺上，傳輸過程中Leica EM VCT500傳輸桿可將樣品保持在高真空條件并主動(dòng)冷卻。在Cryo-SEM（高強(qiáng)度：30kV）下獲得二次電子圖像。
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