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RD蛋白含CF與不含CF的區(qū)別
點擊次數(shù)：2551 發(fā)布時間：2020-11-16
在瀏覽網(wǎng)站的重組蛋白產(chǎn)品時，大家常常會對品名中的「CF」產(chǎn)生疑惑。CF 代表什么含義？品名中含/不含 CF 的蛋白有什么區(qū)別？哪種產(chǎn)品更適用于我的實驗？本文一一來解惑。
1. CF 其名，其意
CF，是 Carrier Free 的意思。一般來說，為了對重組蛋白的結(jié)構(gòu)及活性進行保護，我們會在蛋白產(chǎn)品中添加牛血清白蛋白（BSA）作為載體蛋白。但考慮到 BSA 會對某些實驗造成影響，我們又研發(fā)出不含載體蛋白（BSA）的產(chǎn)品，即 Carrier Free 蛋白。
注：并不是所有不標注 CF 的蛋白產(chǎn)品都含有 BSA，產(chǎn)品的具體成分需要參考產(chǎn)品說明書或 COA。
2. CF 蛋白與普通蛋白產(chǎn)品的區(qū)別
是否添加 BSA 是 CF 蛋白產(chǎn)品與普通蛋白產(chǎn)品大的區(qū)別。這一區(qū)別使得凍干粉重溶溶液的選擇以及重組蛋白的用途有所差異。
在蛋白凍干粉重溶時，CF 蛋白產(chǎn)品只要使用說明書推薦的溶液溶解到規(guī)定的濃度即可，而普通蛋白產(chǎn)品為了保證產(chǎn)品不會吸附到管壁上，為蛋白產(chǎn)品的重溶提供一個良好的環(huán)境，在溶液中還要額外添加 0.1% 的 BSA。
所需添加的 BSA 要求很高：不能含有蛋白酶，并且是 Fraction V 純度的 BSA。R&D Systems® 提供各類含 BSA 的蛋白重溶溶液，如：RB02（BSA / PBS）和RB04（BSA/HCl），可以根據(jù)蛋白的重溶要求自行選擇。
在用途上，一般情況下，我們建議使用含有 BSA 的重組蛋白用于細胞或組織培養(yǎng)，或作為 ELISA 標準品。相對而言，當 BSA 可能會干擾實驗時，比如體內(nèi)實驗、蛋白標記等，則推薦使用 CF 蛋白。另外，如果實驗平臺有特殊要求，也應(yīng)根據(jù)要求選擇不含 BSA 的蛋白。
舉例產(chǎn)品：Recombinant Human IL-6 (HEK293-expressed) Protein, CF（貨號 7270-IL/CF）/ Recombinant Human IL-6 (HEK293-expressed) Protein（貨號 7270-IL）
3. CF 蛋白維持高活性的秘訣
對比 CF 蛋白和普通蛋白，無論蛋白是否添加 BSA，它們的生物學活性實驗結(jié)果、運輸條件、保存條件及效期都沒有區(qū)別。既然沒有 BSA 作為蛋白載體，是什么讓 CF 蛋白保持良好的穩(wěn)定性和生物學活性呢？
舉例產(chǎn)品：Recombinant Human TNF-alpha (HEK293-expressed) Protein, CF
答案就在說明書 Formulation 那一欄里，我們在蛋白中添加了海藻糖。海藻糖是一種以兩個葡萄糖分子通過 α,α,1,1-糖苷鍵連接的二糖。海藻糖是一種非還原糖，不與氨基酸或蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng)。
它本身不存在于哺乳動物體內(nèi)，但哺乳動物體內(nèi)卻廣泛存在分解海藻糖的酶，且海藻糖作為一種小分子的半抗原，哺乳動物對其免疫反應(yīng)性很低。這使得海藻糖對活體實驗或異種移植等實驗的干擾極小。
海藻糖不僅可以防止蛋白在脫水狀態(tài)下改變其結(jié)構(gòu)，更能在高溫、低溫、高滲透壓的條件下保留蛋白的生物學活性。目前，海藻糖以其高效的蛋白保護性能與相對低廉的價格漸漸代替 BSA，成為免疫實驗產(chǎn)品和蛋白類產(chǎn)品添加劑的新寵。