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高效液相色譜儀重現性不好怎么解決 ?

時間:2020/3/19閱讀:4061
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在高效液相色譜法的試驗過程中,有時會有異常色譜峰的出現以及重現性不好的問題,這主要是由于操作方法不當所引起,要想解決此類問題,需從以下幾個方面入手。

 

液相色譜儀

 

1、進樣量的控制。用進樣閥來進樣時,閥內的樣品環是定量的,(一般分析型進樣閥的樣品環體積為20ul),由于進樣時,注射到進樣閥內的樣品溶液在樣品環的管路中有徑向的速度梯度(即管軸處比管壁處的液流速度快)。因此,要想使樣品環中充滿樣品溶液,從而使用進樣閥來準確地定量,則必須使進樣量大于樣品環體積的2倍。如果用注射器來控制進樣量,則大只能注射樣品環體積1/2的量,這樣才能防止部分樣品由溢流管溢出從而導致定量分析的誤差。

 

2、進樣閥的清潔問題。如果樣品環中有上次進樣時樣品的殘留,必然會污染下次注射進的樣品,為防止這種現象的發生,應按下列步驟操作:a.進樣閥有2個位置,INJECT和LOAD。首先在LOAD位置時,以注射器將流動相注入進樣閥內清洗幾次,每次用量大約40ul;b.然后將進樣閥板手扳至INJECT位置時,再以流動相清洗幾次,每次用量還是40ul;c.后,再將樣品注射到進樣閥里。按照上述的步驟操作,可以避免由進樣閥引起的污染,從而使干擾峰消除并提高分析結果的準確性。

 

3、進樣閥溢流管的堵塞。有時,進樣閥的溢流管會發生堵塞現象,向進樣閥內注射樣品時,注射針推不動。此故障是由于溢流管的堵塞所致。堵塞的原因多半是由于溶解樣品的流動相用的是鹽溶液,而其中的鹽在溢流管的排空端口處結晶所致。此時,可用小燒杯盛少量蒸餾水對溢流管口稍加浸泡,端口處鹽的結晶就能被溶解掉,故障排除。如能在每次進樣完成之后,用蒸餾水反復沖洗至溢流管中的鹽分全部沖出,則可避免此故障的發生。

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