此處介紹銀鹽法、氫化物原子熒光光度法、氫化物發生原子吸收光譜法。
一、銀鹽法
1.原理
樣品經消化后，以碘化鉀、氯化亞錫將高價砷還原為三價砷，然后與鋅粒和酸產生的新生態氫生成砷化氫，經銀鹽溶液吸收后，形成紅色膠態物，在510nm處比色，與標準系列比較定量。zui低檢出量為0.2mg/kg。
2.適用范圍
標準方法（GB/T5009.11-1996），適用于各類食品中總砷的測定。
3.試劑
除另有規定，所用的試劑為分析純試劑，水為蒸餾水或同等純度水。
（1） 硝酸。
（2） 硫酸。
（3） 鹽酸。
（4） 硝酸＋高氯酸混合液（4＋1）：量取80ml硝酸，加20ml高氯酸，混勻。
（5） 硝酸鎂溶液（150g/L）：稱取15g硝酸鎂〖Mg（NO3）2·6H2O〗溶于水中，并稀釋至100ml。
（6） 氧化鎂。
（7） 碘化鉀溶液（150g/L）：稱取15g碘化鉀溶于水中，并稀釋至100ml，儲于棕色瓶中。
（8） 酸性氯化亞錫溶液：稱取40.0g氯化亞錫（SnCl2·2H2O），加鹽酸溶解并稀釋至100.0ml，加入數顆金屬錫粒。
**氯化亞錫（SnCl2）又稱二氯化錫，白色或半透明晶體，帶二個分子結晶水（SnCl2·2H2O）的是無色針狀或片狀晶體，溶于水、乙醇和乙醚。氯化亞錫試劑不穩定，在空氣中被氧化成不溶性氯氧化物，失去還原作用，為了保持試劑具有穩定的還原性，在配制時，加鹽酸溶解為酸性氯化亞錫溶液，并加入數粒金屬錫粒，使其持續反應生成氯化亞錫及新生態氫，使溶液具有還原性。
氯化亞錫在本實驗的作用為將As5+還原為As3+；在鋅粒表面沉積錫層以抑制產生氫氣作用過猛。
（9）鹽酸溶液（1＋1）：量取50ml鹽酸，小心倒入50ml水中，混勻。
（10）乙酸鉛溶液（100g/L）。
（11）乙酸鉛棉花：用100g/L乙酸鉛溶液浸透脫脂棉后，壓除多余溶液，并使疏松，在100℃以下干燥后，儲存于玻璃瓶中。
**乙酸鉛棉花塞入導氣管中，是為吸收可能產生的硫化氫，使其生成硫化鉛而滯留在棉花上，以免吸收液吸收產生干擾，硫化物和銀離子生成灰黑色的硫化銀，但乙酸鉛棉花要塞得不松不緊為宜。
（12）無砷鋅粒。
不同形狀和規格的無砷鋅粒，因其表面積不同，與酸反應的速度就不同，這樣生成的氫氣氣體流速不同，將直接影響吸收效率和測定結果。一般認為蜂窩狀鋅粒3g，或大顆粒鋅粒5g均可獲得良好結果。也有人認為大小顆粒的鋅?；旌鲜褂脛t效果滿意。一般確定標準曲線與試樣均用同一規格的鋅粒為宜。
（13）氫氧化鈉溶液（200g/L）。
（14）硫酸溶液（6＋94）：量取6.0ml硫酸，小心倒入94ml水中，混勻。
（15）二乙氨基二硫代甲酸銀-三乙醇胺-三氯甲烷溶液：稱取0.25g二乙氨基二硫代甲酸銀〖（C2H5）2NCS2Ag〗置于乳缽中，加少量三氯甲烷研磨，移入100ml量筒中，加入1.8ml三乙醇胺，再用三氯甲烷分次洗滌乳缽，洗液一并移入量筒中，再用三氯甲烷稀釋至100.0ml，放置過夜。濾入棕色瓶中保存。
**二乙氨基二硫代甲酸銀（silver diethyl dithio carbamate），或稱二乙基二硫代氨基甲酸銀鹽（diethyl dithio carbamic acid，Ag salt），（C2H5）2NC（S）SAg，分子量256.15，為黃色粉末，不溶于水而溶于三氯甲烷，性質極不穩定，遇光或熱，易生成銀的氧化物而呈灰色，因而配置濃度不易控制。若市售品不適用，實驗室也可自行制備。
**二乙氨基二硫代甲酸銀制備法：分別溶解1.7g硝酸銀、2.3g二乙氨基二硫代甲酸鈉（DDCNa，銅試劑）于100ml蒸餾水中，冷卻到20℃以下，緩緩攪拌混合，過濾生成的檸檬黃色銀鹽（AgDDC）沉淀，用冷蒸餾水洗滌沉淀數次，在干燥器中干燥，避光保存備用。
**吸收液中AgDDC濃度以0.2%～0.25%為宜，濃度過低將影響測定的靈敏度及重現性，因此，配置試劑時，應放置過夜或在水浴上微熱助溶。輕微的混濁可以過濾除去。若試劑溶解度不好時，應重新配制，吸收液必須澄清。
（16）砷標準儲備溶液：精密稱取0.1320g在硫酸干燥器中干燥過的或在100℃干燥2h的三氧化二砷，加5ml 200g/L氫氧化鈉溶液，溶解后加25ml硫酸（6＋94）溶液，移入1000ml容量瓶中，加新煮沸冷卻的水稀釋至刻度，儲存于棕色玻璃塞瓶中。此溶液每毫升相當于0.10mg砷。
（17）砷標準使用液：吸取1.0ml砷標準溶液，置于100ml容量瓶中，加1ml硫酸（6＋94）溶液，加水稀釋至刻度，此溶液每毫升相當于1.0μg砷。
4.儀器
（1） 分光光度計。
（2） 測砷裝置
① 100～150ml錐形瓶：19號標準口。
② 導氣管：管口19號標準口或經堿處理后洗凈的橡皮塞與錐形瓶密合時不應漏氣。管的另一端管徑1.0mm。
③ 吸收管：10ml刻度離心管作吸收管用。

2005-6-19 20:37:00

5.操作方法

5.1樣品消化
（1）硝酸-高氯酸-硫酸法
A. 糧食、粉絲、粉條、豆干制品、糕點、茶葉等及其他含水分少的固體食品：稱取5.00g或10.00g的粉碎樣品，置于250～500ml定氮瓶中，先加水少許使濕潤，加數粒玻璃珠，10～15ml硝酸-高氯酸混合液，放置片刻，小火緩緩加熱，待作用緩和，放冷。沿瓶壁加入5ml或10ml硫酸，再加熱，至瓶中液體開始變成棕色時，不斷沿瓶壁滴加硝酸-高氯酸混合液至有機質*分解。加大火力，至產生白煙，溶液應澄明無色或微帶黃色，放冷。在操作過程中應注意防止爆炸。
加20ml水煮沸，除去殘余的硝酸至產生白煙為止，如此處理兩次，放冷。將冷后的溶液移入50ml或100ml容量瓶中，用水洗滌定氮瓶，洗滌液并入容量瓶中，放冷，加水至刻度，混勻。定容后的溶液每10ml相當于1g樣品，相當加入硫酸量1ml。
樣品消化液中殘余的硝酸需如法驅盡，硝酸的存在影響反應與顯色，會導致結果偏低，必要時需增加測定用硫酸的加入量。
取與消化樣品 相同量的硝酸-高氯酸混合液和硫酸，按同一方法做試劑空白實驗。
B. 蔬菜、水果：稱取25.00g或50.00g洗凈打成勻漿的樣品，置于250～500ml定氮瓶中，加數粒玻璃珠，10～15ml硝酸-高氯酸混合液，以下按糧食等樣品自"放置片刻"起依法操作，但定容后的溶液每10ml相當于5g樣品，相當加入硫酸量1ml。
C. 醬、醬油、醋、冷飲、豆腐、腐乳、醬腌菜等：稱取10.00g或20.00g樣品（或吸取10.00ml或20.00ml液體樣品），置于250～500ml定氮瓶中，加數粒玻璃珠，5～15ml硝酸-高氯酸混合液，以下按糧食等樣品自"放置片刻"起依法操作，但定容后的溶液每10ml相當于2g樣品或2ml樣品。
D. 含酒精性飲料或含二氧化碳飲料：吸取10.00ml或20.00ml樣品，置于250～500ml定氮瓶中，加數粒玻璃珠，先用小火加熱除去乙醇或二氧化碳，再加5～10ml硝酸-高氯酸混合液，混勻后，以下按糧食等樣品自"放置片刻"起依法操作，但定容后的溶液每10ml相當于2ml樣品。
吸取5～10ml水代替樣品，加與消化液相同量的硝酸-高氯酸混合液和硫酸。按相同操作方法做試劑空白實驗。
E. 含糖量高的食品：稱取5.00g或10.00g的粉碎樣品，置于250～500ml定氮瓶中，先加水少許使濕潤，加數粒玻璃珠，10～15ml硝酸-高氯酸混合后，搖勻。緩緩加入5ml或者10ml硫酸，待作用緩和停止起泡沫后，再加大火力，至有機質分解*，發生白煙，溶液應澄明無色或微帶黃色，放冷。以下按糧食等樣品自"加20ml水煮沸"起依法操作。
F. 水產品：取可食部分樣品搗成勻漿，稱取5.00g或10.00g（海產藻類、貝類可適當減少取樣量），置于250～500ml定氮瓶中，加數粒玻璃珠，10～15ml硝酸-高氯酸混合后，以下按糧食等樣品自"沿瓶壁加入5ml或10ml硫酸" 起依法操作。
（2）硝酸-硫酸法：以硝酸代替硝酸-高氯酸混合液進行操作。
（3）灰化法
A. 糧食、茶葉及其他含水分少的食品：稱取5.00g磨碎樣品，置于坩堝中，加入1g氧化鎂，1ml氯化鎳及10ml硝酸鎂溶液，混勻，浸泡4h。于低溫或置水浴鍋上蒸干。用小火炭化至無煙后移入馬弗爐中加熱至550℃，灼燒3～4h，冷卻后取出。
加5ml水濕潤灰分后，用細玻棒攪拌，再用少量水洗下玻棒上附著的灰分至坩堝內。放置水浴上蒸干后移入高溫爐550℃灰化2h，冷卻后取出。
加5ml水濕潤灰分，再慢慢加入10ml鹽酸溶液（1＋1），然后將溶液移入50ml容量瓶中。坩堝用鹽酸溶液（1＋1）洗滌3次，每次5ml，再用水洗滌3次，每次5ml，洗滌液均并入容量瓶中，再加水至刻度，混勻。定容后的溶液每10ml相當于1g樣品，相當于加入鹽酸量（中和需要量除外）1.5ml。全量供銀鹽法測定時，不必再加鹽酸。
取于灰化樣品相同量的氧化鎂和硝酸鎂溶液，按同一操作方法作試劑空白試驗。
B. 植物油：稱取5.00g樣品，置于50ml瓷坩堝中，加10g硝酸鎂，再在上面覆蓋2g氧化鎂，將坩堝置小火上加熱，至剛冒煙，立即將坩堝取下，以防內容物溢出，待煙小后，再加熱至炭化*。將坩堝移至馬弗爐中，550℃以下灼燒至灰化*，冷卻取出。
加5ml水濕潤灰分，再緩緩加入15ml鹽酸溶液（1＋1），然后將溶液移入50ml容量瓶中。坩堝用鹽酸溶液（1＋1）洗滌5次，每次5ml，洗滌液均并入容量瓶中，加鹽酸（1＋1）至刻度，混勻。定容后的溶液每10ml相當于1g樣品，相當于加入鹽酸量（中和需要量除外）1.5ml。
取于消化樣品相同量的氧化鎂和硝酸鎂，按同一操作方法作試劑空白試驗。
C. 水產品：取可食部分樣品搗成勻漿，稱取5.00g置于坩堝中，加1g氧化鎂及10ml硝酸鎂溶液，混勻，浸泡4h。以下按灰化法中糧食等樣品自"于低溫或置水浴鍋上蒸干"起依法操作。

5.2測定
（1）用硝酸-高氯酸-硫酸或硝酸-硫酸消化液
吸取一定量的消化后的定容溶液（相當于5g樣品）及同量的試劑空白液，分別置于150ml錐形瓶中，補加硫酸至總量為5ml，加水至50～55ml。
吸取0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0ml砷標準使用液（相當于0，2，4，6，8，10μg砷）分別置于150ml錐形瓶中，加水至40ml，再加10ml硫酸（1＋1）。
于樣品消化液，試劑空白液及砷標準溶液中各加3ml 150g/L碘化鉀溶液，0.5ml酸性氯化亞錫溶液，混勻，靜置15min。各加入3g無砷鋅粒，立即分別塞上裝有乙酸鉛棉花的導氣管，并使管插入盛有4ml銀鹽溶液的離心管中的液面下，在常溫下反應45min后，取下離心管，加三氯甲烷補足4ml。用1cm比色杯，以零管調節零點，于波長520nm處測吸光度，繪制標準曲線比較。
**砷化氫發生及吸收應防止在陽光直射下進行，同時應控制溫度在25℃左右，溫度過高反應快，吸收不*，過低則反應時間延長，作用時間以1h為宜，夏季可縮短為45min。室溫高時三氯甲烷部分揮散，在比色前用三氯甲烷補足4ml，并不影響結果。
吸收液中含有水分時，當吸收與比色環境的溫度改變，會引起輕微渾濁，比色時可微溫使其澄清。
（2）用灰化法消化液
取灰化法消化液及試劑空白液，分別置于150ml錐形瓶中。吸取0.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0ml砷標準使用液（相當于0，2，4，6，8，10μg砷）分別置于150ml錐形瓶中，加水至43.5ml，再加6.5ml鹽酸。以下按①自"于樣品消化液"起依法操作。
6.計算
（A1－A2）× 1000
X = --------------------------------------
M × V2/V1 × 1000
式中：X-樣品中砷的含量，mg/kg或mg/L；
A1-測定用樣品消化液中砷的含量，μg；
A2-試劑空白液中砷的含量，μg；
M -樣品質量（體積），g（ml）；
V1-樣品消化液的總體積，ml；
V2-測定用樣品消化液的體積，ml。


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2005-6-19 20:38:00

二、 氫化物原子熒光光度法
1.原理
食品樣品經濕消解或干灰化后，加入硫脲使五價砷還原為三價砷，再加入硼氫化鈉或硼氫化鉀使還原生成砷化氫，由氬氣載入石英原子化器中分解為原子態砷，在特制砷空心陰極燈的發射光激發下產生原子熒光，其熒光強度在固定條件下與被測液中的砷濃度成正比，與標準系列比較定量。
2.試劑
本方法所用試劑均為分析純以上試劑，測定用水為去離子水或同等程度的水。
（1） 氫氧化鈉溶液（2g/L）。
（2） 硼氫化鈉（NaBH4）溶液（10g/L）：稱取硼氫化鈉10.0g，溶于2g/L氫氧化鈉溶液1000ml中，混勻。此溶液于冰箱中可保存10天，取出后應當日使用。（也可稱取14g硼氫化鉀代替10g硼氫化鈉）
（3） 硫脲溶液（50g/L）。
（4） 硫酸溶液（1+9）：量取硫酸100ml，小心倒入900ml水中，混勻。
（5） 氫氧化鈉溶液（100g/L）（供配制砷標液用，少量即夠）。
（6） 砷標準溶液
A. 砷標準貯備液，含砷0.1mg/ml。精密稱取于100℃干燥2h以上的三氧化二砷（As2O3）0.1320g，加100g/L氫氧化鈉10ml溶解，用水定量轉入1000ml容量瓶中，加硫酸（1+9）25ml，定容至刻度。
B. 砷標準使用液，含砷1μg/ml。吸取1.00ml砷標準貯備液于100ml容量瓶中，用水稀釋至刻度。此液應當日配制使用。
（7） 濕消解試劑：硝酸、硫酸、高氯酸。
（8） 干灰化試劑：六水硝酸鎂（150g/L）、氧化鎂、鹽酸（1+1）。
3.儀器
XDY、AFS或VI系列氫化物原子熒光光度計。
4.操作步驟
4.1樣品消解
（1） 濕消解：固體樣品稱樣1～2.5g，液體樣品稱樣5～10g（或ml）（至小數點后第2位），置于50～100ml錐形燒瓶中，同時做兩份試劑空白。加硝酸20～40ml，硫酸1.25ml，搖勻后放置過夜，置于電熱板上加熱消解。若消解液處理至10ml左右時仍有未分解物質或色澤變深，稍冷，補加硝酸5～10ml，再消解至10ml左右觀察，如此重復兩三次，注意避免炭化。如仍不能消解*，則加入高氯酸1～2ml，繼續加熱至消解*后，再持續蒸發至高氯酸的白煙散盡，硫酸的白煙開始冒出，冷卻，加水25ml，再蒸發至冒硫酸白煙。冷卻，用水將內容物定量轉入25ml容量瓶或比色管中，其間加入50g/L硫脲2.5ml，補水至刻度并混勻，備測。
（2） 干灰化：一般應用于固體樣品。稱取1～2.5g（至小數點后第2位）于50～100ml坩堝中，同時做兩份試劑空白。加150g/L硝酸鎂10ml混勻，低熱蒸干，將氧化鎂1g仔細覆蓋在干渣上，于電爐上炭化至無黑煙，移入550℃馬弗爐灰化4h。取出放冷，小心加入鹽酸（1+1）10ml以中和氧化鎂并溶解灰分，轉入25ml容量瓶或比色管，向容量瓶或比色管中加入50g/L硫脲2.5ml，另用硫酸（1+9）12.5ml分次涮洗坩堝后轉出合并，直至25ml刻度，混勻備測。
4.2標準系列制備：取25ml容量瓶或比色管6支，依次準確加入1μg/ml砷標準使用液0，0.05，0.2，0.5，2.0，5.0ml（各相當于砷濃度0，2，8，20，80，200ng/ml），各加硫酸（1+9）12.5ml，50g/L硫脲2.5ml，補加水至刻度，混勻備測。
4.3測定
儀器參考條件：光電倍增管電壓：400V；砷空心陰極燈電流：35mA；原子化器：溫度820～850℃；高度7mm；氬氣流速：載氣600ml/min；屏蔽氣800ml/min；測量方式：熒光強度或濃度直讀；讀數方式：峰面積；讀數延遲時間：1s；讀數時間：15s；硼氫化鈉溶液加入時間：5s；標液或標樣加入體積：2ml。
（1） 濃度方式測量：如直接測熒光強度，則在開機并設定好儀器條件后，預熱穩定約20min。按"B"鍵進入空白值測量狀態，連續用標準系列的0管進樣，待讀數穩定后，按空檔鍵寄存下空白值（即讓儀器自動扣底）即可開始測量。先依次測標準系列（可不再測0管），標列測完后應仔細清洗進樣器（或更換一支），并再用0管測試使讀數基本回零后，才能測試劑空白和樣品，每測不同的樣品前都應清洗進樣器。記錄（或打?。┫聹y量數據。
（2） 儀器自動方式：利用儀器提供的軟件功能可進行濃度直讀測定，為此在開機、設定條件和預熱后，還需輸入必要的參數，即樣品量（g或ml），稀釋體積（ml），進樣體積（ml），結果的濃度單位，標準系列各點的重復測量次數，標準系列的點數（不計零點）及各點的濃度值。首先進入空白值的測量狀態，連續用標列的0管進樣以獲得穩定的空白值并執行自動扣底后，再依次測標列（此時0管需再測一次）。在測樣液前，需再次進入空白值測量狀態，先用標列0管測試使讀數復原并穩定后，再用兩個試劑空白各進一次樣，讓儀器取其均值作為扣底的空白值，隨后即可依次測樣品。測定完畢后退回主菜單，選擇"打印報告"即可將測定結果打出。
5.計算
如果采用熒光強度測量方式，則需先對標準系列的結果進行回歸運算（由于測量時0管強制為0，故零點值應該輸入以占據一個點位），然后根據回歸方程求出試劑空白液和樣品被測液的砷濃度，再按下式計算樣品的砷含量：
（c－c0） × 25
X = --------------------------
M × 1000
式中：X-樣品的砷含量，mg/kg（或mg/L）；
c-樣品被測液的濃度，ng/ml；
c0-試劑空白液的濃度，ng/ml；
M-樣品的量，g（或ml）。
6.注意事項
（1）線性范圍和相關系數：標準曲線的線性范圍為0～200ng/ml，在此范圍內相關系數>0.9990。如果采用儀器軟件提供的二、三次曲線回歸功能，則量程范圍還可擴大1個數量級。
檢出限：本方法的檢出限為2ng/ml砷（按低濃度測量時的三倍標準差計算），若取樣量以5g（ml）計，則對樣品的zui低測定濃度為0.01mg/kg（或mg/L）。
精密度：濕消解法重復測定的相對標準偏差<10%；干灰化法重復測定的相對標準偏差<15%。
準確度：濕消解法測定的回收率為90%～105%；干灰化法測定的回收率為85%～100%。
（2）砷的氫化和原子化機理
① 在酸性環境中，硫脲使五價砷還原為三價砷，自身被氧化為甲脒化二硫。
② 硼氫化鈉（或鉀）與酸作用生成大量新生態氫。
③ 三價砷再被新生態氫還原為氣態的砷化氫逸出。
④ 砷化氫被氬氣和反應中產生的氫氣載入石英管爐中，受熱后即分解為原子態砷，在砷燈發射光的激發下產生原子熒光。
（3）試劑及其濃度和用量
A. 硼氫化鈉的濃度：硼氫化鈉的水溶液不太穩定，濃度越稀越不穩定，必須加入氫氧化鈉以提高其穩定性；但氫氧化鈉又不能加得太多，否則會劇烈降低反應時的酸度。采用進口試劑按本方法配制，保存于冰箱中兩周內效果不變。國產試劑純度較低，穩定性也較差。
B. 硼氫化鈉的用量：在本儀器上硼氫化鈉溶液的用量是通過加液時間來控制的，經實測，在儀器上流速約為0.3ml/s。實驗證明，硼氫化鈉溶液的用量對測定靈敏度有顯著影響，當用量少時，由于還原力弱，靈敏度就低；當用量過多時，由于發生大量氫氣產生稀釋作用，靈敏度也降低。*的用量是與具體的反應條件（硼氫化鈉的濃度和堿度、樣液的加入體積和酸度）密切相關的。在本方法條件下，10g/L的硼氫化鈉加液時間為5s（約1.5ml）效果。
C. 硫酸的用量：在生成砷化氫的反應中酸性介質可用硫酸、鹽酸或其它酸，由于在樣品消解時要加入硫酸，故本方法采用硫酸作介質。在實驗所得的熒光強度-硫酸濃度曲線上，熒光強度起初隨著酸度的增加而急劇增大，繼之由于氫氣的稀釋作用而逐漸減小，約在硫酸（1+49）酸度時達到平臺區。考慮到硼氫化鈉溶液的流速以及消解后硫酸的剩余量可能出現的變異，本方法中硫酸的用量選擇了相當于平臺區中部硫酸濃度（1+19）的量。
D. 硫脲的影響：實驗證明單用硼氫化鈉不能將五價砷定量的還原為砷化氫，此時還原率只有70%～80%；而加入硫脲預還原后反應便能達到*，由于樣品經消解后絕大部分砷以被氧化為五價，所以加入硫脲是必須的。
（4）樣品消解
A. 濕消解：對于很多加酸后反應劇烈的樣品，應該冷處理較長時間（或過夜），以防止產生大量泡沫造成損失。必須避免消解液炭化，因碳可能把砷還原為元素態而造成大量損失。消解液中加入的酸（主要是硝酸）是造成空白值的主要因素，如果不同的樣品消耗的酸量差異大，其空白值差異也大，此時應做各自的試劑空白。
B. 干灰化：硝酸鎂在灼燒時放出氧，起著促進灰化的作用。150g/L硝酸鎂溶液10ml分解后生成氧化鎂0.23g，加上加入的氧化鎂共1.23g，以后恰能被鹽酸（1+1）10ml中和。氧化鎂除了保溫傳熱以外，更起著防止砷揮發損失的作用，因為灼燒中升華出的三氧化二砷能被它固定下來。因此在灰化前，應將氧化鎂粉末仔細覆蓋在全部樣品干渣的表面。
C. 干擾：在研究對砷測定的干擾時，考慮了1）能生成氫化物的元素；2）在食品中經常存在的元素，因此選擇了銻、鉛、錫、銅、鋅五種進行試驗。當加入一定濃度倍數的試驗離子后使結果偏離在±10%以上時，即判為有干擾。結果如下：銻，6倍以下無干擾；鉛，20倍以下無干擾；錫，30倍以下無干擾；銅，200倍以下無干擾；鋅，200倍以下無干擾。

2005-6-19 20:39:00

三、氫化物發生原子吸收光譜法
1. 原理
樣品經濕消化處理后，加入還原劑使五價砷還原為三價砷，再加入硼氫化鈉或硼氫化鉀還原生成砷化氫，由氬氣載入火焰原子化器中分解為原子態砷蒸氣吸收波長193.7nm的共振線，其吸收量與砷含量成正比，與其標準系列比較定量。
2. 試劑
實驗用水為石英亞沸高純水或電阻率80萬歐姆以上的去離子水。所有試劑要求使用優級純或更別試劑。
所用硝酸，BV-I級硝酸和MOS級鹽酸均購自北京化學試劑研究所。
（1） 氫氧化鈉溶液（2g/L）。
（2） 硼氫化鈉（NaBH4）溶液（10g/L）：稱取硼氫化鈉10.0g，溶于2g/L氫氧化鈉溶液1000ml中，混勻。此溶液于冰箱中可保存10天，取出后應當日使用。（也可稱取14g硼氫化鉀代替10g硼氫化鈉）
（3） 10%碘化鉀溶液：取10g碘化鉀溶于100.0ml雙蒸水中。
（4） 鹽酸溶液（1+1）：量取鹽酸100ml，小心倒入100ml水中，混勻。
（5） 20%鹽酸羥銨溶液：取20g鹽酸羥銨溶于100.0ml雙蒸水中。
（6） 砷標準溶液
A. 砷標準貯備液 砷標準溶液 1000.0mg/L（購于國家標準物質中心）。
B. 砷標準中間液 將砷標準儲備液以0.5mo1/L鹽酸逐級稀釋至100.0mg/L。
C. 砷標準使用液 吸取0.50，1.25，2.50，3.75ml砷標準貯備液于25.0ml容量瓶中，加入2.5ml10%碘化鉀溶液或10%硫脲溶液，用鹽酸（1+1）溶液稀釋至刻度。此液應當日配制使用。
（7） 硝酸溶液（70+30）：取70ml硝酸加入30ml雙蒸水中。
（8） 硝酸+高氯酸混合液（4+1）：量取80ml硝酸，加20ml高氯酸，混勻。
（9） 10%硫脲溶液：取10g硫脲溶于100.0ml雙蒸水中。
3儀器
（1） 儀器：Varian AA--200型火焰原子吸收分光光度計（附氫化物發生裝置及砷空心陰極燈）。
（2） 微波樣品消解裝置 MDS--2000型（美國CEM公司）。
（3） 所用玻璃儀器均需以硝酸 （1+5） 浸泡過夜，用水反復沖洗，然后蒸餾水三次沖洗。并用1mol/L乙二氨基四乙酸二鈉鹽浸泡過夜，用水反復沖洗，zui后用石英亞沸高純水沖洗三次，備用。
（4） 儀器條件：見表1。
表1 儀器參數 元 素
波長 （nm）
燈電流 （mA）
延遲時間（s）

As
193.7
8
30

4操作方法
4.1樣品處理
（1）樣品預處理：采樣和制備過程中，應注意不使樣品污染。植物性中藥材去雜物后，取樣品于60℃干燥4小時，磨碎過20目篩，儲于塑料瓶中．保存備用。
（2）微波消解：精密稱取0.2000--0.5000g樣品于微波消化罐中，加10mol/L硝酸4.0ml，蓋好內蓋，旋緊外蓋，放入微波消解裝置，按照預先設定的程序（見表2）進行升溫消化，待消化完畢后，取出消化罐，將消化液定量移入10.0ml或25.0ml比色管中，用雙蒸水少量多次洗罐，稀釋至刻度，混勻，即供試樣液。同樣做試劑空白液。
表2 微波消化升溫程序 步 驟
1
2
3
4
5

功率，%
100
100
100
100
100

壓力，Psi
20
40
85
135
175

升壓時間，min
10
10
10
10
10

保壓時間，min
5
5
5
5
5

排風量，%
100
100
100
100
100

注：1Psi=6.89kPa（Psi：磅力每平方英寸，是進口儀器常用非法定壓力單位，為便于使用，本方法不再換算成法定壓力單位）。
取10ml比色管，依次準確加入1.0 ml上述樣液，先加入少許鹽酸（1+1）溶液，再加入1.0ml10%碘化鉀溶液，1.0ml20%鹽酸羥胺溶液，用鹽酸（1+1）溶液稀釋至刻度，混勻備測。
（3）硝酸-高氯酸濕消化：精密稱取0.5000--1.0000g樣品于消化瓶中，加入硝酸-高氯酸溶液15.0ml，同時做兩份試劑空白，混勻，放置過夜。置于程序電熱板上加熱消解，緩慢加熱，若消解液處理至10ml左右時仍有未分解物質或色澤變深，稍冷，補加硝酸5～10ml，再消解至10ml左右觀察，如此重復兩三次，注意避免炭化。如仍不能消解*，則加入高氯酸1～2ml，繼續加熱至消解*后，再持續蒸發至高氯酸的白煙散盡，冷卻，加水5ml，再蒸發至冒硝酸白煙。冷卻，用水將內容物定量轉入10ml比色管中，其間加入10%硫脲1.0ml，補水至刻度并混勻，備測。
**硝酸-高氯酸消化的樣品不能用碘化鉀作為還原劑，因為其與高氯酸反應生成高氯酸鉀的乳白色沉淀，影響測定。所以用硫脲作為還原劑。
4.2測定：在調整好的儀器條件下，將標準溶液，空白液，樣品溶液分別導入置于火焰上的石英池中原子化進行測定。每做一批樣品，同時測定標準參考物質中砷元素的含量。
5.計算
（A1－A2） × V
X ＝ ----------------------------
M × 1000
式中：X － 樣品中砷含量，mg／kg （或mg／L）；
A1－ 測定樣液中砷含量，mg／L；
A2－ 空白液中砷含量，mg／L；
M－ 樣品質量或體積，g （ml）；
V －樣品定容總體積，ml。