化工儀器網
詳細介紹
操作程序
- 加樣反應：取出所需量的反應板條，每孔加樣本稀釋液（5號液）2滴，再分別加入待檢的血清樣本10ul，混勻。同時設陰性、陽性及空白對照各一孔；陰性、陽性對照不用再稀釋，直接加樣100ul即可，空白對照孔僅加入樣本稀釋液（5號液）2滴。37℃避光反應30分鐘后甩去孔內液體，每孔加洗滌液（2號液）1滴，立即用蒸餾水注滿，靜置30秒后甩去，再直接用蒸餾水洗滌四次，甩去，拍干。
- 加酶反應：除空白對照孔外其余每孔加酶結合物（1號液）2滴，37℃避光反應30分鐘后甩去孔內液體，如上洗滌，拍干。
- 顯色反應：加底物（3號液）和顯色劑（4號液）各1滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液（6號液）1滴，混勻，終止反應（加終止液后藍色會變為黃色）并判讀結果。
結果判斷
- 肉眼觀察：陰性對照接近無色，陽性對照呈明顯黃色，表示試驗有效。待檢孔接近無色表示該標本為陰性，待檢孔呈明顯黃色表示該標本為陽性。
- 儀器判斷：以空白對照調零用酶標儀于450nm（620nm作參比波長）讀取O.D值，待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性。當陰性對照O.D值低于0.05時按0.05計算。
化工儀器網