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油脂樣品中苯并(a)芘的測定反相液相色譜法

閱讀:2440      發布時間:2012-11-12
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一、背景

國標GB/T 22509-2008中利用22g的氧化鋁柱進行油脂中的苯并(a)芘測定的前處理,利用氧化鋁吸附油脂,通過80mL的石油醚或正己烷進行洗脫苯并(a)芘。該方法使用溶劑多,操作時間長,而且氧化鋁對某些油樣的凈化效果較差。
本實驗利用Cleanert BAP-2固相萃取柱(裝有經過特殊改性的活性炭)萃取油性樣品中的苯并(a)芘,然后再用甲苯洗脫的方法,開發了一套油脂中苯并(a)芘檢測的新方法,相對于國標GB/T 22509-2008的方法,具有更佳的油脂去除效果、穩定的苯并(a)芘回收率,溶劑用量更少更環保,方法也更簡便。

二、實驗方法

2.1實驗試劑及標準品

正己烷(色譜純,4L/瓶,P/N: AH216),二氯甲烷(色譜純,4L/瓶,P/N: AH300),甲苯(色譜純或分析純重蒸),乙腈(色譜純,4L/瓶,P/NAH015-4

苯并(a)芘(100mg/瓶,P/N: B1760
2.2實驗儀器及耗材
Agilent HPLC,配熒光檢測器,移液槍,PTFE濾頭0.22μmP/NAS041320-T)。

、實驗步驟

3.1試樣處理
1)使用正己烷配制200ppm苯并(a)芘標準品標樣備用,并用正己烷稀釋成1ppm苯并(a)芘工作液備用。
2)取0.3g油于12mL樣品瓶(P/N1509-1800P/N1515-1748)中,加1mL正己烷渦旋震蕩溶解,作為待凈化液;若要做加標實驗,根據需要向油中先加入適量的標準品。
3.2 固相萃取方法
固相萃取柱名稱:Cleanert BAP-2 (P/NBap10-2)
固相萃取方法如下:
Ø 活化:2mL正己烷;
Ø 上樣:3.1中的待凈化液;
Ø 淋洗:6mL二氯甲烷;
Ø 洗脫:甲苯12mL,收集于20mL玻璃瓶(P/NAV7100-7P/NAV7920-0)中
Ø 濃縮:將樣液在80下氮氣吹干,用0.3mL正己烷定容,過PTFE 0.22um濾頭,收集于1.5mL樣品瓶(P/N1109-0519P/NAV2100-0)的內插管(P/N0609-0357)中,待測;
3.3液相色譜法檢測條件
(1)色譜條件:
色譜柱:Venusil ASB-C18,4.6mm×250mm×5.0µm(P/N:VS952505-0);
流動相:乙腈:水 88%:12%; 流速:1.0mL/min進樣量:20µL
熒光檢測器:發射波長406nm,激發波長384nm

四、方法學考察

4.1 標準曲線繪制
將標準工作液稀釋到濃度分別為:0.51.02.03.55.07.510.0µg/L,根據峰面積建立標準曲線。根據實際油樣中苯并(a)芘的可能含量,可以將標準曲線的線性范圍延伸到50µg/L
4.2 樣品分析
3.1的樣品進樣分析,采用外標法定量。
4.3 計算公式 苯并(a)芘含量按下式計算:
其中:
w為樣品中苯并(a)芘含量,單位為µg/Kg
c為從標準曲線得到的待測液中苯并(a)芘的濃度,單位為µg/L
V為待測液體積,單位為µL,本方法為300µL
m為稱取的油樣品質量,單位為g

五、測試結果

5.1液相色譜法測試結果

1 空白實驗色譜圖

2 5µg/L苯并(a)芘的標準樣品的色譜圖

3 實際樣品的加標(5µg/L)回收率實驗色譜圖

1 苯并芘的回收率
 
5µg/L標準品
油脂實際樣品
油脂加標樣品
回收率
苯并(a)芘響應值
1334008
78201
1289072
90.77%

六、實驗結論
Cleanert BAP-2 去除油脂中雜質的效果良好,前處理的操作過程簡單快捷。檢測方法可采用液相色譜-熒光檢測法,在5μg/L的添加水平的回收率可達85%以上。

 

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