国产一级a毛一级a看免费视频,久久久久久国产一级AV片,免费一级做a爰片久久毛片潮,国产精品女人精品久久久天天,99久久久无码国产精品免费了

關鍵詞：N-Nitrosamines，NDSRIs，N-亞硝胺，OECD 471，Enhanced Ames test，增強型Ames，Mutation Test，Induced Hamster Liver S9, 誘導倉鼠肝S9，誘導金黃地鼠肝S9，CYP450

細菌回復突變試驗，又稱Ames試驗，是一種廣泛用于檢測化合物誘變潛力的毒理試驗。盡管其是驗證化合物致突變作用的基石，但在評估一些需要復雜代謝激活的化合物時[如N-亞硝胺(N-Nitrosamines, NDSRIs)]，標準的Ames試驗表現出了明顯的局限性，因此，在OECD 471導則下增強Ames（Enhanced Ames）應運而生。

一、N-亞硝胺的基本概念

N-亞硝胺類雜質(NDSRIs)是一類分子中含有N-亞硝基結構的化合物（N-nitrosamines），含有亞硝基官能團，結構式一般為R1（R2）N-N=O。該類化合物常以痕量存在于自然界和食品中，包含空氣、水、食物等各種生物生存所依賴的介質中，因此藥物的制備和生產過程中不可避免地引入該類物質。但多種N-亞硝胺物質已表現出明確的基因毒性，會造成DNA損傷并進一步發展成癌癥，且極低地劑量暴露也會導致相同結果。

O-亞硝胺的遺傳毒性往往不依賴于其藥物本身，而是其活化后的代謝產物具有致癌性。N-亞硝胺的遺傳毒性機制為：代謝活化（CYP450）→ 生成烷化劑（CH??）→ DNA加合物（O?-MeG）→ G→A突變 → 癌基因激活/抑癌基因失活 → 癌癥。

(1)      代謝活化：N-亞硝胺化合物先經細胞色素P450（如CYP2E1）代謝活化，生成具有高度反應活性的烷化中間體（如重氮烷、碳正離子），以下為以NDMA為例的經典代謝途徑：

(2)      DNA烷基化：活性中間體（如CH3+）攻擊DNA堿基，形成DNA加合物，主要靶點包括

O?-甲基鳥嘌呤（O?-MeG）（最-具致突變性）、N?-甲基鳥嘌呤（N?-MeG）（較常見但修復較快）和N3-甲基腺嘌呤（N3-MeA），其中O?-甲基鳥嘌呤（O?-MeG）是關鍵損傷。即在DNA復制時，O?-甲基鳥嘌呤傾向于與胸腺嘧啶（T）配對（而非正常的胞嘧啶），導致了G→A突變（點突變），若該過程未被修復，則可引發RAS、TP53等關鍵基因突變，從而促進癌癥發生。

目前，國際癌癥研究機構（International Agency for Research on Cancer，IARC）已將多種N0亞硝胺化合物列為致癌物，其中N-二甲基亞硝胺（N-dimethylnitrosamine，NDMA）和N-亞硝基二乙胺（N-diethylnitrosamine，NDEA）被列入2A類致癌物，其他幾種藥物歸為2B類致癌物。且根據國際人用藥品注冊技術要求協調理事會（International Coucil for Harmonization of Technical Requirement for Pharmaceuticals for Human Use，ICH）M7指南指出亞硝胺類藥物相關雜質（N-Nitrosamine Drug Substance Related Impurities, NDSRI）是一類在藥物中可能存在的亞硝胺類致癌雜質，具有高度致癌性，被歸為I類雜質，需要嚴格控制。因此，對N-亞硝胺類化合物進行合理的遺傳毒性試驗是非常必要的。

二、增強Ames試驗（Enhanced Ames Test）

作為金標準的經典Ames試驗，在面對某些N-亞硝胺（如NDMA）時也會出現靈敏度低、伴有假陰性結果的可能性。這是因為標準Ames Test具有一定的局限性，如代謝活化系統CYP酶表達不強、突變譜檢測有限等問題，因此EMA“Questions and answers for marketing authorisation holders/applicants on the CHMP Opinion for the Article 5(3) of Regulation (EC) No 726/2004 referral on nitrosamine impurities in human medicinal product（EMA Q&As指南）”中指出針對某些N-亞硝胺的Ames檢測應遵循FDA國家毒理學研究中心提供的增強Ames（Enhanced Ames Test）試驗條件進行驗證。該指導對菌株選擇、試驗方法、活化系統、陰性/陽性/溶劑對照等均提出了新標準。

菌株選擇

要求：鼠傷寒沙門氏菌TA98, TA100, TA1535,TA1537；埃希氏大腸桿菌WP2 uvrA（pKM101）

試驗方法

要求：預保溫和非平板摻入法

預保溫時間

要求：30 min

S9種類、濃度

要求：30%誘導大鼠肝S9和30%誘導倉鼠肝S9（Induced Hamster Liver S9）或誘導金黃地鼠肝S9（Induced Hamster Liver S9）

陰性/溶劑對照

要求：水；有機溶劑：如乙腈、甲醇和二甲基亞砜（DMSO）

陽性對照

要求：+S9：NDMA、1-環戊基-4-亞硝基哌-嗪、NDSRI

其中誘導金黃地鼠肝S9（Induced Hamster Liver S9）或誘導倉鼠肝S9（Induced Hamster Liver S9）制備方法及流程與大鼠肝S9一致，均采用苯-巴比-妥鈉和β-萘黃酮聯合誘導并進一步分離所得，其活性檢測也與大鼠肝S9結果相一致，但因其含有不同的CYP活性，所以是EMA建議的另一種代謝活化系統。

三、IPHASE 產品

綜上所述，針對不同藥物需進行的試驗也略有不同，IPHASE作為體外研究生物試劑引-領者，為滿足不同化合物的研究需求，減少客戶的試劑、菌株制備過程，不僅可為客戶提供一站式標準Ames試驗多規格試劑盒，更可為客戶提供增強Ames的相應試劑和菌株，致力于為客戶節省成本、節約時間，提高試驗可重復性。

發    文    章    得    獎    勵

凡使用本公司產品，在國內及國際刊物上發表論文（論文發表日起一年內），并注明產品屬于我司所有，即可申請獎勵。根據發表刊物影響因子不同，給予不同金額獎品：

非SCI論文及IF≤5分，500元禮品；

5分＜IF≤8分 800元禮品；

8分＜IF≤10分 1000元禮品；

IF≥10分 2000元禮品；

我司標準信息如下

【中文簡稱】匯智和源

【中文全稱】匯智和源生物技術（蘇州）有限公司

【英文名稱】IPHASE Biosciences

注：①禮品卡也可兌換同等金額產品購買抵用券；

    ②如遇我司公司名稱書寫不規范或不是第一作者等情況，對應獎品將無法發放，敬請諒解！

關    于    我    們

匯智和源，致力于為創新藥研發企業及生命科學研究機構提供高品質的生物試劑，IPHASE為公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

• 誘導倉鼠肝S9HamsterLiverS9

  所需試劑在線詢價