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IPHASE/匯智和源 推出快速平衡透析裝置助力血漿蛋白結(jié)合率研究

檢測(cè)樣品:平衡透析裝置 血漿蛋白結(jié)合率 血漿蛋白結(jié)合 平衡透析 超濾法

檢測(cè)項(xiàng)目:平衡透析裝置 血漿蛋白結(jié)合率 血漿蛋白結(jié)合 平衡透析 超濾法

方案概述:在正常情況下,各種藥物以一定的比率與血漿蛋白結(jié)合,在血漿中常同時(shí)存在結(jié)合型與游離型,而只有游離型藥物才具有藥物活性。血漿蛋白結(jié)合率(plasmaproteinbinding,PPB)實(shí)驗(yàn)的主要目的即是測(cè)定藥物與血漿蛋白的結(jié)合程度,即藥物進(jìn)入血液后,與血漿蛋白結(jié)合的藥量占血液藥物總量的比率?。血漿蛋白結(jié)合率反映了藥物在體內(nèi)的分布情況,對(duì)于評(píng)估藥物的療效和副作用具有重要意義?。

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更新時(shí)間2024年11月21日

上傳企業(yè)匯智和源生物技術(shù)(蘇州)有限公司

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在正常情況下,各種藥物以一定的比率與血漿蛋白結(jié)合,在血漿中常同時(shí)存在結(jié)合型與游離型,而只有游離型藥物才具有藥物活性。血漿蛋白結(jié)合率(plasma protein binding, PPB)實(shí)驗(yàn)的主要目的即是測(cè)定藥物與血漿蛋白的結(jié)合程度,即藥物進(jìn)入血液后,與血漿蛋白結(jié)合的藥量占血液藥物總量的比率‌。血漿蛋白結(jié)合率反映了藥物在體內(nèi)的分布情況,對(duì)于評(píng)估藥物的療效和副作用具有重要意義‌。


血漿蛋白結(jié)合率試驗(yàn)


目前常見的測(cè)定血漿蛋白結(jié)合率的方法有平衡透析法(Equilibrium dialysis, ED)、超濾法(Ultrafiltration, UF)及超速離心法(Ultracentrifugation, UC)等。


【平衡透析法】


原理:ED采用半透膜分割的兩隔室裝置進(jìn)行測(cè)定,一側(cè)加入含藥的蛋白溶液,另一側(cè)加入空白的緩沖液,此條件下僅游離藥物可以自由穿過半滲透膜,孵育一段時(shí)間,兩側(cè)達(dá)到平衡后兩側(cè)的游離藥物濃度相等,結(jié)合態(tài)的藥物仍然停留于蛋白溶液側(cè),通過測(cè)定兩側(cè)的藥物濃度即可算得PPB。


優(yōu)點(diǎn):無需施加壓力;


         具有高通量潛力;


         操作容易;


         溫度和pH值可控;


         樣品量低。


缺點(diǎn):需要大量等離子體和較長(zhǎng)的平衡時(shí)間;


         不適合不穩(wěn)定的化合物;


         不能用于高度疏水化合物。


【超濾法】


原理:UF采用半透膜分隔的兩隔室裝置進(jìn)行測(cè)定。含藥蛋白溶液加入上層隔室,在外界壓力或者離心條件快速的使游離藥物運(yùn)動(dòng)至下方buffer側(cè),通過測(cè)定兩側(cè)化合物濃度計(jì)算PPB。


優(yōu)點(diǎn):試驗(yàn)時(shí)間短,可顯著減少酯酶代謝、蛋白稀釋和蛋白滲漏造成的試驗(yàn)偏差。


缺點(diǎn):藥物非特異性結(jié)合效應(yīng)較明顯,尤其對(duì)于高脂溶性化合物。


【超速離心法】


原理:UC利用非常高的離心力(625000g)來分離游離態(tài)和結(jié)合態(tài)藥物。離心之后結(jié)合態(tài)的藥物與血漿蛋白一起分布于底層,中間層即為游離藥物分布層,最上層為極低密度的脂蛋白和乳糜微粒漂浮物。通過測(cè)定中間層和離心前初始藥物濃度即可算得PPB。


優(yōu)點(diǎn):具有時(shí)間短、樣品需求量小、非特異性吸附效應(yīng)弱和消除膜相關(guān)問題的優(yōu)勢(shì)。


缺點(diǎn):成本相對(duì)較高,在超速離心的作用下可能改變化合物的結(jié)合平衡。


其中,由原理可知,平衡透析法(ED)是一種濃度驅(qū)動(dòng)的過程,通過具有不同分子量截?cái)帱c(diǎn)(MWCO)的選擇性和可滲透性膜孔(如8K或12K MWCO)的擴(kuò)散將小體積血漿中的游離蛋白結(jié)合藥物分離出來。由于沒有施加外力(如壓力),ED被認(rèn)為是研究蛋白質(zhì)相互作用的真實(shí)性黃金標(biāo)準(zhǔn)。


IPHASE遵循黃金標(biāo)準(zhǔn),設(shè)計(jì)、開發(fā)由不銹鋼手柄、不銹鋼壓板、特氟龍版、不銹鋼連桿及底座組成的傳統(tǒng)平衡透析裝置。該裝置利用濃度驅(qū)動(dòng)的方法,輔以3.5Kd,12-14Kd,25Kd或50Kd的平衡透析膜(依據(jù)藥物分子量選擇),于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中孵育16小時(shí),助力客戶PPB試驗(yàn)驗(yàn)證。該裝置更適合一些試驗(yàn)體量大,且成本控制要求高的客戶。但傳統(tǒng)的平衡透析法也有需要大量等離子體和較長(zhǎng)的平衡時(shí)間等缺點(diǎn),此時(shí),快速平衡透析裝置就更為適用。

 

1.png

 

IPHASE快速平衡透析裝置


IPHASE/匯智和源作為體外研究生物試劑引·領(lǐng)者,基于平衡透析法(ED)存在的問題,升級(jí)、開發(fā)出一種快速平衡透析裝置,解決傳統(tǒng)ED技術(shù)需要大量等離子體和較長(zhǎng)的平衡時(shí)間的問題。


IPHASE快速平衡透析裝置,由含透析池、含透析膜的插件及底板組成,透析池內(nèi)通過插件和透析膜圍合形成一個(gè)獨(dú)立的透析膜室,而所屬透析池內(nèi)且處于透析膜室的外圍部分為緩沖液室,如下圖所示:紅色部分極為含透析膜的插件,其內(nèi)添加含藥的血漿等待測(cè)試驗(yàn),白色孔則為PBS添加孔。

 

2.jpg

 

IPHASE快速平衡透析裝置的創(chuàng)造結(jié)合了平衡透析(ED)技術(shù),該裝置也是由濃度驅(qū)動(dòng),通過具有不同分子量截?cái)帱c(diǎn)(MWCO)的選擇性和可滲透膜孔的擴(kuò)散將小體積血漿中的游離蛋白結(jié)合藥物分離出來。它較普通的平衡透析裝置具有易于使用、高表面體積比、高通量、靈活性、確定性、可重現(xiàn)性和準(zhǔn)確度等多重優(yōu)點(diǎn),是PPB試驗(yàn)的又一大利器!


為驗(yàn)證裝置的實(shí)用性,IPHASE技術(shù)人員以SD大鼠血漿蛋白結(jié)合試驗(yàn)為例,使用華法林為陽(yáng)性藥物,在37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中振蕩孵育6小時(shí)。其中,Rat-6h是試驗(yàn)組,結(jié)果顯示其血漿蛋白結(jié)合率高于99%,滿足試驗(yàn)血漿蛋白結(jié)合率≥98%的要求;Rat-6h-PBS是陰性對(duì)照組,結(jié)果顯示兩側(cè)陽(yáng)性對(duì)照物可以透過半透膜,兩側(cè)數(shù)據(jù)接近一致,進(jìn)一步驗(yàn)證試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。


由此說明,IPHASE/匯智和源快速平衡透析裝置研發(fā)成功。其操作方便、均一性好,無需客戶自行操作透析膜,且避免了普通透析裝置由于使用時(shí)間久導(dǎo)致彈簧松緊不合適造成的漏液現(xiàn)象,是大部分客戶的最·優(yōu)選擇!

 

3.png

 

IPHASE相關(guān)產(chǎn)品


鑒于此,IPHASE為滿足不同客戶的多種需求,就快速平衡透析裝置,成功設(shè)計(jì)、研發(fā)出一次性/重復(fù)性底板及兩種不同規(guī)格的插件,同時(shí)還有多種適用于兩款平衡透析裝置的輔助產(chǎn)品及其它相關(guān)產(chǎn)品,具體信息如下表所示:

 

 

名稱

規(guī)格

快速平衡透析裝置

IPHASE   PPB Dialysis,24 wells

24/

IPHASE   PPB Dialysis,48 wells

48/

IPHASE   PPB Dialysis,96 wells

96/

IPHASE   Rapid Equilibrium Dialysis Single-Use (Base) Plate

48 Wells,1 Block

IPHASE   Rapid Equilibrium Dialysis Reusable (Base) Plate

48 Wells,1 Block

IPHASE   Rapid Equilibrium Dialysis Insert

12-14kDa,10 Inserts

IPHASE   Rapid Equilibrium Dialysis Insert

12-14kDa50 Inserts

IPHASE   Rapid Equilibrium Dialysis Device (Contains Insert and Plate)

12-14kDa,48 Inserts

血漿蛋白結(jié)合率產(chǎn)品

IPHASE   PPB Kit,Human

12T/Kit

IPHASE PPB Kit,Monkey(Cynomolgus)

12T/Kit

IPHASE   PPB Kit,Dog(Beagle)

12T/Kit

IPHASE   PPB Kit,Rat(Sprague-Dawley)

12T/Kit

IPHASE   PPB Kit,Mouse(ICR/CD-1)

12T/Kit

透析膜

IPHASE   Dialysis Membrane,12-14kd

4   Sheets

IPHASE   Dialysis Membrane,25kd

4   Sheets

IPHASE   Dialysis Membrane,50kd

4   Sheets

IPHASE   Dialysis Membrane,12-14kd

50   Sheets

IPHASE   Dialysis Membrane,25kd

50   Sheets

IPHASE   Dialysis Membrane,50kd

50   Sheets

IPHASE   Dialysis Membrane,3.5kd

4   Sheets

血漿

///大鼠/小鼠/等多種屬PPB專用血漿

5mL EDTA-K2/肝素鈉

平衡透析裝置輔助產(chǎn)品

IPHASE   PPB Dialysis Sealing Film

100 Sheets

IPHASE   PPB Teflon Block,96 wells

96-9

IPHASE   PPB Teflon Block,24 wells

24-5

IPHASE   PPB Teflon Block,48 wells

48-7

IPHASE   PPB Dialysis Base

1個(gè)

超濾管

IPHASE   Millipore

0.5mL 10 kd/50

 

IPHASE/匯智和源憑借多年的研發(fā)經(jīng)驗(yàn),推出了多領(lǐng)域、多種類的高·端科研試劑,為藥物早期研發(fā)提供篩選工具,為生命科學(xué)領(lǐng)域的探索提供新材料、新方法和新手段,為食品、藥品、化學(xué)品等的遺傳毒性研究提供便捷產(chǎn)品,望廣大科研工作者咨詢。


發(fā)    文    章    得    獎(jiǎng)    勵(lì)


凡使用本公司產(chǎn)品,在國(guó)內(nèi)及國(guó)際刊物上發(fā)表論文(論文發(fā)表日起一年內(nèi)),并注明產(chǎn)品屬于IPHASE BIOSCIENCES Co.,Ltd. / 匯智和源生物技術(shù)(蘇州)有限公司所有,即可申請(qǐng)獎(jiǎng)勵(lì)。根據(jù)發(fā)表刊物影響因子不同,給予不同金額獎(jiǎng)品:


非SCI論文及IF≤5分,500元禮品;


5分<IF≤8分 800元禮品;


8分<IF≤10分 1000元禮品;


IF≥10分 2000元禮品;


注:①禮品卡也可兌換同等金額產(chǎn)品購(gòu)買抵用券;


      ②如遇我司公司名稱書寫不規(guī)范或不是第一作者


        等情況,對(duì)應(yīng)給予獎(jiǎng)品金額將發(fā)放50%;


活動(dòng)多多,禮品豐厚,快來參與吧!


關(guān)    于    我    們


匯智和源,致力于為創(chuàng)新藥研發(fā)企業(yè)及生命科學(xué)研究機(jī)構(gòu)提供高品質(zhì)的生物試劑,IPHASE為公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。

 

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