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采用雙三元液相色譜(Dualgradientliquidchromatography,DGLC)建立了在線固相萃取技術與電噴霧串聯質譜聯用方法(OnlineSPEDGLC鄄ESIMS/MS),并成功應用于實際樣品檢測。本方法同時檢測大豆不同部位中的4種酸堿性植物激素(赤霉素(GA3)、吲哚乙酸(IAA)、玉米素(ZT)和脫落酸(ABA))。通過考察固相萃取富集柱、分析色譜柱、流動相對植物激素的保留和選擇性的影響,獲得較高的靈敏度、回收率、穩定性及精密度。大豆樣品經液氮低溫研磨,以80%甲醇溶液提取,再經離心稀釋過濾后,進樣分析。進樣后樣品經在線固相萃取HypersepRetainAX柱洗脫保留,目標分析物依次轉移至分析柱AcclaimPA2色譜柱,并以0.1%甲酸和甲醇溶液作為流動相進行梯度洗脫,采用選擇反應監測離子模式(SRM)同時采集正負離子通道進行定性分析,基質標準曲線外標法進行定量分析,GA3,IAA,ZT在0.1~50滋g/L范圍內線性良好,檢出限為0.0002滋g/g;ABA在0.5~50滋g/L的范圍內線性良好,其檢出限為0.0010滋g/g。以0.8,4.0和40滋g/L分別為低、中、高濃度考察4種植物激素的回收率為76.1%~93.5%,RSD為0.8%~6.0%。結果表明,籽粒含有的ABA濃度明顯高于其它部位。本研究為快速準確地分離和測定大豆不同部位內源激素提供了有效方法。