CC96111 Rosetta (DE3)pLacl 感受態
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- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 語純生物
- 型號 CC96111
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/4/23 12:51:38
- 訪問次數 31
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| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CC96111 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥/生物制藥 |
Rosetta (DE3)pLacl 感受態
產品簡介
Rosetta(DE3) pLacI 菌株具有氯霉素抗性，補充大腸桿菌缺乏的 6 種稀有密碼子(AUA, AGG, AGA,
CUA, CCC, GGA)對應的 tRNA，提高外源基因（特別是真核基因）在原核系統中的表達水平。該
菌株的染色體上整合了 λ 噬菌體 DE3 區（DE3 區含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶），可同時表達 T7
RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶，因此可用于 pET 系列，pGEX，pMAL 等質粒的蛋白表達。
此外，該菌株攜帶了氯霉素抗性質粒 pLacIRARE，能夠額外表達 lac 轉錄抑制蛋白，可以抑制目的
基因的本底表達水平。經 pUC18 質粒轉化檢測，Rosetta(DE3) pLacI感受態細胞的轉化效率可達 107
cfu/μg DNA 以上。
產品組成
組分
Rosetta(DE3) pLacI
感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm (DE3) pLacIRARE (CamR)
存儲條件
-80 ℃保存，請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
除 pLacIRARE 質粒外，無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基（室溫或 37 ℃預熱），后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
Rosetta (DE3)pLacl 感受態
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