CC96185 Rosetta 2(DE3)感受態
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- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 語純生物
- 型號 CC96185
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/4/23 12:39:38
- 訪問次數 28
產品標簽
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| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CC96185 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥/生物制藥 |
Rosetta 2(DE3)感受態
Rosetta 系列菌株來源于 BL21 系列宿主菌，該系列菌株含有原本在大腸桿菌中稀少的真核細胞密碼
子，增加了真核細胞的蛋白表達水平。Rosetta 2(DE3)來源于 Rosetta(DE3)，本菌株含有 pRARE2 質
粒，除了能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的 AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個稀有密
碼子的 tRNA 外，還提供了第七個稀有密碼子 CGG 的 tRNA，這使得該宿主菌相對于其他大腸桿
菌，能夠提供更加“通用”的蛋白質表達，從而提升目的蛋白表達水平。DE3 是溶源性的 λDE3 序列,
可表達T7 RNA聚合酶，因而適用于pET系列載體，及其他T7啟動子系列的載體。值得注意的是，
pRARE2 質粒具有氯霉素抗性。Rosetta 2(DE3)感受態細胞經特殊工藝制作，pUC18 質粒檢測轉化
效率達 108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
Rosetta 2(DE3)
感受態細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- ompT hsdSB (rB– mB–) dcm gal (DE3) pRARE2 (argU, argW, ileX, glyT, leuW, proL, argX)
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
除 pRARE2 外，無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養基（室溫或 37 ℃預熱），然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養箱培養過夜。
注意事項
1. 感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
Rosetta 2(DE3)感受態
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