CC96120 Rosetta-gami 2 (DE3)pLacl 感受態(tài)
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- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 語純生物
- 型號 CC96120
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/4/23 12:33:44
- 訪問次數(shù) 23
產(chǎn)品標簽
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CC96120 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
Rosetta-gami 2 (DE3)pLacl 感受態(tài)
產(chǎn)品簡介
Rosetta-gami 2 系列菌株是集合了 Rosetta 2 系列菌株和 Origami 2 系列菌株的優(yōu)點；Rosetta-gami 2
(DE3)系列菌株是來源于 Origami 2 系列菌株，在其染色體上帶有溶源性的 λDE3，可表達 T7 RNA
聚合酶。由于該菌株不含卡納抗性，適用于 pET 系列載體及其他 T7 啟動子系列載體。該菌株攜帶
有 trxB 和 gor 基因突變，從而提高了含二硫鍵正確折疊蛋白的表達效率；同時帶有的 pLacIRARE2
質(zhì)粒（攜帶氯霉素抗性），除了能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的 AUA, AGG, AGA, CUA,
CCC, 和 GGA 六個稀有密碼子的 tRNA 外，還提供了第七個稀有密碼子 CGG 的 tRNA，因而能夠增
強真核細胞蛋白在大腸桿菌中的表達水平。此外，LacI 蛋白也可以抑制 T7lac 啟動子在無誘導劑時
的本底表達。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉化檢測，Rosetta-gami 2 (DE3) pLacI 感受態(tài)細胞的轉化效率可達 107
cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Rosetta-gami 2 (DE3) pLacI
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL (DE3) F′[lac+ lacIq pro] gor522::Tn10
trxB pLacIRARE2 (CamR, StrR, TetR)
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
除 pLacIRARE2 外，無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱），后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
Rosetta-gami 2 (DE3)pLacl 感受態(tài)
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