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產品名稱：大鼠角膜上皮原代細胞
英文名稱：Rat Corneal Epithelial Cells
規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：GOY-01X1067
分類：大鼠原代細胞

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

大鼠角膜上皮細胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神經末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。其主要功能如下：①角膜是的無血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能，分三層細胞層，外層即是上皮細胞；②角膜上皮細胞能參與先天性免疫，能感應病原體存在并發(fā)出信號從而激活角膜防御系統(tǒng)；③角膜上皮細胞能高效表達醛脫氫酶。角膜上皮細胞的體外培養(yǎng)對研究角膜的生理學、病理學、免疫學以及分子生物學都是極為重要的手段，常用于研究細胞代謝產物、病毒感染、各種生長因子和藥物對細胞生長的影響。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠角膜上皮細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠角膜上皮細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

準備DMEM高糖，10% 優(yōu)質胎牛血清。

1）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

2）凍存液：90%培養(yǎng)基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。

2、細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

1、收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。

3、用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4、請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件;建議直接購買提供的培養(yǎng)基。

5、建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和微生物菌種查詢網技術部溝通交流。

6、該細胞只能用于科研，不得用于臨床應用。

ACVRL1 Others Human 人 ALK-1 / ACVRL1 人細胞裂解液   小鼠心肌細胞MCM  EFNB1 Others Human 人 EphrinB1 / EFNB1 人細胞裂解液   非洲綠猴腎細胞;BS-C-1  ACTE1   非洲爪蟾胚胎細胞 豬原代睪丸支持細胞 兔原代子宮平滑肌細胞

Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原 0.5mgMelan-A/MART-1 黑色素-A(抗原)

CBFB Protein Human 重組人 CBFB / CBF-beta 蛋白

IGFBP4重組食蟹猴 IGFBP4 蛋白 Protein

KLK7 Protein Mouse 重組小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 蛋白

PDE9A重組人 PDE9A 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA 試劑盒

Kappa aibodies to human immunoglobulin light chain (-IgLC) ELISA Kit 輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)試劑盒

HumanleucocyteaigenB27,HLA-B27ELISAKit 人類白細胞抗原B27(HLA-B27)試劑盒 96T/48T 進口分裝

FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRP試劑盒魚類超敏C反應蛋白(hs-CRP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母蛋白巰基/結合巰基含量比色法定量試劑盒20次

MouseComplemefragme3a,C3aELISAKit小鼠補體片斷3a(C3a)試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂多糖   10mg

Lipopolysaccharides,Escherichiacoli055:B5

L-異亮酸   10g

L-Isoleucine   50g

大鼠角膜上皮原代細胞小鼠細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human phosphorylated exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 人0酸化細胞外信號調節(jié)激酶(pERK)試劑盒

HumanPancreaticLipase,PLELISAKit 人胰脂肪酶(PL)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenIerferonα,IFN-α試劑盒雞α干擾素(IFN-α)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞DHPR受體蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CNTN3重組人 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (708 Asp/Asn, His 標簽) Protein

卵泡抑素(FS)重組蛋白 Recombinant Follistatin (FS)

SBDS重組人 SBDS / Shwachman-Bodian-Diamond syndrome 蛋白 (His 標簽) Protein

ALDH1A1 Protein Human 重組人 ALDH1 / ALDH1A1 / ALDC 蛋白 (His 標簽)

HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)