大鼠肺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自肺組織；肺是機(jī)體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。微血管內(nèi)皮細(xì)胞密切參與包括再生、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應(yīng)。細(xì)胞呈梭形或多角形，形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成半選擇性屏障，該屏障對(duì)于肺氣體交換，調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動(dòng)具有重要意義。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用組織貼塊法并結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　　② 消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

6T-CEM人T細(xì)胞白血病細(xì)胞 The 6T-CEM of human T cell leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS  Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞)  中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 豬原代心肌成纖維細(xì)胞 大鼠原代角質(zhì)形成細(xì)胞

CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7 0.5mgCHRNA7(Nicotinic-Acetylcholine receptor alpha 7) 型乙酰受體α7(多肽)

IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白

SPINT2重組小鼠 HAI-2 / SPINT2 蛋白 Protein

ACVR2B Protein Mouse 重組小鼠 ACVR2B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

RAC2重組人 RAC2 蛋白 Protein

小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA 試劑盒

Rat apoptosis inducing factor (AIF) ELISA Kit 大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)試劑盒

Humanα-L-iduronidase,IDUAELISAKit 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor(MouseGasoiestinalcancerMarker-CA199)ELISAKit小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199

飲料乙酸激酶法定量試劑盒20次

MouseIerleukin6,IL-6ELISAKit小鼠白介素6(IL-6)試劑盒

脂肪酸合成酶   英文名稱：   Human Fatty Acid Syhase   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   FASN

脂肪酸合成酶   英文名稱：   Human Fatty Acid Syhase   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   FASN

生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白   英文名稱：   GH-binding protein   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   P

環(huán)0酸鳥(niǎo)苷   英文名稱：   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   cGMP

大鼠肺微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞小鼠脫氫表雄酮酯(DHEA-S)ELISA 試劑盒 96T/48T

One Japanese encephalitis aibody IgG (JE IgG) ELISA Kit 人流行性乙型腦抗體IgG(JE IgG)試劑盒

HumanBcellreceptor,BCRELISAKit 人B細(xì)胞受體(BCR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenNuclearfactor-kappaB,NF-κB試劑盒雞核因子κB(NF-κB)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞P38蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

mousefollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit小鼠促卵泡素(FSH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

WFDC2重組狗 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

OAT-1 (Organic anion transporter 1 0.5mgOAT-1 (Organic anion transporter 1)human 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(人源)

TRIB2重組人 TRIB2 / TRB2 蛋白 Protein

CHN1 Protein Human 重組人 CHN1 / Chimerin 1 蛋白

CHL1 Protein Mouse 重組小鼠 CHL-1 蛋白

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。