諾博萊德 RNA長(zhǎng)期保存液 RNA提取配套產(chǎn)品

RNA 長(zhǎng)期保存液

目錄號(hào):91118

產(chǎn)品內(nèi)容：

保存溫度：

4℃保存，有效期 12 個(gè)月。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

RNA性質(zhì)不穩(wěn)定，極易降解。溶解于無(wú)RNase 的TE 或水中的純化RNA，即便是儲(chǔ)存于-20 oC也難免降解。為解決這一問(wèn)題，可以將RNA 沉淀或RNA溶液溶解于RNA 長(zhǎng)期保存液中，可以允許RNA在4 oC 過(guò)夜或-20 oC 保存至少1 年而免于降解。RNA 長(zhǎng)期保存液是RNA 樣品運(yùn)輸和中長(zhǎng)期保存的zuijia選擇。需要時(shí)可用常規(guī)乙醇法沉淀回收RNA，或直接吸取儲(chǔ)存于RNA 溶解保護(hù)液中的高濃度RNA(可達(dá)4 mg/ml)進(jìn)行RNA 電泳、Northern Blot。

注意事項(xiàng)：

1.     RNA長(zhǎng)期保存液可能抑制逆轉(zhuǎn)錄酶活性，做逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)之前，應(yīng)該用乙醇沉淀RNA。

2.      在RNA 長(zhǎng)期保存液中的RNA 的終濃度不應(yīng)該超過(guò)4μg /μl。

使用方法：

一、用RNA長(zhǎng)期保存液溶解RNA沉淀

1.     對(duì)固體RNA 沉淀，每0.4-4μg RNA 沉淀加入1μl RNA長(zhǎng)期保存液，反復(fù)吹打混勻或者室溫振蕩15-30 分鐘溶解沉淀。干燥的RNA沉淀難以溶解，可反復(fù)吹打混勻后50 oC 加熱10-15 分鐘。最好先用小體積無(wú) RNase 的TE 或水溶解RNA 沉淀，然后按液態(tài)RNA 操作。

2.對(duì)液態(tài)RNA 溶液，每0.4-4μg RNA 溶液加入1μl RNA 長(zhǎng)期保存液，混勻。注意混合液中RNA 長(zhǎng)期保存液的體積百分比不低于80%。

3.    測(cè)定OD 值。注意加入相應(yīng)量的RNA 長(zhǎng)期保存液做空白。

4.    將溶解的RNA 樣品儲(chǔ)存于-20 oC或者-70 oC。

二、從RNA長(zhǎng)期保存液中沉淀RNA

1.  估計(jì) RNA 溶液終體積。加入 4 倍體積的無(wú)水乙醇，混勻。如果溶液體積過(guò)小操作不便，可加入 RNase free water 稀釋 RNA 溶液,如果溶液中 RNA 含量低于 0.25μg /μl，可加入 5M NaCl(RNase free) 至終濃度 0.2M,混勻，然后再加入 4 倍體積乙醇。

2.室溫放置 5 分鐘。

3.     12,000 rpm 5 min。棄上清。風(fēng)干，溶解。

4.     重新沉淀的RNA 溶解后可用于 RT-PCR 反應(yīng)。也可用于任何其他實(shí)驗(yàn)。

三、直接使用RNA長(zhǎng)期保存液中的RNA

直接吸取RNA長(zhǎng)期保存液中的RNA ， 進(jìn)行普通或甲醛變性電泳和 Northern Blot。進(jìn)行甲醛變性電泳時(shí)，最后上樣的樣品中的RNA長(zhǎng)期保存液的濃度可高達(dá)50%。

附：甲醛變性電泳樣品準(zhǔn)備： 臨用前，混合水（87μl），甲醛（81μl）, 50%甘油/含0.25 mg/ml溴芬蘭(48μl) 和20X MOPS (24 μl). 將上述混合液和RNA長(zhǎng)期保存液中的RNA樣品等體積混合，55 oC溫育10分鐘，按照標(biāo)準(zhǔn)的甲醛變性電泳過(guò)程上樣。每1ml 裂解液（裂解液RL、裂解液 RLS、裂解液PRL、裂解液ARL Plus）

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