化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>行業(yè)專(zhuān)用試劑>生化與分子生物學(xué)用試劑>BF6018 蔗糖磷酸化酶試劑盒 輔酶Ⅱ系列-常備現(xiàn)貨
BF6018 蔗糖磷酸化酶試劑盒 輔酶Ⅱ系列-常備現(xiàn)貨
- 公司名稱(chēng) 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) BF6018
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
- 更新時(shí)間 2025/4/8 15:35:34
- 訪問(wèn)次數(shù) 63
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | BF6018 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 具有ji強(qiáng)的美白效果,在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用。 |
蔗糖磷酸化酶（Sucrose Phosphorylase, SP）試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法 100 管/96 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：
SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中，裂解葡萄糖苷鍵，催化葡萄糖基轉(zhuǎn)移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等，合成相應(yīng)的葡萄糖基低聚糖。此外，SP 還能催化qing醌合成熊果苷，具有ji強(qiáng)的美白效果，在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用。
測(cè)定原理：
SP 能夠以磷酸為受體，催化蔗糖產(chǎn)生 1-磷酸葡萄糖，在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為 6-磷酸葡萄糖，在 6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH，導(dǎo)致 340nm 光吸收值增加。測(cè)定 340nm 吸光度增加速率，即可計(jì)算SP 活性。
蔗糖磷酸化酶試劑盒 輔酶Ⅱ系列-常備現(xiàn)貨
組成：
產(chǎn)品名稱(chēng) | BF6018-100T/96S | Storage |
提取液：液體 | 100ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 15ml | 4℃ |
試劑二：粉劑 | 1 瓶 | -20℃避光 |
試劑三：粉劑 | 1 瓶 | -20℃避光 |
說(shuō)明書(shū) | 一份 | |
試劑二：粉劑×1 支，-20℃避光保存，臨用前加 2.5ml 蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
試劑三：粉劑×1 支，-20℃避光保存，臨用前加 5ml 蒸餾水溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
自備儀器和用品：
天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96 孔板和蒸餾水。
粗酶液提?。?/span>
1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱(chēng)取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后 10000g，4℃，離心 10min，取上清待測(cè)。
2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1ml 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時(shí)間 3min）；然后 10000g， 4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟：
1. 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 340nm。
2. 操作表
試劑名稱(chēng) | 對(duì)照管 | 測(cè)定管 |
試劑一（μl） | 120 | 120 |
試劑二（μl） | 20 | 20 |
試劑三（μl） | 40 | 40 |
樣本（μl） | 20 | |
蒸餾水（μl） | 20 | |
迅速混勻，于 96 孔板，37℃下測(cè)定 340nm 的初始吸光值與反應(yīng) 2min 后的吸光值， 測(cè)定管記作A1 與A2，對(duì)照管記作A3 與A4，△A=（A2- A1）-（A4- A3）。 | ||
SP 酶活性計(jì)算：
1. 按照蛋白濃度計(jì)算
酶活定義：37℃，pH6.8 時(shí)，每毫克蛋白質(zhì)每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol NADPH 為一個(gè)酶活單位。
SP 活性（nmol/min/mg prot）=DA e′ d×V 反總÷V 樣÷Cpr÷T=1608×△A÷Cpr
酶活定義：37℃，pH6.8 時(shí)，每克樣本每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol NADPH 為一個(gè)酶活單位。
2. 按照樣本質(zhì)量計(jì)算
SP 活性（nmol/min/g 鮮重）=DA e′ d×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)÷T=1608×△A÷W
3. 按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
酶活定義：37℃，pH6.8 時(shí)，每 104 個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol NADPH 為一個(gè)酶活單位。
SP 活性（nmol/min/104 cell）=DAe′ d×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×細(xì)胞數(shù)量（萬(wàn)個(gè)）)÷T=1608×△A÷細(xì)胞數(shù)量（萬(wàn)個(gè)）
e：NADPH 摩爾消光系數(shù)，6220 L/mol/cm；d：比色皿光徑，0.5cm；V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.2ml； V 樣：反應(yīng)體系中樣本體積，0.02ml；W：樣本質(zhì)量，g；Cpr：蛋白濃度，mg/ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml；T：反應(yīng)時(shí)間，2min
注意事項(xiàng)：
1. 可選用BCA 法測(cè)定蛋白含量試劑盒測(cè)定蛋白含量。
2. 樣本較多時(shí)，可以按照每個(gè)樣本試劑一：試劑二：試劑三=120：20：40（μl）的比例配制工作液，用多少配多少，臨用前立刻配制，10 分鐘內(nèi)使用。
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