BI6045 幾丁質酶試劑盒 糖代謝
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 BI6045
- 產地 北京
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/4/1 15:16:28
- 訪問次數 18
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| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100T/48S |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BI6045 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 具有抵御真菌侵染的作用,成為抗真菌病害的研究熱點 |
幾丁質酶（Chitinase）試劑盒說明書
微量法 100 管/48 樣
幾丁質酶試劑盒 糖代謝
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：
幾丁質主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨)，以及真菌類的細胞壁中。而幾丁質酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質水解，具有抵御真菌侵染的作用，成為抗真菌病害的研究熱點。
測定原理：
幾丁質酶水解幾丁質產生N-乙酰氨基葡萄糖，進一步與對二甲氨基苯甲醛產生紅色化合物，在 585nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質酶的活性。
組成：
產品名稱 | BI6045-100T/48S | Storage |
提取液：液體 | 105ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 5ml | 4℃ |
試劑二：液體 | 5ml | 4℃ |
試劑三：液體 | 5ml | 4℃ |
試劑四：液體 | 10ml | 4℃避光 |
說明書 | 一份 | |
試劑二：液體 5ml×1 瓶，4℃保存。（若出現結晶，可 80℃左右加熱溶解后使用）
自備儀器和用品：
天平、水浴鍋、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯（土壤樣品專用）和蒸餾水。
粗酶液提取：
組織：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液）進行冰浴勻漿，然后 10000g，4℃離心 20min，取上清，置冰上待測。
真菌：按照細胞數量（104 個）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 10000g，4℃，離心 20min，取上清置于冰上待測。
培養液：直接測定。
測定操作表：
對照管 | 測定管 | |
粗酶液（µl） | 80 | 80 |
提取液（µl） | 120 | 40 |
試劑一（µl） | 80 | |
混勻，37℃水浴 1h | ||
試劑二（µl） | 40 | 40 |
混勻，沸水浴 7min，5000rpm，4℃，離心 10min，取上清 200µl。 | ||
試劑三（µl） | 40 | 40 |
試劑四（µl） | 80 | 80 |
混勻，37℃，15min，于微量石英比色皿/96 孔板，測定A585，ΔA=A 測定-A 對照。 | ||
計算公式：
用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線：y=0.3088-0.003，R2=0.9995
計算公式：
1、按照樣本重量計算
酶活性定義：37℃條件下，每克組織每小時分解幾丁質產生 1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活性單位。
幾丁質酶活性（mg/h/g 鮮重）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W) ÷T
=8.096×（ΔA +0.003）÷W
2、按照蛋白質濃度計算
酶活定義：37℃條件下，每毫克蛋白每小時分解幾丁質產生 1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。幾丁質酶活性（mg/h mg prot）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V 反總÷(V 樣×Cpr) ÷T
= 8.096×（ΔA +0.003）÷Cpr
3、按細胞數量計算
酶活定義：37℃條件下，每 104 個細胞每小時分解幾丁質產生 1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。
幾丁質酶活性（mg/h /104 cell）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×細胞數量)
=8.096×（ΔA +0.003）÷細胞數量
4、按液體體積計算
酶活定義：37℃條件下，每毫升培養液每小時分解幾丁質產生 1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。
幾丁質酶活性（mg/h /ml）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V 反總÷V 樣=8.096×（ΔA +0.003）
V 反總：反應體系總體積，1ml；V 樣：反應體系中樣本體積，0.4ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣本質量，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml
用 96 孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y=0.1544x-0.003，R2=0.9995
計算公式：
4、按照樣本重量計算
酶活性定義：37℃條件下，每克組織每小時分解幾丁質產生 1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活性單位。
幾丁質酶活性（mg/h/g 鮮重）=（ΔA+0.003）÷0.1544×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W) ÷T
=16.192×（ΔA +0.003）÷W
5、按照蛋白質濃度計算
酶活定義：37℃條件下，每毫克蛋白每小時分解幾丁質產生 1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。幾丁質酶活性（mg/h mg prot）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V 反總÷(V 樣×Cpr) ÷T
= 16.192×（ΔA +0.003）÷Cpr
6、按細胞數量計算
酶活定義：37℃條件下，每 104 個細胞每小時分解幾丁質產生 1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。
幾丁質酶活性（mg/h /104 cell）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×細胞數量)
=16.192×（ΔA +0.003）÷細胞數量
4、按液體體積計算
酶活定義：37℃條件下，每毫升培養液每小時分解幾丁質產生 1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。
幾丁質酶活性（mg/h /ml）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V 反總÷V 樣=16.192×（ΔA +0.003）
V 反總：反應體系總體積，1ml；V 樣：反應體系中樣本體積，0.4ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣本質量，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml
注意事項：
1、反應結束后立即進行比色。
2、試劑四有一定的毒性，請操作時做好防護措施。
幾丁質酶試劑盒 糖代謝
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