BE6013 乙醛tuo氫酶試劑盒 輔酶Ⅰ
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 BE6013
- 產地 北京
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/3/31 11:29:53
- 訪問次數 23
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| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50T/48S |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BE6013 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 作用是將乙醛氧化成乙酸,在酒精代謝中起主要作用 |
乙醛tuo氫酶（acetaldehyde dehydrogenase，ALDH）試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
乙醛tuo氫酶試劑盒 輔酶Ⅰ
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：
乙醛tuo氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種，廣泛存在于各種動物、植物和微生物體內。主要作用是將乙醛氧化成乙酸，在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動物體內，線粒體乙醛tuo氫酶能把對生物體有害的醇類轉化，所以在細胞解毒研究中乙醛tuo氫酶受到高度關注；同時，乙醛tuo氫酶在分子生物學以及相關疾病的檢測方面有較廣泛的研究應用。
測定原理：
在輔酶Ⅰ存在的條件下，乙醛tuo氫酶催化乙醛和 NAD+轉化為乙酸和NADH，在 340nm 處的吸光值會增加，測定 340nm 處的吸光值變化，可計算得到乙醛tuo氫酶的活性。
組成：
產品名稱 | BE6013-50T/48S | Storage |
提取液：液體 | 50ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 15ml | 4℃ |
試劑二：液體 | 5ml | 4℃避光 |
試劑三：液體 | 3ml | 4℃避光 |
試劑四：液體 | 2ml | 4℃ |
試劑五：液體 | 2ml | 4℃ |
說明書 | 一份 | |
自備儀器和用品：
天平、離心機、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計、1ml 石英比色皿、蒸餾水。
ALDH 提取：
組織：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液）進行冰浴勻漿，然后，10000g，4℃，離心 20min。
細胞：按照細胞數量（104 個）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 10000g，4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測。
液體：直接檢測。
測定操作表：
對照管 | 測定管 | |
樣本（µl） | 200 | |
試劑一（µl） | 300 | 300 |
試劑二（µl） | 100 | 100 |
試劑三（µl） | 50 | 50 |
試劑四（µl） | 30 | 30 |
試劑五（µl） | 20 | 20 |
H2O（µl） | 500 | 300 |
充分混勻，1ml 石英比色皿，對照管調零， 于 340nm 處測定吸光值A1，迅速置于 37℃水浴 1min，于 340nm 處測定吸光值 A2， △A= A2-A1。 | ||
ALDH 酶活計算：
按蛋白濃度計算
酶活定義：每毫克蛋白每分鐘催化還原 1nmol NAD+的酶量為 1 個酶活單位。
ALDH 酶活（nmol/min/mg prot）=
按樣本質量計算
?A ×V 反總÷（V 樣×Crp）÷T= 804×△A÷Cpr
?? d
酶活定義：每克樣品每分鐘催化還原 1nmol NAD+的酶量為 1 個酶活單位。
ALDH 酶活（nmol/min/g 鮮重）=
按照細胞數量計算
?A ×V 反總÷（V 樣×W÷V 樣總）÷T = 804×△A÷W
?? d
酶活定義：每 104 個細胞每分鐘催化還原 1nmol NAD+的酶量為 1 個酶活單位。
ALDH 酶活（nmol/min/104cell）=數量（萬個）
按液體體積計算
?A ×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×細胞數量（萬個））÷T= 804×△A÷細胞
?? d
酶活定義：每ml 樣本每分鐘催化還原 1nmol NAD+的酶量為 1 個酶活單位。
ALDH 酶活（nmol/min/ml）=
?A ×V 反總÷V 樣÷T= 804×△A
?? d
?：NADH 微摩爾消光系數，6.22×10-3 L/µmol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V 反總：反應體系總體積，1ml；
V 樣：反應體系中樣本體積，0.2ml；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/ml；W：樣本質量，g，T：反應時間：1min
乙醛tuo氫酶試劑盒 輔酶Ⅰ
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