貨號： HG-BC001

產品簡介：

BlueKit® 系列 BCA快速蛋白定量試劑盒具有靈敏度高、結果穩定、操作簡捷等特點。本試劑盒的檢測原理是Cu2+在堿性的條件下，被蛋白質還原成 Cu+，Cu+和BCA 相互作用形成紫色的反應絡合物，可在 562 nm 處顯示強烈的吸光值，與蛋白濃度呈現良好的線性關系。 

檢測范圍： 10~2000 μg/mL 

靈 敏 度：0.39μg/mL

規格：

250 T

應用：

適用于各類樣本中總蛋白的定量檢測。

產品組成：

產品儲存條件與有限期：

試劑盒所有組分室溫儲存。可穩定保存12個月 。

本試驗所需自備試驗材料：

1. 酶標儀、恒溫培養箱。 

2. 微量移液器及吸頭。 

3. 去離子水、全新濾紙、渦旋振蕩器。

樣本制備：

用慢病毒樣本裂解液稀釋樣本。慢病毒樣本建議稀釋 40 倍，即 5 μL 慢病毒樣本中加入 195 μL慢病毒樣本裂解液。如不在標準曲線范圍內，調整稀釋倍數。

實驗流程：

1.按需用量配制適量 BCA 工作液。試劑 A 與試劑B 以體積比 50:1 混合，充分混勻。 

2.微孔板中加入 50 μL 標準蛋白、待測樣本。 

3.加入 200 μL BCA 工作液。 

4.室溫反應 20 分鐘 

5.酶標儀 562 nm 波長測量吸光度值。 

6.計算標準蛋白和待測樣本的實際吸光度值(即各孔吸光度值 － 空白平均吸光度值）。 

7.繪制標準蛋白曲線，擬合回歸方程，計算待測樣本蛋白濃度。

結果處理：

1.標準曲線OD處理(見下例，僅為示例，具體以實際測定為準)。

2.以標準品理論濃度與對應OD值取雙log后進行線性擬合，得到標準曲線(如下圖所示)。

注意事項：

1. 每次使用前請檢查試劑是否出現沉淀。如果有沉淀，請在 37℃溫浴，溶解沉淀后再使用。如果有任何試劑出現變色或微生物污染即丟棄。 

2. BCA 法測定蛋白濃度時，吸光度會隨時間的延長不斷加深，因此所有樣品的測定需在 10 分鐘內完成，否則會影響蛋白定量的準確度。 

3. 待測樣品中如含有較高濃度的非離子型表面活性劑，普通 Lowry 法會因反應液出現沉淀而無法檢測，BCA 檢測法則不會有此情況發生，但是會導致待測樣品顯色反應加深，仍將產生測定誤差。樣品中大多數離子型和非離子型表面活性劑的影響。 

4. 待測樣品中如含有鰲合劑，或處于強酸、強堿條件則會導致負吸收值。 

5. 如含有脂類物質會導致吸收值明顯升高。 

6. 如因上述干擾因素存在，造成測定誤差，請通過稀釋、透析或其他處理方式，使干擾物質濃度降至BCA 檢測最大兼容濃度以下。 

7. 如果酶標儀沒有 562 nm 檢測波長，540 - 590 nm 之間的波長也可接受。

8. 為了您的安全和健康，請穿戴實驗防i護服、手套、口罩等必要的防護裝備。

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