產品簡介：

化膿隱秘桿菌是一種重要的條件性致病菌，能引起豬，牛，羊等多種動物及人類多組織化膿性感染，給畜牧業發展帶來嚴重影響。本試劑盒適用于檢測疑似畜樣的膿包，生殖道口或乳房等標本中化膿隱秘桿菌 DNA， 適用于豬化膿隱秘桿菌感染的輔助診斷。

產品特點：

一、嚴格的質控體系

所有試劑盒從原料到成品都經過嚴格的質量控制，確保每一盒試劑盒都具有穩定可靠的質量，讓您的檢測結果更可信。

二、高靈敏度

產品經過不斷優化，具有出色的靈敏度，能夠檢測到極微量的豬化膿隱秘桿菌核酸，不放過任何潛在的感染風險。

三、便捷操作

綜合各項指標特性，研發出操作便捷的試劑盒。從樣本制備到結果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能輕松上手。

四、多樣的檢測驗證樣本

該試劑盒經過多種樣本的檢測驗證，適用于膿包，生殖道口或乳房等多種常見樣本，滿足不同的檢測需求。

五、個性化定制服務

專業的研發團隊可為您提供個性化的定制服務，根據您的特殊需求進行產品優化和調整，為您提供更貼合實際的檢測方案。

六、豐富的產品線

除了豬化膿隱秘桿菌(Tp)PCR核酸檢測試劑盒，我們還提供Elisa試劑盒以及其它快檢試劑盒，滿足您在不同領域的檢測需求。

七、完善的售前售后服務

我們擁有完善專業的售前售后服務團隊，在您購買前為您提供詳細的產品咨詢和技術支持，購買后為您解決使用過程中遇到的任何問題，讓您無后顧之憂。

產品參數：

產品規格

50T/盒，可滿足一定規模的檢測需求。

檢測方法

實時熒光PCR，具有快速、準確、靈敏等優點。

適用儀器

ABI7500、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

標本采集

發病畜樣品采集：采樣前將家畜固定，用毛刷刷去其身體和乳區粘附污物，用溫水擦凈膿包、生殖道口或乳房，再用消毒液和 75%酒精充分消毒取樣部位。

膿汁采集：無菌-注射器緩慢抽出膿液，并注入無菌離心管中；

乳汁采集：人工擠乳，棄去頭 3 股乳汁，第 4 股乳汁用無菌的離心管收集；

陰道分泌物采集：將套有無菌管套的輸精槍插入子宮體，然后將輸精槍抽出，用 10mL 無菌-注射器對準管套口將子宮粘液吸出。

死亡畜樣采集：無菌采集病變的肺臟、脾臟、淋巴結等小塊組織迅速放入無菌袋中；胸腔積液、關節液和膿汁等液體樣品放入無菌離心管中。

保存和運輸

上述標本短期內可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過 6 個月，標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸，嚴禁反復凍融。

使用方法：

1.樣品處理（樣本處理區）

1.1樣本前處理

組織樣品剪碎后，加入無菌的終濃度為 50%甘油的生理鹽水充分勻漿后立即進行核酸提取或者短期內保存于-20℃，長期保存置于-70℃；液體樣品以 1：1 的體積比加入無菌的 50%甘油的生理鹽水，充分混勻后，可立即進行核酸提取。短期內可保存于-20℃，長期保存可置于-70℃。

1.2核酸提取

推薦采用公司生產的核酸-提取或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進行核酸提取， 請按照試劑說明書進行操作。

2.試劑配制（試劑準備區）

根據待檢測樣本總數，設所需要的 PCR 反應管管數為 N（N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照；反應管數每滿 10 份，多配制 1 份），每測試反應體系配制如下表：

試劑Tp 反應液酶液

用量19μL1μL

將混合好的測試反應液分裝到 PCR 反應管中，20μL/管。

3.加樣（樣本處理區）

將步驟 1 提取的核酸、陽性質控品、陰性質控品各取 5μL，分別加入相應的反應管中，蓋好管蓋，混勻， 短暫離心。

4.PCR 擴增（核酸擴增區）

4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內；

4.2設置好通道、樣品信息，反應體系設置為 25μL；

熒光通道選擇：檢測通道（ReporterDye）FAM，淬滅通道（QuencherDye）NONE，ABI 系列儀器請勿選擇 ROX

參比熒光，選擇 None 即可。

4.3推薦循環參數設置：

步驟循環數溫度時間收集熒光信號

11 cycle95℃2min否

245 cycles95℃15sec否

60℃30sec是

5.結果分析判定

5.1結果分析條件設定

設置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機器自動分析的結果分析，當曲線出現整體傾斜時，根據分析后圖像調節 Baseline 的 start 值（一般可在 3~15 范圍內調節）、stop 值（一般可在 5~20 范圍內調節），以及 Threshold 的 Value 值（上下拖動閾值線至高于陰性對照），重新分析結果。

5.2結果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤40，且有明顯的指數擴增曲線； 陰性：樣本檢測結果 Ct 值>40 或無 Ct 值。

6.質控標準

陰性質控品：無曲線或無 Ct 值顯示；

陽性質控品：擴增曲線有明顯指數生長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。

7.檢測方法的局限性

1.樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關；

2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現假陽性結果；

3.陽性對照、擴增產物泄漏，會導致假陽性結果；

4.病原體在流行過程中基因突變、重組，會導致假陰性結果；

5.不同的提取方法存在提取效率差異，會導致假陰性結果；

6.試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現假陰性或定量檢測不準確的結果；

7.本檢測結果僅供參考，如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。

注意事項：

1.所有操作嚴格按照說明書進行；

2.試劑盒內各種組分使用前應自然融化，完-全混勻并短暫離心；

3.反應液應避光保存；

4.反應中盡量避免氣泡存在，管蓋需蓋緊；

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區專用工作服；

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區進行，以免交叉污染；

7.實驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；

8.試劑盒里所有物品應視為污染物對待，并按照《微生物生物醫學實驗室生物安全通則》進行處理。

9.本產品僅供科研。

選擇我們的豬化膿隱秘桿菌(Tp)PCR核酸檢測試劑盒，就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！