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雙特異性抗體生產服務

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北京義翹神州科技股份有限公司是一家從事生物試劑研發、生產、銷售并提供技術服務的生物科技公司。所有產品都是自主研發和生產的,主要業務包括重組蛋白、抗體、基因和培養基等產品,以及重組蛋白、抗體的開發和生物分析檢測等服務,同時也為制藥公司或生物技術公司提供單克隆抗體候選藥物的臨床前規模生產服務。義翹神州的產品能夠覆蓋生命科學研究的多個領域,為分子生物學、細胞生物學、免疫學、發育生物學、干細胞研究等基礎科研方向和創新藥物研發提供“一站式”生物試劑產品和技術服務。



抗體檢測

雙特異性抗體生產服務

雙特異性抗體 (Bispecific antibody) 是含有2種特異性抗原結合位點的人工抗體,能在靶細胞和功能分子(細胞)之間架起橋梁,激發具有導向性的免疫反應,是基因工程抗體的一種。雙特異性抗體由于其結構、顯著的臨床效果特別是腫瘤領域的治療效果,已成為抗體工程領域的熱點,在腫瘤的免疫-治療中具有廣闊的應用前景。

 

義翹神州在重組抗體生產方面具有扎實的專業知識和經驗,利用優化的成熟哺乳動物細胞表達平臺,為您提供快速的雙特異性抗體表達服務。從抗體序列開始,我們可以表達多種雙特異性抗體形式,如BiTE、Diabody、CrossMab和DVD-IgG。

 

服務特色

 

多種雙特異性抗體表達經驗
義翹神州生產的不同類型雙特異性抗體
(bsAb命名法-DOI:10.1016 j.molimm.2015.01.003)

 

雙特異性抗體生產服務內容

標準服務包括A280檢測抗體濃度和SDS-PAGE評價純度,如需其他SEC-HPLC及內毒素等其他檢測,請聯系工作人員。

 

常見雙特異性抗體結構

義翹神州具有經驗豐富的抗體制備團隊,可以生產不同類型的雙特異性抗體,下面列舉了常見雙特異性抗體結構。


CrossMAb用于減少輕鏈錯配,通常與其他形式如KiH, DEEK和ART-Ig聯合使用。該技術通過交換一側重鏈和輕鏈的區域,實現了雙抗輕鏈的正確組裝。
雙特異性T細胞接合器(BiTE)是一種串聯scFvs,由兩個scFvs組成,一個與T細胞上的CD3結合,另一個與腫瘤細胞表面抗原結合,引導T細胞殺死腫瘤細胞。
DVD-IgG由兩個親本單克隆抗體組成,通過將來自一個親本抗體的兩個可變結構域融合到另一個親本抗體的重鏈和輕鏈上,而不是一個可變結構域。
DutaMab具有工程化的可變區,可以通過抗體上的兩個不同結合位點(paratopes)識別兩種不相關的抗原,這種結合位點利用每種抗原的三個CDR的多樣性。

  


雙特異性抗體表達案例展示

如下圖所示,雙特異性抗體構建體的重鏈上有一個KiH的設計。經過三步純化過程,單體純度從68.5%變為96.6%,符合QC要求。

 

Protein A-Affinity
SDS-PAGE>95%; Monomer: 68.5%
Ion Exchange
SDS-PAGE>95%; Monomer: 83%
Gel Filtration
SDS-PAGE>95%; Monomer: 96.6%

 

義翹神州利用HEK293細胞表達了 IgG(H)-scFv形式的雙抗,結構圖如下,經過Protein A-affinity 和Gel filtration純化后,獲得了SEC-HPLC純度98.5%的高質量抗體。

 

抗體形式: IgG(H)-scFv


  

雙特異性抗體常見問題解答

雙特異性抗體的特色是什么?

①雙特異性抗體特異性高、靶向性強、可以同時識別兩種抗原分子;

②相對于兩種單抗藥物聯合用藥的治療方法,雙特異性抗體藥物減少了開發和臨床試驗的成本;

③雙特異性抗體的治療效果明顯優于兩種或多種單抗聯合應用;

④相對于多種單抗聯合應用,雙特異性抗體的副作用較小,改善了藥物的安全性和有-效性。

 

雙特異性抗體有哪些形式?

雙特異性抗體根據是否有Fc結構分為IgG和非IgG型兩大類:IgG-like主要形式有Crossmab,Triomabs, kih-IgG等;非IgG-like主要形式有TrandscFv, BiTE, DART, TandAb,F(ab')2, bio-Nanobody等。

 

對于雙特異性抗體,如何選擇合適的表達系統?

選擇合適的表達系統對于雙特異性抗體的表達和生產至關重要。對于一些非IgG bsAb,如BiTE和串聯雙特異性scFv,它們可以在酵母或哺乳動物細胞(包括CHO和HEK293細胞)中表達,雖有文獻報道可使用大腸桿菌表達scfv類片段抗體,然而由于此類宿主細胞缺乏必要的翻譯后修飾機制,表達的scFv分子缺乏結構域內二硫鍵的形成,然而這對“免疫球蛋白折疊”結構至關重要。通常需要額外的蛋白質復性和回收步驟來生成可溶性scFv分子。為了解決這些問題,可以選擇哺乳動物細胞表達雙特異性scFv,因為它們能夠進行復雜的翻譯后修飾。

 

如何對雙特異性抗體進行設計?

一開始,使用四源雜交瘤(雜交-雜交瘤)來生產雙特異性抗體。由于隨機組裝4條不同的多肽鏈(2條不同的重鏈和2條不同的輕鏈),只有1種功能性雙特異性抗體,其余9種為單特異性抗體和無活性抗體。這導致目標bsAb的產量較低,給下游純化工藝帶來了巨大挑戰。

為了克服重鏈和輕鏈的連接問題,科學家們利用重組DNA技術對雙特異性抗體進行改造。雙特異性抗體根據不同的特性分為兩類:IgG樣bsAb和非IgG樣bsAb。IgG樣雙抗具有保守的免疫球蛋白恒定區,因此保留了Fc介導的效應功能,如CDC和ADCC。IgG樣雙抗分子量大,還具有較長的血清半衰期、較好的溶解度和穩定性。非IgG樣雙抗相比之下,由于缺乏Fc片段,具有體積較小、免疫原性低和組織滲透性好等特點,但在血清中的半衰期更短。

 

特色抗體服務

表達嵌合抗體?

嵌合抗體生產服務將輕重鏈可變區基因插入到含選定種屬恒定區的表達載體中,表達全長嵌合抗體。

 

表達scFv、Fab或VHH抗體形式?

抗體片段生產服務以競爭力的價格為您表達高質量的重組抗體片段。

 

高通量 (HTP) 抗體生產?

高通量抗體生產服務每周生產數千個重組抗體,以支持您的藥物發現。

 

更多雙特異性抗體生產服務相關內容

雙特異性抗體(Bispecific antibodies,簡稱BsAb)是一種人工制備的抗體,能夠同時結合兩種不同的抗原或同一抗原的兩個不同表位。

雙特異性抗體的開發是一個復雜的過程,涉及多學科的知識和技術創新。隨著生物技術的發展,雙特異性抗體在治療多種疾病,尤其是腫瘤-治療方面展現出巨大的潛力。

 

制備原理

化學偶聯法:通過化學偶聯劑將兩個完整的IgG或兩個F(ab')2抗體片段偶聯成雙特異性抗體。

雙雜交瘤融合法:將兩株不同的雜交瘤細胞融合成雙雜交瘤細胞株,產生兩種重鏈和兩種輕鏈分子,通過篩選獲得所需的BsAb。

Knob-in-hole技術:通過突變抗體重鏈CH3區的結構,實現兩種不同抗體重鏈間的正確裝配。

基因工程方法:利用基因工程技術對傳統抗體進行改造,形成多種形式的雙特異性抗體。

 

用途

腫瘤-治療:通過橋接T細胞和腫瘤細胞,增強免疫反應,如Catumaxomab。

免疫診斷:在臨床檢測中,如甲胎蛋白和癌胚抗原的檢測。

腫瘤放-射顯影:一端結合腫瘤細胞表面抗原,另一端結合放-射性核素標記的半抗原。

藥物載體:將單克隆抗體與化-療藥物、毒素或放-射性核素偶聯,實現靶向治療。

 

(歡迎小伙伴來咨詢哦!   請注明來源、姓名,單位)

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