無細胞蛋白表達服務
- 公司名稱 北京義翹神州科技股份有限公司
- 品牌 義翹神州/Sino Biological
- 型號
- 產地 北京
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/1/15 14:50:59
- 訪問次數 49
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無細胞蛋白表達服務
無細胞蛋白合成服務優勢
無細胞表達服務流程
無細胞合成服務內容
無細胞合成系統示意圖
案例展示
高純度VHH表達
VHH synthesized by CFPS with purity by SDS-PAGE and SEC-HPLC >95%.
高通量scFv表達
From gene to purified 50 scFvs, Sino Biological completed synthesis by CFPS in only 5 days.
無細胞合成與HEK293細胞表達的VHH體外抗原結合活性一致
anti-IL6R VHH 
Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized IL6R at 0.5 μg/ml (100 μL/well) can bind anti-IL6R nanobody expressed by CFPS system and HEK293 Cell respectively. | anti-TROP2 VHH 
Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized TROP2 at 0.5 μg/ml (100 μL/well) can bind anti-TROP2 nanobody expressed by CFPS system and HEK293 Cell respectively. |
無細胞表達系統--新一代蛋白表達技術
無細胞表達系統的基本原理是利用來源于細胞的轉錄翻譯等元件，搭配能量體系和原料體系，共同在體外組成能夠直接從DNA合成蛋白質的反應體系。
無細胞表達系統具備很多基于細胞合成蛋白的優勢，如快速省時，不需培養細胞，幾小時就可獲得蛋白。同時在高通量蛋白篩選、快速蛋白合成、非天然氨基酸引入甚至AI自動化合成蛋白等領域具有巨大的潛力和應用價值。
無細胞蛋白合成服務常見問題解答
無細胞合成（CFPS）體系相對于細胞體系有哪些優勢？
無細胞表達系統的優勢主要體現在：
• 可自動化操作簡便、快捷——成本低（無需培養細胞和細菌相關的場地設施）、表達時間短（3h）、單位表達量高。
• 蛋白表達工程化（Cell-free protein engineering）——無細胞合成系統作為一個開放式的系統，可以向體系中自由添加所需的成分以調控蛋白的正確合成。例如可以向系統中加入Fe2+、Mn2+和Cu2+等金屬離子促進含有對應離子蛋白的正確合成；可以有效表達抗菌肽等毒性蛋白并實現規模化目的蛋白的生產。
• 適合原型研究（cell-free prototyping），整體原料均為外加，活性物質之間發生的化學酶促反應使整個過程相對可控。
真核來源的蛋白是否必須用真核表達系統？
并非如此，真核來源的蛋白除了傳統的哺乳動物表達系統，還可以利用無細胞蛋白合成。無細胞系統是一套酶促級聯反應，可以添加很多其他組分甚至是真核來源的提取物來實現真核蛋白的表達。如果某些目標蛋白（比如抗體功能性片段scFv和VHH）的功能不依賴翻譯后修飾，在這種情況下，不管是無細胞系統還是HEK293系統，兩者表達的活性無明顯差異。
無細胞合成系統是否適用于高通量，表達量如何？少量蛋白的檢測是否也適用？
無細胞表達系統非常適合高通量表達，其產量高可到 mg/mL 級別，抗體和抗體功能性片段是 100 μg/mL 級別。對于少量蛋白的檢測需要建立相應的檢測方法，如您想進一步了解，我們可以協助進行方法學的設計。
對于原核體系難以表達的真核來源蛋白，無細胞表達體系有什么優勢嗎？
因為其開放式系統可以添加很多其他組分甚至是真核來源的提取物來實現真核蛋白的正確合成。例如我們聚焦的VHH、VHH-Fc等都可以實現無細胞系統中上清表達，但是這些蛋白在原核表達中往往以錯誤的形式存在。
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