CLARITY相關(guān)試劑

“CLARITY”作為新型的組織透明化技術(shù)，由斯坦福大學的Dr. Karl Deisseroth等發(fā)表于2013年3月的Nature雜志。由于CLARITY可用于熒光蛋白和抗體的免疫染色，有望用作分析大腦神經(jīng)回路的有效工具。

此外，“PACT（被動CLARITY技術(shù)，passive clarity technique）”在2014年發(fā)表，通過去除雙丙烯酰胺和增加表面活性劑的濃度，無需電泳即可實現(xiàn)被動性的組織透明化。

FUJIFILM Wako可提供文獻中實驗方案中透明化步驟使用的試劑，如VA-044等試劑。

參考文獻

1） Chung,K et al. : Nature., 497, 332(2013).

2） Yang, B. et al., : Cell, 158(4), 945(2014).

◆CLARITY實驗方案示例

● 水凝膠單體溶液組成（Hydrogel Monomer Solution）

?VA-044??????????? 1 g

?40% 丙烯酰胺 ?????40 mL

?2% 雙丙烯酰胺????10 mL

?10 × PBS ??????????40 mL

?16% 多聚甲醛?? 100 mL

?皂苷???????????200 mg

?水??????????????210 mL

● 電泳buffer組成

?硼酸???123.66 g

?SDS????400 g

?NaOH ???調(diào)至pH 8.5

?水?????最多可加入10 L

● 脂質(zhì)除去用電泳槽

?Electrophoresis Chamber For Lipid Extraction（NIHON EIDO）

● 循環(huán)泵

?GPU-1、GPU-2（Azscience）

◆PACT 實驗方案示例

● A4P0組成

· VA-044???????????0.25%

· 丙烯酰胺 ?????4%

· 含有上述成分的PBS溶液

● RIMS組成（RI 1.46）

· tween 20???0.1%

· 疊氮化Na????0.01%

· 含有上述成分的0.02 M PBS???30 mL

· 碘-海醇???40 g

· NaOH ???調(diào)整至pH7.5

◆應用數(shù)據(jù)

經(jīng)CLARITY處理的小鼠大腦

經(jīng)CLARITY處理的小鼠大腦成像

圖2.  經(jīng)CLARITY處理的Thy1-YFP（H Line）小鼠大腦的熒光觀察

（A）從大腦皮層到海馬體的３D觀察圖像；（B）大腦皮層Ⅴ層錐體細胞的樹突圖像

拍攝條件：雙光子；使用設備：Olympus FV1000正置顯微鏡，25倍浸沒物鏡

CLARITY處理+使用抗體的小鼠大腦成像

圖3. 經(jīng)CLARITY處理后，使用Iba1抗體染色的Thy1-YFP（Ｈ線）小鼠大腦的熒光觀察

（A）在大腦皮層的小膠質(zhì)細胞３D觀察圖像；（B）從表層觀察皮質(zhì)層Ⅰ的圖像

拍攝條件：單光子；使用設備：Olympus FV1000正置顯微鏡，25倍浸沒物鏡

查看相關(guān)產(chǎn)品頁面：脂質(zhì)除去用電泳槽使腦部透明化

http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/product/show/616.html

查看相關(guān)產(chǎn)品頁面：VA-044（聚合物引發(fā)劑）

http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/product/show/613.html

◆產(chǎn)品列表

電泳槽

關(guān)于富士膠片和光

　　日本富士膠片和光純藥株式會社（FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation）供應產(chǎn)品超過5萬種，涵蓋合成與材料、分析、培養(yǎng)、生命科學、藥品生產(chǎn)與品質(zhì)管理等應用，囊括了基礎研究至關(guān)乎人類健康的生命科學研究領域。本社成立于1922年，前身為前武田藥品工業(yè)株式會社，2017年被富士膠片集團全面收購。

　　隨著富士膠片集團對生命科學領域的更大重視和投入，為了繼續(xù)對中國客戶提供更多前沿、品質(zhì)可靠的產(chǎn)品，富士膠片和光純藥株式會社在中國設立了子公司富士膠片和光（廣州）貿(mào)易有限公司，是一家試劑、耗材和儀器的綜合供應商。除了富士膠片和光品牌產(chǎn)品，本公司還代理Enzo Life Sciences、VLVbio、imed、AdipoGen、Stemgent、Cosmo Bio、ReproCell、Funakoshi、Kikkoman、Sanplatec、SONSAN、Genovis、Albumedix、Indigo等國內(nèi)外品牌，在學術(shù)研究、產(chǎn)業(yè)化、醫(yī)療等大范圍領域作出貢獻。