SW1353 人軟骨肉瘤細胞 百歐博偉生物

SW1353 人軟骨肉瘤細胞 百歐博偉生物

細胞簡介

平臺編號：Bio-132137

規格：1×10?Cells/T25培養瓶

細胞信息：SW1353

產品簡稱：SW1353

中文名稱：(人軟骨肉瘤細胞)(STR鑒定正確)

細胞數量：1*10^6

組織來源：軟骨肉瘤

形態特征：成纖維樣

生長方式：貼壁生長

培養條件：Leibovitz'sL-15+10%FBS+1%P/S無二氧化碳培養,氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%；溫度：37℃

換液頻率：--

傳代比例：1:2傳代，消化3-5分鐘，3天可長滿

凍存液配方：90%FBS+10%DMSO

安全性：BSL-1

供應限制：僅供科研

運輸方式：常溫運輸（T25培養瓶）

用途：STR鑒定正確

注意事項：僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產品信息以出庫為準）

SW1353(人軟骨肉瘤細胞）特點

1、細胞顆粒感較重

細胞傳代培養時細胞內黑點及細胞外顆粒較多，建議使用優質血清及培養基培養細胞；

2、傳代、復蘇注意細胞狀態

細胞消化或者復蘇操作不當容易導致細胞死亡裂解產生大量碎片及顆粒，進而影響活細胞狀態，注意消化或復蘇過程盡量輕柔，嚴格控制消化時間和復蘇操作規范，傳代或復蘇24h后建議觀察細胞，建議換液一次去除死亡細胞。

細胞收貨攻略

（一）常溫細胞

1、T25瓶收貨后，拆開外包裝，用75%消毒T25瓶表面，放37℃培養箱靜置2-4h；

2、吸走大部分培養基并留10-12 ml，顯微鏡下拍照保存細胞狀態照片，觀察細胞密度，若細胞密度大于80%即可按比例傳代（傳代比例建議1：2），若細胞密度低于70%可以留10-12 ml繼續培養至細胞密度80%以上再進行傳代培養；

（二）凍存細胞

1、細胞收貨后盡快開箱檢查，若干冰充足可以取出細胞迅速置于-80℃冰箱（2-3天內復蘇）短期保存或液氮中長期保存，若干冰揮發建議立即復蘇細胞并聯系銷售人員解決；

2、凍存細胞建議盡快復蘇一管培養檢查，以免超出售后期，復蘇步驟參考復蘇攻略；

3、復蘇一管細胞出現異常及時聯系銷售人員，在專業技術支持的指導下進行下一步操作；

TIPS：

1、細胞收貨出現漏液、培養瓶破損、干冰揮發等異常情況時，及時拍照聯系銷售人員；

2、該細胞貼壁生長，一般T25瓶運輸過程中較少出現大量細胞脫落并聚團的情況，少量細胞脫落是正常狀態，不影響細胞生長，按正常操作步驟繼續培養即可。

3、尚恩生物T25瓶發貨的細胞內含對應細胞的培養基，可以收集原裝培養瓶內培養基經1500rpm離心5min后，取上清于4℃保存用于后續細胞培養；

細胞凍存攻略

凍存步驟

1、先將細胞按傳代步驟消化、離心，至傳代步驟4，棄細胞上清，獲得細胞沉淀；

2、加入適量預先配好的程序性凍存液輕輕重懸細胞，并將細胞懸液轉移至做好標記的凍存管中；

3、將凍存管放入程序性凍存盒，放入-80℃冰箱過夜；

4、轉移細胞至液氮保存并登記細胞保存位置，液氮保存24h后建議復蘇一管檢測凍存細胞的活性，若活性合格即可長期保存，若低于80%建議重新凍存；

TIPS：

1、檢測凍存細胞活性結果未合格前，培養瓶內細胞建議繼續培養直至確認凍存合格方可視需要丟棄；

2、程序性凍存液需要配合程序性凍存盒使用，若使用非程序凍存液可以按產品說明書處理降溫過程；

3、T25培養瓶長滿通常可以凍存2-3管，10cm皿長滿可以凍存3-4管；

細胞復蘇攻略

復蘇步驟

1、將所需的培養基放在培養箱預熱30min后開始復蘇；

2、準備37度溫水，將細胞從液氮罐取中出，觀察管內無液氮的情況下，捏住管蓋，將細胞凍存部分浸入溫水輕輕搖晃，融化至米粒大小冰塊，終止水浴；

3、將凍存管以離心力150g(約900rpm)左右離心1-2min，不同離心機具體轉速會有差異；

4、離心完成后，棄凍存液，用剛才預熱的培養基緩慢加入凍存管，并輕柔重懸細胞后接種至T25或者10cm皿中。

TIPS：

1、凍存管在液氮長期保存過程中難免滲入液氮，取出細胞時震動不要過大，水浴前一定要觀察管內是否存在液氮，若有液氮建議靜置一會待液氮蒸發后再水浴；

2、水浴時可以使用一次性PE手套包住凍存管避免直接接觸水源，可以降低管蓋縫隙滲入水導致污染的概率；

3、水浴至剩米粒大小時及時終止水浴，避免過度水浴或水浴時間不足；

4、建議水浴完成后直接在離心管內離心細胞，避免再次轉移細胞；

5、復蘇后的細胞比較脆弱，吹打和轉移細胞時盡量輕柔，復蘇24h后換液去除死亡細胞；

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