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B-PER 細菌總蛋白抽提試劑

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科學儀器

    Thermo Scientific B-PER細菌蛋白抽提試劑主要用于從細菌中抽提可溶性蛋白。使用這種基于試劑的裂解方法則無需使用超聲破碎等刺耳的機械方法。這些簡單易用的細胞裂解溶液采用溫和的非離子型去垢劑來裂解細胞和溶解蛋白,不會引起蛋白變性。加入DNaseI和等酶可以提高難以純化的大分子量蛋白的得率。B-PER*試劑與GST純化和固定化的標簽金屬親和色譜(IMAC)等下游蛋白純化方法也是相容的。純化或者鑒定重組蛋白的步就是裂解細胞和釋放蛋白。超聲和其他細胞裂解方法的效率不如B-PER溶液,而自制裂解的溶液含有干擾下游應用的去垢劑和成分。B-PER裂解試劑有兩種緩沖體系,分別是20 mM Tris緩沖液(pH 7.5)和磷酸鹽緩沖液(產品貨號 78266), 所得到的裂解物與電泳、親和純化、免疫沉淀、蛋白相互作用分析、交聯和蛋白標記等經典的下游實驗兼容。如果需要,也可以通過透析或者凝膠過濾(脫鹽柱)去除溫和的去垢劑成分。
    產品特點:
    • 即時可用 B-PER裂解試劑提供了使用溫和的非離子型去垢劑()一步裂解大腸桿菌的方法,并且有Tris或者磷酸緩沖鹽液配方可供選擇。
    • 簡單、快速 – 僅需向細菌沉淀中加入B-PER裂解試劑并搖動10分鐘。沉淀細胞碎片即可回收可溶性蛋白。
    • 得率 – 可以從細菌裂解物中回收可溶和不可溶的重組蛋白和純化包涵體到接近均一水平。(溶解已純化的包涵體和復性蛋白質,見22-23頁)
    • 靈活 B-PER裂解試劑適用于任何規模的蛋白抽提。有含酶或不含酶的磷酸鹽緩沖液、1X 和2X Tris緩沖液體系。
    • 相容性強 – 與蛋白酶抑制劑混合物兼容,所得的蛋白抽提物可用于蛋白質分析、親和純化 (例如,GST, 6xHis)和其他應用。
    • 方便即用的形式:
    B-PER和B-PER II (2X)試劑不含酶
    B-PER (磷酸鹽緩沖液)試劑不含氨基,可以直接用于蛋白標記和交聯。
    – 含酶的B-PER和B-PER Direct裂解試劑- -含有提高裂解和回收效率的和DNA酶

    Thermo Scientific B-PER裂解試劑選擇指南
    B-PER裂解試劑
    用途
    B-PER
    • 細菌裂解
    • 親和標簽蛋白的純化
    B-PER Ⅱ(2X濃縮液)
    • 低細胞密度的細菌裂
    • 解低表達水平蛋白的純化
    B-PER(磷酸鹽緩沖液)
    • 無氧基體系保證裂解物可以用于與氨基反應的蛋白標記和交聯
    B-PER(含酶)
    • 通過增加對細胞膜和DNA的消化來提高產量
    • 高分子量蛋白質的回收
    • 從包涵體回收不溶性蛋白
    B-PER Direct(含酶)
    • 在培養基里直接裂解細菌
    • 96孔板樣品篩選

    參考文獻:
    Akifusa,S.,et al. (2005).Microbiology151,1395-1402.
    Fraillery, D.,et al. (2007).Clin. Vaccine Immunol.14, 1285-1295.
    Jing, W. and DeAngelis, P.L. (2000).Glycobiology10, 883-889.
    McClain,M.S. and Cover, T.L. (2007).Infect. Immun.75, 1785-1793.
    Montero, E.,et al. (2006).J. Biol. Chem.281, 35717-35726.
    Pai,S.,et al. (2005).Nucleic Acids Res.33, e162.
    Richard-Fogal, C.L.,et al. (2007).J. Bacteriol.189, 455-463.
    Young, V.B.,et al. (2004).Infect. Immun.72, 2521-2527.
    Yu, W.,et al.. (2005).J. Neurosci.25, 5573-5583.
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