1.Fluo/Am儲存液配制：將Fluo/Am溶于DMSO，配成終濃度為2mmol/L的儲存液，分裝，-70度凍存。
2.懸浮細胞染色：收集細胞并調整細胞濃度至2*10^6個/ml，加Fluo/Am至終濃度為5-10umol/L,置于，5%CO2。37度避光，孵育30-60min，其間輕輕振蕩幾次，并設置陰性對照（不加Fluo/Am）。
3.貼壁細胞染色：以5*10^5個細胞種植于24孔培養板中，置于5%CO2。37度培養一段時間，加入Fluo/Am至終濃度為5-10umol/L，置于5%CO2。37度避光，孵育30-60min。其間輕輕振蕩幾次，并設置陰性對照。
4.取出細胞或消化細胞，離心1500r/min 10min，去除多余染料，再用無鈣緩沖液沖洗PBS反復離心洗滌2次，最后用無鈣PBS重懸至0.5ml。
5.進行流式檢測分析
結果分析：用488mm激發，FLI-H熒光通道收集熒光信號，收集1*10^4個細胞，細胞內鈣的濃度用平均熒光表示。