大鼠動物髓核細胞的原代培養方法

頸椎脫臼法處死SD大鼠。

 剃去背毛，75%酒精浸泡5min。

從尾椎處剪開皮膚，取出腰椎。

盡量剔除附著的肌肉，用含2%雙抗的PBS沖洗3-5次。

分離椎節，切開纖維環分離凝膠狀髓核，將凝膠狀髓核置于PBS中沖洗 3 次，去除血跡，剪碎髓核組織呈 1mm³大小，移至離心管后加入5倍體積的1.5%Ⅱ型膠原酶，37℃搖床消化2h。

消化結束 ，20%FBS終止消化，100um濾網過濾，1000r/min 離心 5min，棄上清后DMEM/F12 重懸，按 1×10⁵/ml接種于培養板，加入含1%雙抗和 15% FBS 的 DMEM/F12，置于37 ℃細胞培養箱中培養。

4 d后換液，以后每3天換 液 1 次，細胞達 90% 融合后傳代。

大鼠動物髓核細胞的原代培養評價

原代細胞(primary cell)：是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養的細胞，稱為原代細胞。