TelePhOto：無(wú)線光度測(cè)量和光遺傳學(xué)

TeleFiOpto 可以以無(wú)線方式同時(shí)進(jìn)行光纖光度記錄和光遺傳學(xué)刺激。在纖維插管之前，應(yīng)通過(guò)在目標(biāo)處注射兩種病毒來(lái)表達(dá) GFP 樣動(dòng)態(tài)指示劑（GCaMP、dLight、GRAB-DA 等）和黃紅色敏感視蛋白（NpHR、Chrimson、Jaws 等）位置，然后瞄準(zhǔn)目標(biāo)植入纖維套管。 然后您可以同時(shí)光學(xué)記錄和刺激目標(biāo)

TeleFiOpto 是我們既定的兩項(xiàng)技術(shù) Teleopto 和 TeleFipho 的融合。 即，光度測(cè)量數(shù)據(jù)通過(guò)2.4GHz頻段發(fā)送到TeleFipho接收器，刺激定時(shí)通過(guò)紅外信號(hào)發(fā)送到探頭。如果您已經(jīng)擁有Teleopto或TeleFipho，只需添加一些組件即可建立TeleFiOpto系統(tǒng)，因此比新購(gòu)買(mǎi)完整的測(cè)光和光遺傳學(xué)系統(tǒng)要經(jīng)濟(jì)得多。

* 建議使用直徑 600um套管。 不推薦直徑200um。

* Diameter 600um cannula is recommended. Diameter 200um is not recommended.

系統(tǒng)配置

示例數(shù)據(jù)

rsChRmine 激活誘發(fā)的GCaMP信號(hào)

數(shù)據(jù)由富山大學(xué) Inokuchi 實(shí)驗(yàn)室的 Masanori Nomoto 博士提供。

TeleFiOpto套管 (TeleFiC-3.0-600) 被插入，瞄準(zhǔn)在同一神經(jīng)元子集中表達(dá) GCaMP 和 rsChRmine 的小鼠的mPFC。GCaMP記錄和光遺傳學(xué)刺激由TeleFiOpto系統(tǒng)執(zhí)行。 rsChRmine 是紅移通道視紫紅質(zhì)，可引起神經(jīng)元興奮。

圖 1：熒光顯微鏡下 GCaMP 和 rsChRmine 表達(dá)的組織觀察。 我們證實(shí) GCaMP 和 rsChRmine 在植入套管下的同一細(xì)胞亞群中均得到良好表達(dá)。該組織學(xué)是在記錄會(huì)話后完成的。

圖 2：整個(gè)記錄會(huì)話中的原始數(shù)據(jù)。小鼠自由移動(dòng)直至麻醉時(shí)間點(diǎn)1376秒。 在809第二時(shí)間點(diǎn)之前使用10uW藍(lán)色激發(fā)光。在第809秒將激發(fā)光改為30uW，然后在第823秒在范圍內(nèi)調(diào)整偏移。1376秒時(shí)用0.5%氟烷輕麻醉小鼠，觀察到基礎(chǔ)熒光的抑制和自發(fā)神經(jīng)元活動(dòng)的抑制。 下圖的時(shí)間點(diǎn)用彩色方塊標(biāo)記。