白血病動物模型

白血?。?/span>Leukemia）是一種常見的惡性血液疾病，俗稱血癌。據統計，白血病是兒童惡性腫瘤的頭號原 因，在兒童及35歲以下成人中發病率位居第yi。同時也是shi大惡性腫瘤之一。目前，白血病具體的發病 原因至今尚未研究透徹，因此建立合適的白血病動物模型，對于白血病發病機制及藥物研發具有重要意義。

白血病是常見液體瘤

白血病是常見的液體瘤，與結腸癌、肝癌等實體瘤不同的是，它是造血干細胞的異常分化和過度增殖導致，因此腫瘤細胞會遍布全身，會侵犯身體的每個臟器，造成全身衰竭。

造血干細胞是血液系統中的成體干細胞，具有長期自我更新和分化成各類成熟血細胞的能力。如下圖為造血干細胞可分類形成各種血細胞，如紅細胞、血小板和白細胞：

白血病致病因素

現階段認為白血病的發病因素：化學因素、電離輻射、藥物、毒物、病毒、遺傳因素等有關。

白血病主要分為四類

根據白血病細胞的成熟程度和自然病程，白血病可分為急性和慢性兩大類，臨床上，白血病共分為四大類：急性髓系白血?。?/span>AML）、急性淋巴細胞白血病（ALL）、慢性髓系白血?。–ML）和慢性淋巴細胞 白血?。–LL）。兒童白血病90%以上是急性的，其中急性白血病中70%～80%是ALL。

常用的白血病細胞株

白血病中常用的小鼠品系

用于建立白血病小鼠模型的小鼠可分為近交系和突變系。根據不同類型和目的選擇不同的小鼠品系，具體如下圖所示：

常用的白血病動物模型，主要分為三類：

 一、異種移植模型 異種移植模型是常用的淋巴瘤動物模型。根據實驗目的選擇相應的小鼠品系和細胞株后，通常細胞的接 種方式為皮下注射、腹腔注射和尾靜脈注射。 皮下注射和腹腔注射操作簡單，很快在接種部位形成腫瘤或腹腔內形成多發性腫瘤，適合篩選針對白血病的藥物。但該類模型與白血病臨床病人實際情況差距較大。

異種移植示意圖

尾靜脈注射接種模型，可形成全身性擴散的白血病模型。符合白血病臨床過程規律，此模型以動物生存期作為評價藥效的主要指標，并對采血樣本進行血細胞的形態學檢測。

下面以尾靜脈注射模型實驗步驟為例：

根據實驗目的選擇實驗小鼠和細胞（如NOD-SCID小鼠和人急性早幼粒細胞白血病細胞株）；荷瘤細胞量 一般1-2 × 105 /只。

破壞動物殘留的免疫能力：給予小鼠射線照射（如1.5Gy劑量60Coγ射線全身照射）； 細胞接種：小鼠射線照射4-5天后，收集對數期生長的細胞，尾靜脈注射細胞懸液； 移植后第二天對小鼠分組，進行給藥；統計小鼠生存率。

評價：此種模型易建立，成瘤率高，成瘤時間差異小，是篩選抗腫瘤藥物常用的動物模型。

數據分析：

小鼠經X射線照射后尾靜脈注射2×105個hMRP8-PML-RARα細胞，建立ATRA耐藥移植型小鼠模型。如下圖：

圖A統計生存曲線，給藥組（LG362B和陽性藥ATRA）均可延長小鼠生存期。

圖C與D剝離小鼠脾臟拍照并稱重，患白血病小鼠較正常小鼠脾臟腫大，給藥組（LG362B和陽性藥 ATRA）均可使脾臟恢復正常。

圖E：取小鼠外周血和骨髓細胞制作涂片進行Wright-Giemsa染色，從形態學上可觀察到給藥組（LG362B 和陽性藥ATRA）可誘導白血病細胞分化。

二、基因修飾型白血病模型 基因修飾型白血病模型主要為利用基因編輯技術進行敲除或插入特定基因，從而誘發動物產生白血病。如 骨髓增生異常綜合征（MDS）轉化為急性髓系白血病是由于NRAS和BCL-2在形成復合物，建立骨髓增生 異常綜合征轉化AML小鼠模型MRP8[NRASD12/hBCL-2]篩選出BCL-2抑制劑ABT-737[4]。下圖為主要的 基因工程型白血病模型：

評價：基因修飾型動物模型成瘤機制清楚、病理表現明確，常用于白血病發病機制的研究。但需構建基因 工程載體，胚胎培養、顯微注射等一系列工作，周期長，花費大，一般根據實驗需求構建適合的動物模型。

三、誘發型白血病模型

誘發白血病示意圖

評價：誘發型模型操作簡便，基本模擬了腫瘤的發生過程，是一種較好的建立腫瘤模型的方法。但生物學 特征不穩定，并且誘導劑對人也有一定的危害，導致該模型較少使用。

服務內容： 裸鼠的購買，飼養，造模、取材，和后續指標的檢測等。

腫瘤模型（皮下移植瘤、原位癌）：

乳腺癌 肺癌 結腸癌 胃癌 肝癌 白血病 淋巴瘤

皮膚癌 前列腺癌 食管癌 宮頸癌 卵巢癌 人絨毛膜癌

口腔癌 腎癌 膀胱癌 胰腺癌 大腸癌

交付標準： 整套的動物模型構建，動物飼養，標本采集和指標檢測的實驗服務，提供詳細的動物實驗報告單。

白血病動物模型