abs60256 PM原代細胞質粒DNA轉染試劑盒
參考價 | ¥ 528 |
訂貨量 | ≥1份 |
- 公司名稱 愛必信(上海)生物科技有限公司
- 品牌 absin
- 型號 abs60256
- 產地 上海
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2024/7/9 9:00:33
- 訪問次數 1086
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CAS | - | 純度 | - |
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分子量 | - | 分子式 | - |
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 0.1ml;0.5ml;1.0ml;1.5ml |
貨號 | abs60256 | 應用領域 | 生物產業 |
主要用途 | 專門用于原代細胞質粒DNA轉染的轉染試劑 |
產品介紹:
這款產品是在Plasmid DNA Transfection Reagent的基礎上進一步優化研發成功的專門用于原代細胞質粒DNA轉染的轉染試劑。它具有非常好的轉染性能,可高效轉染多種原代細胞,轉染效率高達70%以上(EGFP質粒)。與目前市場上常見的脂質體轉染試劑不同,這款產品采用生物可降解材料配制,對細胞的毒性很低,轉染后細胞死亡率不到10%。使用也非常方便,先將轉染試劑與質粒DNA混合,再將轉染試劑-DNA復合物直接加入培養細胞中,血清不影響其轉染效果,不必刻意添加或更換培養液,操作十分簡便。
產品特點
1、強大的細胞轉染性能:可高效轉染多種原代細胞,轉染效率可高達85%以上;
2、 極低的細胞毒性:使用可降解生物材料,細胞毒性低,轉染細胞死亡率不到10%,大大降低了因細胞毒性對實驗結果的影響,實驗結果更為客觀;
3、操作簡便,可用于含血清培養基培養細胞的轉染,轉染前后不需要更換培養液。
方法步驟(以24孔板轉染為例):
A、細胞接種:
1、轉染前24小時左右對細胞進行轉接,培養過夜;
2、確保轉染時細胞密度為90%左右;
3、最好在轉染開始之前更換新鮮的含血清培養基,以防轉染后孵育 階段細胞密度太大、營養不足導致細胞死亡。
B、PM /DNA轉染復合物制備(該步完成后應立即進行轉染):
1、在1.5 ml無菌離心管中加入50µl Trans buffer,再加入適量的轉染 試劑,見附表。用移液器輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘。
2、在1.5 ml無菌離心管中加入50µl Trans buffer,輕輕混勻,再加入適量的DNA,見附表。用移液器再次輕輕 混勻后在室溫靜置5分鐘。
3、將DNA-Trans buffer合物滴加至PM-Trans buffer混合物中,用移液器輕輕混勻后在室溫靜置15~20分后,立即轉染。注意: PM-Trans buffer混合物和DNA-Trans buffer混合物的混合次序非常重要,切勿顛倒。
注意:離心管最好使用聚丙烯離心管。
C、轉染:
1、將步驟B制備的轉染復合物滴加至培養基中,邊加邊輕輕晃動培養板以使復合物均勻分布。加完后,立即將培養板轉入培養箱繼續培養。
2、培養12小時后即可觀察,最佳觀察或收獲時間為24~48小時。
3、PM在培養基中仍有較高的轉染效率,因此轉染前后不需要換成無血清或低血清培養基。如果轉染后需要更換新鮮培養基,請于加入PM /DNA復合物12~24小時后進行。
附表:不同培養體系推薦初始轉染條件
培養皿 | 96 孔板 | 48 孔板 | 24 孔板 | 12 孔板 | 6 孔板 | 10cm 皿 | |
表面積cm2 | 0.35 | 1.0 | 1.9 | 3.8 | 9.6 | 59 | |
Trans buffer、試劑、DNA 量 | Trans buffer(μl) | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 | 2000 |
PM(μl) | 0.5 | 1.3 | 2.5 | 5 | 10 | 50 | |
1μg/μl plasmid (μl) | 0.16 | 0.4 | 0.8 | 1.6 | 3.2 | 16 | |
培養基(ml) | 0.1 | 0.25 | 0.5 | 1.0 | 2.0 | 10 |
儲存/保存方法:
-20℃避光保存,Trans buffer 可保存于2-8°C,有效期1年,使用前輕輕混勻。
試劑盒包裝:
貨 號 | PM試劑 | Trans buffer |
abs60256-0.1ml | 0.1ml | 4ml |
abs60256-0.5ml | 0.5ml | 20ml |
abs60256-1.0ml | 1.0ml | 40ml |
abs60256-1.5ml | 1.5ml | 60ml |
產品用途:
大鼠肝細胞、血管平滑肌細胞、血管內皮細胞、肺泡上皮細胞、乳腺癌細胞、肺癌細胞、大腸癌細胞、肝癌細胞等。
* 注意: 本產品僅用于科研實驗