其他自備材料和試劑

MG&ABW基質膠

組織消化液

上皮類器官基礎培養基

類器官消化液

人肝膽管(擴增)類器官培養基

類器官冷凍保存培養基(無血清)  

DPBS (1X)，液體，不含鈣和鎂  

FBS（胎牛血清）

EDTA

人肝膽管類器官擴增培養基和穩態培養基的制備

采用無菌技術制備人肝膽管類器官擴增培養基和穩態培養基。在人肝膽管類器官擴增培養基中生長的人肝導管類器官絕大多數是膽管細胞。

以下是準備 10mLcomplete medium培養基的示例，如所需量不同，可相應調整用量。

1.冰上解凍人肝膽管類器官培養因子B、人肝膽管類器官培養因子C。

注意： 解凍后，建議將人肝膽管類器官培養因子B、人肝膽管類器官培養因子C分別分裝后保存取用，避免反復凍融。

2. 配制人肝膽管類器官擴增培養基，專門用于原代培養和復蘇。添加200 μL人肝膽管類器官培養因子B (50x)、40 μL人肝膽管類器官培養因子C (250x)至9.76 mL人肝膽管類器官基礎培養基中，混合均勻。

注意：配制后的人肝膽管類器官培養基可在 2-8°C 儲存，建議在兩周內使用。人肝膽管類器官培養因子B(50x)內含有細菌及真菌抗生素(50x)。