3D活細胞培養顯微成像系統實時解構 3D 生物微觀世界*
THUNDER Imager Live Cell & 3D Cell Culture & 3D Assay
——
THUNDER Imager 可為您提供適用于* 3D 細胞培養試驗的解決方案，無論您想要研究的是干細胞、球狀細胞團或是類器官。

從以下優勢中獲益：

• 高通量，可實現更好的統計和工作流程效率

• 儀器使用簡單，成像性能高

• 優化的生理條件，獲取有意義的結果

THUNDER Imager 采用徠卡創新的 Computational Clearing 技術， 能夠實時有效去除非焦平面的模糊信息，使 3D 樣品在基于攝像頭的熒光顯微鏡上依然能高質量地采圖。系統的高度靈敏度可確保低光毒性和低淬滅，全面優化條件以實現更高的圖像質量。

依據 ISO/IEC 2382:2015

高通量，可實現更好的統計和工作流程效率

為您的3D細胞培養試驗實現自動化，高效研究新一代疾病模型。THUNDER 能助您對肺器官等大體積樣品進行高速成像。此外，自動化還能在繁瑣的實驗中將用戶的操作步驟減低。

您將：

• 在更短的時間內獲得精確可靠的數據

• 獲得更高的通量

• 獲得更好的統計和結果

疊加圖像：培養的皮層神經元。綠色為 beta-III-微管蛋白；藍色為細胞核。
深度 21 µm 的 Z 軸層掃圖像，包含 59 層掃描平面，使用 THUNDER Imager 3D Cell Culture 攝取。原始圖像與使用 THUNDER Large Volume Computational Clearing 攝取的圖像進行比較。
樣品特別感謝：德國馬格德堡 (Magdeburg)，FAN GmbH 公司。

找到適合您的 THUNDER 成像系統

無論您是尋找特別適合某個特定應用的專用成像系統，還是尋找用不同樣本進行各類實驗的多樣化實驗室解決方案，我們都可為您提供合適的產品。

下面是一些展示 THUNDER 優勢的精選應用示例：

用 THUNDER 可靠量化整個小鼠視網膜

視網膜成像的定量分析方法通常注重于提供視網膜形態和功能的綜合描述。 視網膜異常以及轉化臨床應用都需要可靠的工作流程來重現轉基因靶點篩選。 因此，形態學的重復成像需要能夠持續重現準確結果的系統解決方案。 使用使用 THUNDER Imager 3D Assay，您可以清晰地觀察形態以及可靠地計算細胞內部細節，例如視網膜中的單個細胞核分布。

THUNDER Imager 3D Assay 可為您提供以下優勢

• 立即去除模糊，幫助您觀察到更多細胞內部細節

• 通過寬視場方法獲得更大的可利用深度

• 可靠量化

• 可立即用于特定的工作流程分析

THUNDER Imager 3D Assay 配置

對照組瑞士成年小鼠全組織視網膜，顯示 Iba1 + 小膠質細胞（Alexa Fluor® 488 綠色熒光染色）和 Brn3a + 視網膜神經節細胞（Alexa Fluor® 594 紅色熒光染色）。 圖片由西班牙 Murcia 大學的實驗眼科學小組提供。

使用 THUNDER Imager 3D Cell Culture 進行大腦類器官可視化成像

作為新型模式系統，大腦類器官可用于研究人類大腦的發育和疾病。 這些自組裝式三維細胞結構通常通過多重轉基因標記物成像進行表征。 這些工作流程中的典型挑戰是及時量化分子動力學，同時保持生理條件并在低信號水平下依然能達到樣本深度。 因此，THUNDER Imager 3D Cell Culture 適合用于研究接近生理條件的類器官的發育，因為我們的 LED 光源有助于最大限度地減少光漂白。 此外，即使蛋白質信號水平低，也可以定時表達而無需改變樣本載體。

THUNDER Imager 3D Cell Culture 可為您提供以下優勢

• 可以觀察塑料底培養皿中的樣本，使您的工作流程更高效

• 能夠通過高量子效率（QE）相機檢測分子的低信號

• 采用寬視場方法和精確的定時 LED 照明，因此光漂白低，樣本擾動小

THUNDER Imager 3D Cell Culture 配置

長時間活細胞延時成像中的低光毒性

外植體細胞培養通常難以進行成像實驗，因為它們需要穩定的細胞培養環境和低光毒性的成像條件。 美國弗吉尼亞大學 Laura Shankman 博士的外植體細胞培養成像實例顯示了腹主動脈細胞如何在48小時內穩定成像。 THUNDER Imager Live Cell 為微創和活細胞準確成像實驗提供完整的顯微鏡成像系統。 憑借快速的高量子效率相機選項、準確的載物臺、可調 LED 光源、減少寬場圖像中離焦模糊現象的計算清除技術（Computational Clearing）以及易于使用的 LAS X 軟件進行自動成像和分析工作流程，可以高效地執行敏感的細胞培養實驗。

THUNDER Imager Live Cell 提供的優勢

• 可通過準確的活細胞成像實驗跟蹤細胞的快速運動

• 低光毒性可確保敏感的活細胞培養，即使在長時間實驗中也是如此

• 加快活細胞成像工作流程，實現自動化定量和分析

THUNDER Imager Live Cell 配置

培養一周的腹主動脈外植體，在凝膠覆蓋的#1.5腔室載玻片上48小時成像。 小鼠進行了平滑肌細胞特定表達的 tdtomato 的基因編碼。 轉錄后，平滑肌細胞去除 tdtomato，并開始表達 eGFP。

3D活細胞培養顯微成像系統優化生理條件 - 曝光量

對于 3D 細胞培養，遵循真正的生理學是獲得有意義結果的首要條件。通常情況下，您希望通過優化實驗條件，在細胞接近自然狀態時對其進行研究，即盡可能實現光強和最短曝光時間。

THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 憑借 LED 源滿足這些需求，該 LED 源具有針對激發光優化的小帶寬。靈敏的 sCMOS 攝像頭，擁有高達 82% 的量子效率，即使光線暗，曝光時間短，仍可傳輸重要的圖像信息。

為了進一步減少樣品曝光，照明限制為實際記錄時間。攝像頭快門與高速 (切換時間 20 µs) Lumencor LED 光源同步，減低光淬滅。

THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 以全電動 DMi8 顯微鏡、量子載物臺、高度靈敏的 DFC9000 GTC 攝像頭以及多譜線高光強的熒光 LED 光源為基礎， 經過優化，可對 3D 細胞培養物進行快速精確的多位置、多通道成像。

與活體流動保持一致速度來成像 – 細胞進程

活體代謝過程極快，尤其對于單細胞維度而言。如今大多數的活細胞成像實驗都是在高速成像系統上完成的。

THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 能夠一次完成全幀攝取，讓您體驗到高度靈敏、基于 sCMOS 攝像頭的熒光系統的強大實力。

結合其高度靈敏性，THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 可實現高達 90 幀/秒的數據攝取速度，助您觀察到快速的細胞活動。即使深入較厚的 3D 細胞團，它也能快速攝取清晰的圖像數據。得益于可快速切換的外部濾色片轉盤 (< 27 ms)，即使在多發射波長的實驗過程中，您也能始終掌握快速成像過程。

在觀察活細胞培養物的同時保持適當的環境

THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 具有將您的細胞保持接近自然狀態所需的一切功能。培養箱可為活細胞培養物確保理想的生理條件，例如，系統穩定性、濕度、溫度以及二氧化碳水平 (pH 值)。

憑借微型自動補水器，即使您正在進行長期實驗，也可以使用水浸物鏡執行多位置工作流程。水浸物鏡具有更高的光收集性能，使攝取的細胞圖像具有更高的對比度和分辨率。



輕松駕馭間歇攝取多位置實驗：追蹤細胞變化

THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 為您的 3D 活細胞培養多位置實驗兼顧速度與可靠性。例如，在追蹤球狀細胞團和類器官的成長和發育時，其速度和可靠性將助您獲得理想的結果。

得益于以下優勢，使用 THUNDER Imager 可完成準確的間歇攝取多位置實驗和細胞變化追蹤：

• 通過自適應調焦控制 (AFC) 實現可靠的 Z 軸偏移修正

• 軟件自動對焦，可補償樣品位置的變化

• 以高達 20 nm 的重復精度實現可精準重現的 Z-定位 (閉環對焦)

通過新的量子載物臺，在更短的時間內獲得更多數據信息。該載物臺無抖動，可快速準確地移動到所有位置 (例如，10 個位置/秒)，具有可重現性 (< ±0.25 µm)。

可靠的日常數據攝取

THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 能夠始終將焦點保持在活細胞上，實現可靠的圖像數據攝取。

由于漂移、形態變化或生長，活細胞成像通常十分棘手。漂移是由于振動、機械蠕變或溫度波動導致的。漂移和細胞變化都會降低所攝取圖像數據的可靠性，因為對焦是一個問題。但得益于自適應調焦控制 (AFC)、閉環對焦和軟件自動對焦功能，THUNDER Imager Live Cell 和 THUNDER Imager 3D Cell Culture 能夠為您的多孔實驗可靠地保持聚焦。



發育中的斑馬魚胰腺

THUNDER 3D Assay 成像系統能夠清楚地識別發育中的斑馬魚胰腺內的 α（綠色熒光蛋白）細胞和 β （mCardinal-red）細胞。

這個150層的Z軸層掃圖像分別由藍（Hoechst）、綠（GFP）、紅（mCardinal）通道成像，全部影像在一分鐘內完成。

通過最大限度減少光漂白、提供高性能成像和高通量數據，可以維持樣本內部的生理條件，從而提高工作流程的執行效率。


圖片由德國巴特瑙海姆的馬克斯普朗克心肺研究所的 Radhan Ramadass 和 Yu Hsuan 提供

成像以及操控細胞培養實驗

使用 Infinity Scanner 時，將 THUNDER 的非侵入性成像與光操控、FRAP、FRET 或消融技術結合。 使用 Infinity Scanner 靈活的矢量激光掃描系統控制所研究的細胞或其外部環境。

此處兩個視頻顯示 MDCK 細胞在 THUNDER 即時計算清除（Computational Clearing）前后的 mx1-GFP 表達。 使用 THUNDER，mx1 蛋白表達更加易于識別，并可通過 Infinity Scanner 被消融。

THUNDER Imager 3D Cell Culture 與 Infinity Scanner 結合可進行成像以及操控細胞培養實驗。
關于 Infinity Scanner 的更多信息

清晰、快速地進行敏感樣本成像

將 THUNDER 的離焦模糊去除功能與 TIRF 的優勢相結合。 對于細胞表面的動力學過程，全內反射熒光顯微鏡可提供出色的信號背景分離。

此處兩個視頻顯示用 GFP-GRINCH 表達人胰島素原的 ins-1 細胞。 在細胞培養中加入 KCL 后，產生胰島素的細胞去極化，可以觀察到殘留的胰島素與細胞質膜融合。

THUNDER Imager Live Cell 與 TIRF 相結合，能夠以出色的清晰度、速度和成像參數控制對敏感的樣本成像。