2*8cm/8*12cm/定制規(guī)格 乙酸纖維素薄膜
參考價 | ¥10.00-¥240.00 |
- 公司名稱 濰坊中科醫(yī)療設(shè)備有限公司
- 品牌其他品牌
- 型號2*8cm/8*12cm/定制規(guī)格
- 所在地濰坊市
- 廠商性質(zhì)代理商
- 更新時間2023/9/13 18:27:29
- 訪問次數(shù) 1658
規(guī)格1 | 88.00元 | 1000 件 可售 |
規(guī)格2 | 240.00元 | 1000 件 可售 |
規(guī)格3 | 10.00元 | 1000 件 可售 |
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
化學(xué)試劑,分析實(shí)驗(yàn)儀器,化驗(yàn)儀器,玻璃儀器,色譜試劑,生物試劑,實(shí)驗(yàn)臺,細(xì)胞培養(yǎng)瓶,生化培養(yǎng)箱,化工原料
產(chǎn)地類別 | 國產(chǎn) | 價格區(qū)間 | 面議 |
---|---|---|---|
儀器種類 | 國產(chǎn)設(shè)備 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要設(shè)備 | 電泳儀 | 規(guī)格1 | 2*8cm |
規(guī)格2 | 8*12cm | 規(guī)格3 | 定制尺寸 |
血清蛋白的醋酸纖維薄膜電泳生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>
學(xué)習(xí)醋酸纖維薄膜電泳的操作,了解電泳技術(shù)的一般原理。
二、實(shí)驗(yàn)原理
電泳是指帶電質(zhì)點(diǎn)在電場中向本身所帶電荷相反的電極移動的現(xiàn)象。在一定pH條件下,不同的質(zhì)點(diǎn)由于具有不同的等電點(diǎn)而帶不同性質(zhì)的電荷,因而在一定的電場中它們的移動方向和移動速度也不同,即它們的電泳遷移率不同,因此,可使它們分離 影響電泳遷移率的外界因素:電場強(qiáng)度、溶液的pH值、溶液的離子強(qiáng)度和電滲現(xiàn)象 影響電泳遷移率的內(nèi)在因素:質(zhì)點(diǎn)所帶凈電荷的量、質(zhì)點(diǎn)的大小和形狀 采用醋酸纖維薄膜作為支持物的電泳方法稱為醋酸纖維素薄膜電泳。醋酸纖維素薄膜電泳具有微量、快速、簡便、分辨力高,對樣品無拖尾和吸附現(xiàn)象等優(yōu)點(diǎn) 醋酸纖維素是纖維素的羥基乙酰化所形成的纖維素醋酸酯,將它溶于有機(jī)溶劑(如:丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等)后,涂抹成均勻的薄膜則成為醋酸纖維素薄膜。該膜具有均一的泡沫狀的結(jié)構(gòu),厚度約為120 μm,有很強(qiáng)的通透性,對分子移動阻力很小。
三、實(shí)驗(yàn)儀器
1、DYY-8C型常壓電泳儀:北京六一儀器廠生產(chǎn),1套/2組。
2.醋酸纖維薄膜(2 cm×8cm):2片/人。
3.培養(yǎng)皿:一排桌子(即4組)公用5套,包括平衡、染色各用一套,漂洗用3套。
4.點(diǎn)樣器:一個/組。
5.濾紙:公用。
6.玻璃板:一塊/組。
7.鑷子:一個/組。
8.玻棒:公用。
四、實(shí)驗(yàn)試劑
1.BBT緩沖液(pH8.6,離子強(qiáng)度0.07):BBT2.76g,BBTN15.45g,用蒸餾水定容至1000mL。
2.染色液:氨基黑10B 0.25g,用甲醇50mL、冰醋酸10mL、水40mL溶解(可重復(fù)使用)。
3.漂洗液:甲醇或乙醇45mL,冰醋酸5mL,水50mL,混勻。
4.人或動物血清:從醫(yī)院或自制,冰凍保存,現(xiàn)取現(xiàn)用。
五、實(shí)驗(yàn)過程
浸泡:將2×8 cm醋酸纖維薄膜迎著光辨別光澤面和無光澤面。將粗糙面朝上置于盛有緩沖液的平皿中,浸泡20min方可用于點(diǎn)樣
點(diǎn)樣:用鑷子取出浸透的薄膜,夾在兩層粗濾紙內(nèi)吸干多余的緩沖液,然后平鋪在玻璃板上(無光澤面朝上)。在另一載玻片上滴一滴血清,點(diǎn)樣器(用蓋玻片的一邊)在血清上蘸一下(可來回移動一次),再將點(diǎn)樣器輕印在加樣線上,使血清滲透到薄膜內(nèi),形成均勻的直線。
五、實(shí)驗(yàn)過程
電泳槽的準(zhǔn)備:根據(jù)電泳槽膜支架的寬度,裁剪尺寸合適的濾紙條。在兩個電極槽中,各倒入等體積的電泳緩沖液,在電泳槽的兩個膜支架,各放兩層濾紙條,使濾紙一端的長邊與支架前沿對齊,另一端浸入電泳緩沖液中。當(dāng)濾紙全部潤濕后,用玻璃棒輕輕擠壓在膜支架上的濾紙以驅(qū)趕氣泡,使濾紙的一端能緊貼在膜支架上,即為濾紙橋。
電泳:將點(diǎn)樣端的薄膜平貼在陰極電泳槽支架的濾紙橋上(點(diǎn)樣面朝下),另一端平貼在陽極支架上。蓋上電泳槽蓋,使薄膜平衡10 min。通電,調(diào)節(jié)電壓至160 V,電流強(qiáng)度為0.4~0.6 mA/cm膜寬度,電泳時間約25 min。
染色:電泳完畢后將薄膜取下, 放在含氨基黑10B染色液的培養(yǎng)皿中浸泡5 min。
漂洗:將薄膜從染色液中取出后移置漂洗液中漂洗數(shù)次,直至背景藍(lán)色脫盡,條帶清晰為止,可得到色帶清晰的電泳圖譜。
六、注意事項(xiàng)
保持薄膜清潔,務(wù)必戴上塑料手套,勿用手指接觸薄膜表面,以免油污或污物沾上,影響電泳結(jié)果。注意醋酸纖維膜的質(zhì)量,至少浸泡10分鐘,浸泡很久仍有大塊白色硬點(diǎn)者須棄之不用。加樣時一定要呈直線、垂直、分布均勻,這樣泳動的區(qū)帶整齊、不歪。以免影響蛋白質(zhì)區(qū)帶圖譜。電泳槽兩邊的緩沖液應(yīng)保持液面在同一水平面上,槽里的緩沖液要保持清潔。電泳電壓大小,時間長短與緩沖液的離子強(qiáng)度都有一定的關(guān)系。一般電流約0.4—0.6mA/cm,電壓110—160V 。