產品名稱：小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒說明書

我司提供的ELISA試劑盒經濟,實惠,可靠,完善,穩定的實驗體系,優秀的科研隊伍，準確可靠的實驗結果是您可靠的合作伙伴，凡購買我司的試劑盒產品都可提供全程免費技術指導。     產品保存：2~8℃、有效期6個月。
本公司ELISA試劑盒均為進口抗體對國內包被，100%保證產品質量與客戶實驗結果，出現任何質量問題或是客戶出不了實驗結果均可免費退換的！
規格：96T
庫存：現貨。
保質期：6個月。
用途：生產、科研實驗等領域科學研究。
運輸：快遞（根據客戶要求，選擇具體的運輸方式）。
保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。

規格：96T/48T

檢測范圍：0.937-60ng/mL

檢測限：0.41ng/mL

重復性：板內變異系數＜10%

板間變異系數＜15%

小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒

ELISA試劑盒使用說明書操作流程：
稀釋——加樣——溫育——配液——洗滌——加酶——溫育——洗滌——顯色——終止——測定
1.有質量問題免費包換，合同上注明了的（質量問題包括運輸不當，客戶在使用過程中測不出結果，等等！）
2.全程技術指導.（包括售前的標本收集，使用過程中不明白的地方，實驗結束后的數據分析，有任何疑問，我們技術都會即時給你去電）
3.提供免費代測的服務。（你只需把標本寄過來，我們為你節省時間，幫你出結果，原始數據，分析數據均可提供，一般時間是5天左右）
4.客戶有任何問題，我們都是在一個工作日之內給出解決方案。售后和技術這一塊都是竭誠為客戶服務！
為什么實驗過程中孵育、洗滌需要振蕩、如何振蕩。
振蕩孵育使反應更充分，振蕩洗滌使背景更干凈。建議使用酶標96孔微孔板振蕩器。
孵育過程振蕩，可以加快、加強抗原抗體分子間的相互碰撞接觸，使得反應過程更加*，OD值通常會比未振蕩孵育的結果要高；洗滌過程振蕩，可以使洗板更干凈，在很大程度上能降低背景值，同時可以提高試劑盒檢測的靈敏度，具體操作請參見說明書。

注意事項：
1．酶標板袋拆封后，盡快將不用的板孔放回，并放入干燥劑，保持酶標板干燥。
2．用戶在初次使用試劑盒時，應將試劑盒平衡至室溫，各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。
3，TMB A液避光保存。
4，洗板過程非常重要，不充分的洗板易導致假陽性。
5．建議所有標準品、樣本都做雙份檢測。
6．請保持試驗過程的連續性，禁止酶標板干燥，因干燥會使酶標板上的生物成分迅速失活。
7．為避免交叉污染，要避免重復使用手中的吸頭和試管。
8．禁止混用不同批次試劑盒內的試劑。
試驗所需自備物品:
1.酶標儀(450nm波長濾光片)
2.37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
3.自動洗板機
4.高精度移液器， EP管及一次性吸頭： 0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL 5.吸水紙
洗板方法： 手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的PBt或TBT洗滌緩沖液 至少 0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。
自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
樣品收集:
1.血清：全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應為一次性的無熱原，無內毒素試管。
2.血漿：抗凝劑推薦使用EDTA或肝素，樣品采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測。避免使用溶血，高血脂樣品。
3.組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4.細胞培養上清：取細胞培養上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質及細胞碎片。取上清檢測。
5.其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測
6.樣品應清澈透明，懸浮物應離心去除。
7.樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃(1個月內檢測)，或-80℃（6個月內檢測），避免反復凍融。
結果判斷:
1. 以標準品的濃度為橫坐標， OD值為縱坐標， 繪制標準曲線。 如有設置復孔，則應取其平均值計算。 以標準品的濃度為橫坐標， OD值為縱坐標，繪出標準曲線。亦可以OD值為橫坐標，標準品的濃度為縱坐標，繪出標準曲線。
2. 推薦使用專業的曲線制作軟件，如curve expert 1.3或1.4，在軟件界面既可根據樣品OD值，由標準曲線查出相應的濃度，乘以稀釋倍數；亦可將樣品的OD值代入標準曲線的擬合方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 1478. 若樣品OD值高于標準曲線上限，應適當稀釋后重測，計算濃度時應乘以稀釋倍數。

9.為什么有的試劑盒是采用競爭ELISA法？

小分子抗原或半抗原因為缺乏可作夾心法的兩個以上的位點，因此不能用雙抗體夾心法進行測定，可以采用競爭法。其原理是標本中的抗原和固相載體上的抗原競爭生物素化抗體上的結合位點，標本中抗原量含量愈多，結合在固相上的生物素化抗體愈少，高的顯色也愈淺，即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素等ELISA測定多用此法。