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服務流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
     Taq酶（2U/μl）            1μl
     DNA模板（50ng-1μg/μl）    1 μl
      加ddH2O至               50 μl
    視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
過氧化氫（hydrogen peroxide；H2O2）　KIFC1( Kinesin family member C1) 　1 Kit

羥自由基或氫氧基（hydroxyl radical；OH-）　KLF6 　100 ul

超氧自由基陰離子（superoxide radical；O2-）　KIFC3 　100 ul

過氧化基（peroxyl radical；ROO-）　KLF7 　100 ul

氫過氧自由基（hydroperoxyl；HOO）　KIN 　100 ul

氮氧基（nitric Oxide；NO-）　KLF15 　20 ul

次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）　Kindlin 2 　100 ul

過氧亞硝基陰離子（peroxynitrite anion；ONOO-）　KLF4 　20 ul

烷氧自由基（alcoxyl radical）　KIF19 　100 ul

Alkylperoxyl Radical: ROO.　KLF17 　100 ul

脂質氧化　KIF1C 　100 ul

β氧化　KIF22 　100 ul

核酸氧化　KIF20A 　100 ul

蛋白氧化　KIF1B 　20 ul

細菌氧化應激活性氧（ROS）比色法定量（羥自由基）　KIF26B 　100 ul

超氧化物歧化酶（SOD）活性　KIF2A 　1 Kit
轉基因品系油菜46A40染料法qPCR試劑盒Streptomyces│sp.分離基物: 沉積物/表層沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 生物活性微生物：抗菌活性譜:金黃色葡萄球菌 18 枯草芽孢桿菌 20 大腸埃希氏菌 -- 熒光假單胞菌 -- 白假絲酵母 -- 宛氏擬青霉 28培養基: 1002生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法

堪薩斯分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium kansasii提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法

Escherichia│coli提供形式: 凍結物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 作為原核表達系統研究基因表達的對照菌株。培養基: 33生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；定期移植法

Corynebacterium│glutamicum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產谷氨酸。培養基: CM0108生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Agrobacterium│tumefaciens提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 0032生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法；礦物油法；定期移植法

Citricoccus│alkalitolerans分離基物: 鹽堿土提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養基: CM0027+5%NaCl生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥

Sphingobacterium│sp.分離基物: 原料乳提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 可導致乳品蛋白變性培養基: CM0827生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Saccharothrix│sp.分離基物: 蘭李莖提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 雙功能酶抑制劑培養基: CM0027生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥

Candida│tropicalis分離基物: 生物樣/尖葉鹵蕨根提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 近海酵母培養基: 513生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法