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熒光定量PCR檢測技術(shù)服務(wù)-Taqman探針法

具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海基屹生物科技有限公司
  • 品牌
  • 型號
  • 產(chǎn)地 上海
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時間 2024/5/13 9:06:59
  • 訪問次數(shù) 7087

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上海基屹生物科技有限公司成立于2013年6月,位于上海周浦時代醫(yī)創(chuàng)園,是一家銳意進(jìn)取的生物高科技創(chuàng)新型企業(yè),集生物技術(shù)研發(fā)、支持和服務(wù)為一體,為生命科學(xué)領(lǐng)域的科研人員,臨床醫(yī)學(xué)人員等提供TA克隆,亞克隆,質(zhì)粒構(gòu)建,RNAi干擾,miRNA定量,熒光定量PCR,SNP分型,STR檢測,基因編輯,基因敲除,動物造模等相關(guān)的技術(shù)服務(wù)的同時,我們也在不斷摸索,積極研發(fā)自己的試劑產(chǎn)品,如分子,蛋白,細(xì)胞等方面的常規(guī)試劑,提供給我們的敬愛的科研工作者,并且我們與國內(nèi)外具有競爭力的耗材儀器廠家達(dá)成協(xié)議,保持長期穩(wěn)定的合作,秉承在技術(shù)方面提供支持的同時,也同樣提供國內(nèi)外優(yōu)質(zhì)的試劑,耗材,常規(guī)儀器、分析儀器,滿足客戶的不同需求,一站式的服務(wù)是我們經(jīng)營的理念,我們將不斷提高技術(shù)人員的技術(shù)水平,銷售人員的業(yè)務(wù)能力,圓滿完成技術(shù)服務(wù)項(xiàng)目及產(chǎn)品銷售,同時,并為廣大的科研工作者提供可靠的產(chǎn)品和全面的技術(shù)服務(wù),用我們過硬的技術(shù),優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品,完善的服務(wù)獲得每個客戶信任,支持和厚愛,最后感謝各位的支持和幫助。
公司技術(shù)平臺特色:
分子生物學(xué)技術(shù)服務(wù)項(xiàng)目包括
TA克隆,亞克隆;質(zhì)粒構(gòu)建,熒光定量PCR檢測;RNAi干擾;miRNA檢測;SNP分型;STR檢測等;文庫構(gòu)建;高通量測序。

蛋白組學(xué)技術(shù)服務(wù)項(xiàng)目包括:
蛋白抽提,蛋白純化,WB,Elisa,免疫組化,質(zhì)譜鑒定,N端測序等。

細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)項(xiàng)目包括:
細(xì)胞培養(yǎng),細(xì)胞轉(zhuǎn)染;慢病毒包裝;腺病毒包裝; 基因編輯;基因敲除;動物造模等;

代理銷售產(chǎn)品:

儀器類:移液器:Eppendorf移液器、吉爾森移液器,銳寧移液器,大龍移液器,寶予德移液器

離心機(jī):Eppendorf離心機(jī),盧湘儀離心機(jī),蜀科離心機(jī),安亭離心機(jī),ABSON迷你離心機(jī)

PCR儀:賽洛捷克PCR儀,ABI普通PCR儀、ABI 7500/ 7500Fast實(shí)時定量PCR儀

Bio-rad產(chǎn)品:凝膠成像系統(tǒng)、Bio-rad電源,Bio-rad電泳槽、Bio-rad轉(zhuǎn)移槽,玻璃板

箱體產(chǎn)品:一恒培養(yǎng)箱、一恒干燥箱,一恒恒溫?fù)u床,安泰超凈臺,中科美菱超低溫冰箱

試劑類:

gegenetech醫(yī)藥中間體全線產(chǎn)品:總代理

Abbkine全線產(chǎn)品:上海區(qū)域一級代理

MCE小分子抑制劑,激動劑全線產(chǎn)品:上海區(qū)域一級代理

Bioteke核酸提取及分子試劑全線產(chǎn)品:上海區(qū)域一級代理

Thermo scientific部分產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商

NEB全線產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商

耗材類:

Axygen全線產(chǎn)品:全國特約經(jīng)銷商

Corning全線產(chǎn)品:全國特約經(jīng)銷商

BD 耗材產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商

NEST耗材產(chǎn)品:上海區(qū)域特約經(jīng)銷商








分子,蛋白及細(xì)胞技術(shù)服務(wù),生物儀器,生物試劑,生物耗材

實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)(Real Time Quantitative PCR)

在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

相對定量應(yīng)用(Relative Quantification,RQ)    

 特異性熒光標(biāo)記:

 TaqMan法

 TaqMan探針的特性:

(1)5′端標(biāo)記有報告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等

(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)

(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光

(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針

相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。

相對定量分析方法  :

 2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
    ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test) 
    ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator) 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
         ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率:
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

服務(wù)流程:

步驟

客 戶 提 供

服 務(wù) 內(nèi) 容

基 屹 提 供

1

新鮮的且盡量多的材料;已知的全長基因序列;盡可能詳細(xì)的背景資料:DNA/ RNA來源、豐度等。

DNA/RNA提取,根據(jù)基因序列設(shè)計(jì)特異性的引物和熒光探針。

 

2

純化好的DNA/RNA(大于5 ug/樣品);已知的全長基因序列;盡可能詳細(xì)的背景資料:DNA/ RNA來源、豐度等。

根據(jù)基因序列設(shè)計(jì)特異性的引物和熒光探針。

 

3

 

以DNA為模板,對目的基因進(jìn)行熒光定量PCR檢測分析

提供完整的定量分析結(jié)果、實(shí)驗(yàn)熒光定量擴(kuò)增曲線及詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟。

注意:客戶可根據(jù)所能提供的起始材料不同,選擇從步驟1或2啟動項(xiàng)目。

       

 



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