巴氏染色液

包裝規(guī)格

單瓶包裝規(guī)格為100ml，250ml，500ml，1000ml、2.5L、5L；組合包裝包裝規(guī)格(A1液或A2液或A3液、B1液或B2液或B3液、C液)：100ml×3，250ml×3，500ml×3，1000ml×3、2.5L×3，5.0L×3。

預(yù)期用途 

適用于各種脫落細(xì)胞的形態(tài)觀察前的染色（涂片染色）。

 主要組成成份   

Harry’s蘇木精染液（A1液）：由蘇木素、乙醇等，通過Harry’s氧化法制得；

Mayer’s蘇木精染液（A2液）：由蘇木素、乙醇等，通過Mayer’s氧化法制得；

Ehrlich氏蘇木精染液（A3液）：由蘇木素、乙醇等，通過Ehrlich氏氧化法制得；

EA36染 液（B1液）： 由亮綠、伊紅Y等復(fù)配制得；

EA50染 液（B2液）： 由亮綠、伊紅Y等復(fù)配制得；

EA65染 液（B3液）： 由亮綠、伊紅Y等復(fù)配制得；

橘黃G染 液（C液）： 由橘黃G、乙醇等復(fù)配制得；

儲存條件及有效期

 有 效 期：原包裝未開封染色液的有效期為18個(gè)月，在有效期內(nèi)的已開封應(yīng)在開封后3個(gè)月內(nèi)使用完，每次用后及時(shí)擰緊瓶蓋，以免揮發(fā)或變質(zhì)。

   儲存條件：密封，陰涼、避光處保存。

樣本要求 

新鮮標(biāo)本離開人體涂片后，須盡快用固定液固定，以避免細(xì)胞變性。

染色方法

1. 將經(jīng)過固定液固定好的細(xì)胞涂片依次浸入80%、50%乙醇中各30 秒，水洗1～2分鐘，甩干；

2. 浸入蘇木精染液中3～5分鐘，水洗1～2分鐘，甩干；

3. 浸入鹽酸酒精分化液中分化數(shù)秒，水洗1～2分鐘，甩干；

4. 自來水沖洗返藍(lán)5-10分鐘，或浸入返藍(lán)液中數(shù)秒進(jìn)行返藍(lán)可使細(xì)胞核著色更鮮艷，然后水洗1～2分鐘，甩干；

5. 依次置于50%乙醇、80%乙醇中各漂洗脫水30秒，然后置于95%乙醇中脫水2分鐘，甩干；

6. 浸入橘黃G染液中染3～10秒；95％乙醇、95％乙醇中漂洗各10～20秒；

7. 浸入EA36染液(或EA50染液或EA65染液)中染色2～5分鐘，95％乙醇、95％乙醇中漂洗各10～20秒；無水乙醇脫水。

8. 二甲苯（或環(huán)保透明液）中透明2分鐘；

9. 中性樹膠封固，鏡檢。

染色結(jié)果 

上皮細(xì)胞：胞核呈紫藍(lán)色，核仁紅色；胞質(zhì)染色隨分化程度和細(xì)胞類型不同可染成藍(lán)綠色、粉紅色或桔黃色；紅細(xì)胞：鮮紅色或橙紅色；白細(xì)胞：胞核藍(lán)紫色，胞質(zhì)淡藍(lán)或淡綠色；粘液：淡藍(lán)或粉紅色。

檢驗(yàn)方法的局限性 

僅供細(xì)胞和組織形態(tài)學(xué)觀察染色用。

注意事項(xiàng)

1.使用場所應(yīng)通風(fēng)；不小心濺到手上、臉部或眼睛應(yīng)及時(shí)用自來水沖洗；

2.涂片厚薄適宜，固定后方可染色；固定液中的乙醇濃度過高會(huì)導(dǎo)致染色過深，固定液中的乙醇濃度過低會(huì)導(dǎo)致染色偏淡，乙醇應(yīng)控制在90%～95％之間；

3. 蘇木精染液上有一層金屬膜、下有少許結(jié)晶沉淀屬正?，F(xiàn)象，可過濾處理或取上清液；染色數(shù)量達(dá)2000～3000張玻片后應(yīng)更換新的染液；蘇木精的染色時(shí)間隨氣溫和染液情況而改變；染液以覆蓋涂片為宜，過少因蒸發(fā)導(dǎo)致染料沉淀；

4. 鹽酸酒精分化可分化掉胞漿上沾上的蘇木素，因此時(shí)間不宜長，但如果分化不夠，會(huì)造成細(xì)胞核顏色過深或（及）胞漿難上色；分化后立即用自來水沖洗，不宜久置，否則可使全部顏色消失；

5. 返藍(lán)亦稱堿化，返藍(lán)時(shí)間偏短則著色不充分，影響染色效果，每缸返藍(lán)液過500張玻片應(yīng)更新；

6. 橘黃G染色時(shí)間不宜過長（不超過10秒），然后漂洗要充分（載玻片沖洗液不見黃色為宜），否則EA50或EA36不易上色；每缸橘黃過5000張玻片應(yīng)更新；

7.  EA50或EA36使用前要充分?jǐn)嚢瑁旧^程中提拿、旋轉(zhuǎn)染色架數(shù)次。每缸過2000張玻片應(yīng)更新；

8. 技術(shù)人員操作要流暢，動(dòng)作干凈利落，不可把上一缸染色液帶入下一缸，每缸交替時(shí)要甩干玻片上殘存液體。

9. 細(xì)胞漿著色不佳應(yīng)考慮的因素

9.1 如果全片內(nèi)胞漿都淡染，則需延長染色時(shí)間或更換新液；

9.2 如果胞漿不分色或均為淺紅色，適當(dāng)增加染色時(shí)間能夠部分糾正不分色狀況；

9.3 胞漿染成灰色或紫色是由于蘇木素染色時(shí)間過長或鹽酸酒精分化不佳，經(jīng)過褪色后重新蘇木素染色可以糾正；

9.4 由于標(biāo)本的不同，同樣配方的EA染液可造成偏藍(lán)、偏綠和偏紅，對不同的標(biāo)本應(yīng)使用不同的EA染液，一般認(rèn)為：EA36和EA50較適用于婦科標(biāo)本，而EA65或改良EA較適用于非婦科標(biāo)本；

9.5胞漿不分色的另一重要原因是由于EA染液的pH值不恰當(dāng)所致。如染色為紅色，可加少許磷鎢酸溶液糾正；如染色均為藍(lán)色或綠色，可加少許飽和*溶液糾正。對于改良EA染液，每100ml染液加入2ml冰醋酸后染色效果更佳，染液使用更持久。

10. 細(xì)胞核著色不佳應(yīng)考慮的因素

10.1細(xì)胞核著色過淺

鹽酸分化時(shí)間過長或蘇木精染色液使用時(shí)間過短，需要縮短分化時(shí)間或延長堿化時(shí)間；蘇木精染色液缸中每日加入少量新鮮蘇木精染液；

10.2細(xì)胞核著色過深

鹽酸分化中鹽酸溶液濃度不夠，適當(dāng)加入幾滴鹽酸以增加濃度；返藍(lán)時(shí)間過長，則可縮短返藍(lán)時(shí)間或用水充分漂洗