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支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒（含Taq酶）
Venor® Gem Classic
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 價格 |
11-1025G | 支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒（含Taq酶） Venor® Gem Classic | 25次/盒 | 詢價 |
11-1050G | 50次/盒 | 詢價 | |
11-1100G | 100次/盒 | 詢價 | |
11-1250G | 250次/盒 | 詢價 |
特點
1.內(nèi)控對照為獨立包裝，遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。
2.高特異性，僅一條陽性對照條帶，即可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種。操作簡單，
易于觀察。
3. 高靈敏度，若PCR反應體系加入10μl樣本，支原體檢測限度為≤5或≤10CFU。
(詳見下文“(2)Venor® Gem Classic Kit 10種常見支原體檢測限“)
4.歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無膽甾原體和85種支原體，與細菌和真核DNA無交叉反應。
5.試劑盒內(nèi)包含Taq酶，無需另外購買。
Venor® Gem Classic Kit
10種常見支原體檢測限
物種 | 檢測限 | 物種 | 檢測限 |
萊氏無膽甾原體 | ≤5 | 肺炎支原體 | ≤10 |
豬鼻支原體 | ≤10 | 精氨酸支原體 | ≤10 |
發(fā)酵支原體 | ≤10 | 雞敗血支原體 | ≤10 |
口腔支原體 | ≤10 | 螺原體 | ≤10 |
關節(jié)液支原體 | ≤10 | 唾液支原體 | ≤10 |
操作步驟
第1步：樣本處理
a. 細胞培養(yǎng)上清
b. 生物藥或需遵循藥典的樣本
說明：①樣品基質(zhì)可能會影響檢測的靈敏度。收集和篩選更高的樣品量可提高測定靈敏度。
②細胞培養(yǎng)物樣本含豐富的DNA酶，在低溫下也能降解支原DNA，影響檢測靈敏度。
建議：樣本做DNA抽提處理，實現(xiàn)高靈敏度。
推薦：德國MB公司生產(chǎn)的支原體DNA提取試劑盒Venor® Gem Sample Preparation Kit該DNA抽提試劑盒已經(jīng)過廣泛驗證。
第2步：試劑制備
第3步：PCR體系建立
a. 細胞培養(yǎng)上清
b. 生物藥或需遵循藥典的樣本
第4步：啟動PCR反應
第5步：電泳結果分析
191bp為內(nèi)控對照條帶，表明PCR反應正常。
當樣本存在支原體污染時，由于內(nèi)控對照與支原體DNA存在競爭，內(nèi)控對照條帶變?nèi)酰ɡ缰гwDNA＞103拷貝）。
陽性對照中支原體DNA＞104拷貝，內(nèi)控對照條帶會*消失。
可能在80-90bp存在引物自退火形成的條帶，此條帶不影響檢測結果。
如果待測樣本對PCR產(chǎn)生抑制，則內(nèi)控對照條帶變?nèi)酰ê完幮詫φ障啾龋藭r應先進行DNA抽提（推薦使用：Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原體DNA抽提試劑盒，詳見第25頁），然后再檢測。
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