磷酸化修飾蛋白質組學分析技術平臺首次搭建 突破研究瓶頸
【化工儀器網 項目成果】近日，廣東省農業科學院農業生物基因研究中心聯合加拿大約克大學、德國馬普分子植物生理研究所的研究團隊在Green Chemistry雜志發表一項研究成果。該團隊首次搭建全自動在線磷酸化蛋白質組學分析技術平臺，解決了磷酸化蛋白質組學研究的一大瓶頸。
蛋白質的磷酸化修飾是目前已知分布最為廣泛的翻譯后修飾。據估計，真核生物中有將近1/3的蛋白，能夠在任何時候被磷酸化。磷酸化修飾在許多生物過程中起著至關重要的作用，目前已知的作用包括但不限于調控細胞膜功能、調控細胞內信號轉導、調控轉錄過程、調控線粒體功能與能量代謝等。因此，磷蛋白和磷酸化位點的整體表征將有助于我們全面了解胞內代謝調控的分子機制。
液相色譜與串聯質譜聯用 (LC-MS/MS) 由于其高靈敏度和高通量能力，已成為綜合蛋白質組表征的強大工具。然而，由于磷酸肽豐度低、電離效率低以及非磷酸肽的信號抑制，通過 LC-MS/MS 直接表征全細胞消化物中的磷酸肽通常是不切實際的。因此，在當前的磷酸化蛋白質組學中，質譜 (MS) 分析之前的靶向富集是必不可少的。
目前，已經開發了多種用于磷酸肽富集的材料，但這些通常涉及復雜的制造過程和高化學品消耗。此外，磷酸肽的富集是離線的，需要多個手動步驟，從而使其成為一個繁瑣的工作流程，有機溶劑和塑料耗材的消耗量很大。隨著磷酸化蛋白質組學向大規模任務的發展，迫切需要開發一種分析性能優異的策略，同時滿足低試劑和耗材消耗的要求。
為解決這一問題，研究團隊合成了一種新型的可重復使用的磷酸化捕獲柱，用于在線富集磷酸肽，并進一步將其與商業nanoLC-MS/MS系統集成，建立了一個低成本、低浪費的自動化在線分析平臺。在軟件控制下，該平臺可自動連續富集和分析一批生物樣品中的磷酸肽，無需操作員干預。
它不僅獲得了高磷酸位點覆蓋率和重現性的結果，而且在表征具有不同磷酸化狀態的肽方面表現出色，從而促進了新磷酸位點的發現。更重要的是，可重復使用的pho-trap柱和納流裝置中的在線富集極大地有助于減少耗材、溶劑的消耗并節省磷酸化蛋白質組學研究中的勞動力。
研究人員表示，隨著磷酸化蛋白質組學向大規模研究的發展和低碳經濟的到來，這種用于磷酸化蛋白質組分析的自動化在線平臺有望在未來推動蛋白質磷酸化的研究。
(資料來源：中國科學報 )
關注本網官方微信 隨時閱讀專業資訊
- 珀金埃爾默之夜：共慶輝煌成就，展望科技未來 2024-11-22 08:50:40
- 11月19日晚，上海浦東嘉里大酒店燈火輝煌，一場匯聚了專家學者與業界精英的盛會——“珀金埃爾默之夜”在此盛大舉行。
- 預算652萬 紹興第二醫院采購醫療設備 2024-11-20 09:43:00
- 近日，紹興第二醫院醫共體總院就“紹興第二醫院醫療設備采購”項目發布公開招標公告，預算金額為652萬元。
- 上海大學液相色譜質譜聯用儀中標結果公告 2024-11-19 10:53:12
- 項目名稱：液相色譜質譜聯用儀，項目編號：0834-2441SH24A482，招標范圍：液相色譜質譜聯用儀 1套，招標機構：上海中招招標有限公司，招標人：上海大學
- 預算618.2萬 上海海關采購實驗室儀器設備 2024-11-19 08:46:24
- 近日，上海海關就“上海海關工業品與原材料檢測技術中心儀器設備更新項目”發布兩則公開招標公告，預算金額共計618.2萬元
- 第九屆中國分析儀器學術大會盛大開幕，共繪“下一代分析儀器”宏 2024-11-16 08:09:46
- 11月15日，第九屆中國分析儀器學術大會（ACAIC 2024）在廣東省深圳市登喜路國際大酒店國際廳盛大舉行，以“下一代分析儀器”為主題，匯聚了來自全國各地的300位科技精英、產業領袖、高校學者及企業代表，共同探討分析儀器的未來發展趨勢與技術創新路徑。
版權與免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其它來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點或和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。
