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Hypersep固相萃取柱的反相/極性保留效應：
分析物性質----極性、不帶電的化合物----也可以保留一些離子化的/帶電的化合物
樣品預處理/上樣（極性化合物、水溶液）----如果需要進行定量，需要在樣品中加入內標物。上樣方法可以根據需要進行優化，可通過（離心或過濾）除去顆粒物，和/或使用水或緩沖液稀釋粘性的樣品基質，使用緩沖液時，需要進行一些實驗確定*pH值。
柱平衡----先用2~5倍柱體積的強洗脫溶劑沖洗，再用2~5倍柱體積水沖洗。
柱清洗----水或者弱洗脫溶劑能夠洗脫吸附在填料上的多數干擾物質，而不造成分析物損失。PH值會極大地影響純化效果和/或者回收率
洗脫----使用強洗脫溶劑來洗脫感興趣的分析物，在洗脫溶劑中加入0.1%TFA可增加溶劑對極性分析物的洗脫能力。(洗脫強度取決于分析物的性質。)
Hypersep固相萃取柱應用 ：
飲用水和生態水種去除強極性的水溶性的微污染物
采用有機溶劑含量高的吸脫劑進行快速萃取濃縮
離子型的、可離子化的和強極性化合物，包括殺蟲劑和藥物代謝物
從水性樣本中萃取出強極性化合物
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