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免疫印跡（western blot）技術(shù)服務(wù)

◇樣本制備

1. 懸浮細(xì)胞：取大約 1×10⁷個細(xì)胞，低速離心收集，棄去培養(yǎng)液，加入1ml PBS懸浮細(xì)胞，轉(zhuǎn)入小離心管中，低速離心沉淀細(xì)胞，棄去PBS，放入-70℃冰箱保存。

2. 貼壁細(xì)胞：取大約1×10⁷個貼壁細(xì)胞，胰酶消化后加入PBS懸浮細(xì)胞，轉(zhuǎn)入小離心管中，低速離心沉淀細(xì)胞，棄去PBS，放入-70℃冰箱保存。

3. 組織：采集新鮮組織（注意：生物體死亡后10分鐘內(nèi)取材料并保存好），組織塊以PBS或生理鹽水清洗干凈，切為小塊，放入-70℃冰箱中保存。

樣本量：組織樣本，質(zhì)量大于100mg；細(xì)胞樣本，細(xì)胞數(shù)大于1×10⁶；

◇蛋白質(zhì)抽提：

實驗對象為組織樣品，取適量（250~500mg）新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品，加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑（或核蛋白抽提試劑），勻漿后抽提總蛋白（或核蛋白）。實驗對象為細(xì)胞樣品（細(xì)胞培養(yǎng)），每份樣品取1×10⁶～1×10⁷細(xì)胞，PBS清洗細(xì)胞，去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑（或核蛋白抽提試劑）抽提總蛋白（或核蛋白）。標(biāo)本也可交給我們處理，組織標(biāo)本每個10元，核蛋白或膜蛋白每個30元。

◇收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

每張膜上做一種目的蛋白和相應(yīng)的內(nèi)參蛋白。每張膜上可以做8個樣品。每張膜的費(fèi)用是：800元。一抗另計，抗體為進(jìn)口單克隆抗體，我公司可代購，其它試劑免費(fèi)。