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人外周血PBMC的CD4+ T細胞磁珠分選及流式鑒定2025/05/27

一、人外周血單個核細胞（PBMC）的分離1.3ml抗凝血加入3ml1×PBS進行稀釋。2.在15ml離心管內加入3ml淋巴細胞分離液，再在液面上方平鋪3ml稀釋過的抗凝血，常溫下，水平離心機600g，離心30min。3.吸取中間白膜層細胞，加入15ml離心管中，再加入10ml1×PBS混勻，常溫下，1000rpm，離心10min，棄上清，每管加入2mlMACS緩沖液重懸細胞并計數，調整細胞數量，每個樣本不超過107個細胞。4.2000rpm，離心3min，棄上清。二、磁珠分選1.每管加入40ul

小鼠過敏性鼻炎模型2025/05/26

1.6-8周齡雄性BALB/c小鼠；2.致敏階段：在第1、8和15天，通過腹腔注射300ul的混合液，其中包含50ugOVA和1mg氫氧化鋁溶于PBS中。3.激發階段：在第22天，開始鼻內激發。使用10mg/mL的OVA溶液，每側鼻孔滴入20μL，每天1次，連續激發7天。4.行為學評估：①撓鼻②打噴嚏③清水樣涕5.鼻粘膜的HE染色，有炎性細胞侵潤。上海達為科生物科技有限公司，位于上海長江軟件園，公司目前具備較好的生物學、醫學技術服務平臺，能夠為廣大客戶提供醫學科研樣本檢測、合作研究、開發及生產服

北京大學人民醫院胃腸外科團隊發現CTSD N-糖基化修飾影響結直腸癌肝轉移2025/05/19

研究背景：結直腸癌是全球五大致命癌癥之一，在中國是第二大常見惡性腫瘤。肝轉移是患者預后不良的主要原因，25%的患者初診時已有肝轉移，術后15%-25%因肝轉移復發，90%的肝轉移患者無法獲得有效治療，IV期患者5年生存率僅24%。N-糖基化修飾在蛋白質的多種功能中起關鍵作用，且與惡性腫瘤轉移相關，但目前關于結直腸癌肝轉移相關的N-糖基化蛋白質組學研究較少。研究方法：收集14例結直腸癌肝轉移患者的原發性病灶和配對肝轉移病灶樣本，經處理后進行液相色譜-質譜（LC-MS）分析。對多種細胞系進行培養，構

棕櫚酰化調控 TNF 通路中的 RIPK1 激酶活性和細胞毒性2025/04/29

腫瘤壞死因子（TNF）是一種促炎細胞因子，對維持組織穩態至關重要。它通過與TNF受體1（TNFR1）結合，激活炎癥相關基因轉錄，調控絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）和核因子κB（NF-κB）通路，從而引發炎癥反應。不過，TNF引發的細胞凋亡和壞死性凋亡也可能導致多種炎癥性疾病。受體相互作用絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶1（RIPK1）是TNF信號通路中的關鍵節點，它能協調細胞的生存與死亡。RIPK1的支架功能可誘導炎癥和細胞存活，而其激酶功能則與凋亡和壞死性凋亡相關。近日，中國科學院上海有機化學研究所生物

核糖基化調控胚胎發育速度2025/04/29

一、研究背景：胚胎發育中的“糖密碼”在生物學領域，蛋白質功能受多種化學修飾調節，其中糖基化修飾備受關注。不同于復雜的細胞外糖鏈，O-GlcNAc（O-連接的N-乙酰葡萄糖胺）作為一種可逆的單糖修飾，廣泛存在于RNA聚合酶II、轉錄因子等關鍵蛋白上，以及在細胞內數千種蛋白質上發揮作用，涉及從糖酵解至細胞周期、轉錄及翻譯等眾多基礎細胞活動，可能介導基因表達對環境變化的響應。哺乳動物早期胚胎發育階段，會經歷諸多代謝變化且依賴O-GlcNAc修飾相關酶存活。此前研究發現，負責添加O-GlcNAc的酶OG

乳酸化修飾調控cGAS促進腫瘤生長2025/04/25

乳酸是糖酵解的最終產物，作為碳源和信號分子，為腫瘤發展提供代謝、微環境和免疫基礎。最近，乳酸被重新定義為表觀遺傳學的標志，通過組蛋白修飾實現免疫重塑和腫瘤進展。然而，大多數非表觀遺傳蛋白的乳酸化及其功能尚未被充分研究。先天免疫系統通過多個模塊組成的信號級聯反應來響應入侵或細胞損傷。乳酸通過直接與MAVS結合抑制RLR信號轉導，但乳酸對先天免疫反應的胞質DNA感應的影響尚不清楚。cGAS被鑒定為感知胞質DNA并觸發先天免疫反應的關鍵酶，其活性和蛋白穩定性受翻譯后修飾的調節。泛素-蛋白酶體系統（UP

復旦放射醫學研究所團隊最新發文，揭示IFI16在GBM放射抗性中的作用機制2025/04/25

?研究背景膠質母細胞瘤（Glioblastomamultiforme,GBM）是一種高度侵襲性的WHOIV級腦部惡性腫瘤。近年來的研究表明，膠質瘤在治療過程中可能表現出從新生腫瘤到老化腫瘤的演變趨勢，提示細胞衰老可能在GBM治療中發揮作用。然而，細胞衰老在腫瘤中的作用復雜，一方面可能抑制腫瘤，另一方面可能通過衰老相關分泌表型（SASP）促進腫瘤復發和抗藥性。細胞衰老（Senescence）是一種細胞周期停滯狀態，通常被認為具有抗腫瘤作用。然而，越來越多的證據表明，放療和化療可能誘導腫瘤中衰老細胞

乳腺癌治療新靶點——CLDN6與鐵死亡的“愛恨糾葛”2025/04/17

研究背景鐵死亡（Ferroptosis）是一種由鐵依賴性脂質過氧化驅動的調節性細胞死亡形式，近年來被證實與多種疾病的發生發展密切相關，特別是在腫瘤領域。鐵死亡的調控涉及多個因素，其中NRF2是一個關鍵的轉錄共激活因子，通過調控其靶基因（如GPX4）來抑制鐵死亡。此外，CLDN6（緊密連接蛋白6）作為一種重要的腫瘤抑制因子，在乳腺癌中的表達下調，且與鐵死亡的關聯尚未明確。本研究旨在深入探討CLDN6與鐵死亡之間的聯系，并揭示其在乳腺癌中的潛在調控機制，以期為乳腺癌的預后預測和治療提供新的視角和靶點

什么是泛素化修飾？2025/04/17

真核細胞中的蛋白質翻譯加工主要有兩條途徑，一條是信號肽引導的內質網-高爾基體途徑，即分泌途徑，另一條是游離核糖體途徑。前者包括分泌蛋白、膜蛋白和溶酶體蛋白，后者主要是胞漿蛋白、核蛋白和一些細胞器蛋白。分泌途徑的翻譯主要在內質網完成，而另一條途徑是在游離核糖體上完成翻譯，然后被特異定位標簽引導進入線粒體、葉綠體、過氧化物酶體及細胞核等處，沒有標簽的就留在胞漿。2004年諾貝爾化學獎頒發給以兩名色列和一名美國科學家，以表彰他們發現了泛素調節的蛋白質降解，從此拉開了研究生物體泛素化修飾的序幕；泛素（U

小鼠腸組織瑞士卷標本制備2025/04/17

瑞士卷技術有助于完整的腸或結腸切片進行組織學評估，區分腸道結構特征；進而定量測量腸道炎癥和腫瘤。這種技術非常適合于綜合評估腸上皮的組織病理學和分子特征。1.麻醉C57BL/6小鼠。2.切開腹部皮膚和肌肉，暴露腹腔。3.鑒定盲腸和回腸，在盲腸上部取回腸一段，確認好遠側端和近側端。4.剪開回腸，用蘸生理鹽水的棉簽去除腸內容物。5.用眼科鑷，從回腸的遠側端向近側端折疊。6.用4號針頭固定折疊后的回腸。7.折疊后的回腸放到4%多聚甲醛固定液中。8.24h后，用自動脫水機脫水，然后石蠟包埋，切片。9.HE

表觀轉錄因子 PCIF1 調控 CD8+ T 細胞鐵死亡與激活2025/04/01

《TheepitranscriptionalfactorPCIF1orchestratesCD8+Tcellferroptosisａndactivationtocontrolantitumorimmunity》是2025年發表在《NatureImmunology》上的一篇文章，PCIF1是一種表觀轉錄因子，通過調控RNA的m6Am修飾，在CD8+T細胞的抗腫瘤免疫反應中發揮關鍵作用。研究發現，PCIF1在CD8+T細胞中具有抑制性作用，其缺失能夠增強T細胞的抗腫瘤活性，從而提高免疫治療的效果。一

肝臟再生新突破！科學家發現巨噬細胞的“秘密wu器”——谷氨酸2025/04/01

【研究背景：肝臟再生的“謎題”】肝臟是人體wei一具有強大再生能力的器官，即使切除70%，也能在幾周內恢復如初。但這一過程如何精準調控？哪些細胞和分子在幕后“指揮”？長期以來，科學界對肝臟再生的機制存在爭議。傳統觀點認為，肝臟中的“干細胞樣”細胞（如中央靜脈周圍的zone3肝細胞）是再生的主力軍。但最新研究發現，中央靜脈附近的肝細胞通過釋放谷氨酸，竟然能遠程“指揮”另一種免疫細胞——巨噬細胞，成為肝臟修復的“核心引擎”。這項研究由西班牙國立癌癥研究中心團隊完成，成果發表于《自然》雜志。【研究方法

大鼠卵母細胞的采集及發育分型2025/04/01

大鼠超排可以用于研究環境污染物或藥物對生殖系統的毒性影響；通過誘導超排并觀察卵母細胞和胚胎的發育情況，可以評估潛在的生殖毒性。大鼠卵母細胞的發育過程可以分為3個階段：GV期、MI期、MⅡ期。方法1.雌性SD大鼠，腹腔注射PMSG60IU，注射PMSG46-48h后，腹腔注射hCG20IU，誘導超排。2.準備卵母細胞培養滴：在60mm培養皿內做若干水滴狀的滴，并用礦物油覆蓋，放入培養箱（37℃、5%CO2）平衡4h以上（推薦過夜平衡）。3.卵母細胞采集的時間通常在SD大鼠注射hCG后13-16h內

大鼠股骨、脛骨、腓骨的剝離方法2025/03/28

大鼠股骨、脛骨和腓骨的剝離在生物醫學研究中具有廣泛的應用領域，如用于分離骨髓間充質干細胞（BMSCs），這些細胞在組織工程和再生醫學中具有重要應用。以下是詳細的剝離方法。1.將大鼠腹腔注射戊ba比妥鈉進行麻醉，確保大鼠wan全失去反應。2.將麻醉后的大鼠固定在手術板上，四肢用膠帶固定，腹部向上。3.用碘伏棉球擦拭大鼠后肢，確保手術區域無菌。4.皮膚切開，使用手術剪刀從踝關節上方約1cm處開始，沿后肢外側向上剪開皮膚，直至股骨頭。5.肌肉分離，從踝關節處逐步分離附著在脛骨和腓骨上的肌肉。6.wan

細胞“自噬”的新秘鑰：看“棕櫚酰化”如何解鎖自噬體形成的奧秘2025/03/21

研究背景自噬是細胞內一種通過雙層膜結構的自噬體包裹并降解細胞質成分（如錯誤折疊蛋白、損傷細胞器和入侵微生物）的降解途徑，對維持細胞穩態、細胞發育、免疫反應和細胞死亡至關重要，其失調與癌癥、糖尿病和神經退行性疾病相關。自噬體的形成由ATG蛋白調控，其中ATG16L1是關鍵蛋白，它與ATG12-ATG5結合形成復合物，催化LC3脂化，促進自噬體形成，并參與細胞內細菌隔離、線粒體自噬及炎癥調節。S-棕櫚酰化是一種可逆的翻譯后修飾，通過在半胱氨酸殘基上添加棕櫚酰基團，影響蛋白質相互作用和膜結合，調節細胞

大鼠腦組織、松果體、垂體、海馬的取材 及注意事項2025/03/19

1.續第四集，取腦組織。2.碘伏消毒。3.沿顱后與頸椎之間斷頭，沿顱頂正中切開頭皮去除軟組織。用止血鉗自枕骨大孔處逐步去除顱頂骨，充分暴露腦組織。4.小心去除腦膜，暴露松果體。5.松果體位于兩大腦半球和小腦之間，是一個發紅或黃褐色的卵圓形小體。6.用鑷子輕輕撥動嗅球及大腦半球的邊緣，小心地將其從顱腔中取出。7.垂體為卵圓形小體，與垂體窩結合緊密，用頭端鈍圓的細鑷小心分離。8.海馬位于大腦的顳葉內側，是邊緣系統的重要組成部分，屬于海馬結構。海馬位于側腦室下角的內側壁，外形類似海馬狀的隆起。9.海馬

大鼠膀胱和前列腺的取材及注意事項2025/03/19

1.續第三集，繼續腹腔取材。2.暴露腹腔的下部，膀胱通常位于腹腔的正中線位置，緊貼腹壁的后側，呈囊狀結構。4.膀胱的后方與生殖器官（如子宮或精囊腺）相鄰，下方與尿道相連。5.雄性大鼠的膀胱后方與精囊腺和前列腺相鄰。6.用鑷子提起膀胱，讓膀胱、尿道、精囊腺、前列腺一體與周邊組織分離。7.夾住膀胱，去掉結締組織和精囊腺。8.向下找到膀胱和尿道連接處剪斷。9.夾住尿道，往下擼前列腺后葉，最后貼住尿道根部剪除尿道。10.剩下的是前列腺，蝴蝶狀。上海達為科生物有限公司，深耕生命科學領域。我們憑借前沿技術、

達為科生物活體成像技術2025/03/15

服務領域癌癥與抗癌藥物研究；免疫學與干細胞研究；細胞凋亡；病理機制及病毒研究；基因表達和蛋白質之間相互作用；轉基因動物模型的構建；腫瘤研究；新藥研發及藥效評價等。服務流程1.將小動物裝籠運輸到我公司或者由我們公司提供實驗動物，并按照用戶要求注射相應的標記發光系統的藥物、細胞以及慢病毒注射到小動物體內；2.根據客戶要求對小動物進行活體成像，或者根據要求將具體的組織器官取出，體外進行成像。其它技術服務1.熒光素酶或熒光報告基團標記質粒的構建、擴增及轉染；2.熒光素酶或熒光報告基團標記質粒轉染成功與否

最新報道揭示M5C甲基化調控糖酵解在調控肝癌進展中的新機制2025/03/15

RNA修飾在生命過程和疾病發生發展中的作用逐漸受到重視，其中5-甲基胞嘧啶（m5C）修飾是熱門研究領域。本文聚焦于m5C甲基轉移酶NSUN2在肝癌中的作用，NSUN2通過M5C修飾穩定PKM2mRNA促進肝癌糖酵解和進展。m5C修飾是指在RNA分子中，通過特定的酶將胞嘧啶（C）的第5位碳原子上加上一個甲基基團，形成5-甲基胞嘧啶。這種修飾不會改變RNA的基本核苷酸序列，但會在不改變遺傳信息編碼的基礎上，賦予RNA新的化學和生物學特性。m5C修飾主要由NSUN（NOL1/NOP2/SUN）家族的甲

“棕櫚酰化”與“鐵死亡”強強聯手，讓膠質瘤“死個明白”！2025/03/05

研究背景棕櫚酰化（Palmitoylation）是一種關鍵的翻譯后修飾，通過將棕櫚酸共價連接到蛋白質的半胱氨酸殘基上，調節蛋白質的穩定性、亞細胞定位和功能。這一修飾由棕櫚酰基轉移酶（PATs，如ZDHHC家族酶）催化，是可逆的，可通過酰基蛋白硫酯酶（APT1和APT2）去除。棕櫚酰化在細胞信號傳導、代謝調控和細胞間相互作用中發揮重要作用，尤其在癌癥中，通過調節癌蛋白的活性和穩定性，促進腫瘤發生、發展和耐藥性。鐵死亡（Ferroptosis）是一種鐵依賴性的程序性細胞死亡形式，由脂質過氧化物的積累