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2019
06-05

小鼠原代海馬神經(jīng)元細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法
海馬體主要負(fù)責(zé)記憶和學(xué)習(xí)，日常生活中的短期記憶都儲存在海馬體中。神經(jīng)元是構(gòu)成神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。神經(jīng)元具有長突起，由細(xì)胞體和細(xì)胞突起構(gòu)成。小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的組織來源于實(shí)驗(yàn)小鼠的正常腦組織，因?yàn)楹ｑR神經(jīng)元細(xì)胞類似于干細(xì)胞屬于高分度分化的細(xì)胞特性，具有不能傳代，不能增殖等特點(diǎn)，所有收到細(xì)胞后盡快使用。1.試驗(yàn)所需儀器設(shè)備及試劑（1）儀器生物安全柜CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱熒光倒置顯微鏡高速冷凍離心機(jī)電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（2）試劑耗材T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶血球計數(shù)板細(xì)胞培養(yǎng)孔板紅細(xì)胞裂解液神經(jīng)元*培養(yǎng)基0.
2019
06-05

細(xì)胞STR檢測服務(wù)
短串聯(lián)重復(fù)(Shorttandemrepeats,STR)，又稱微衛(wèi)星DNA(MicrosatelliteDNA)或簡單重復(fù)序列(Simplerepeatsequence,SRS或SSR)，是廣泛存在于原核生物和真核生物基因組中的核苷酸重復(fù)序列。有絲分裂過程中DNA鏈之間的錯配引起的復(fù)制滑動被認(rèn)為是導(dǎo)致STR產(chǎn)生的常見原因，并且依據(jù)不同復(fù)制單元大小的不同以及不同物種之間，復(fù)制滑動發(fā)生的概率也不相同。STR是以核心序列(corerepeatunits)首尾相連多次重復(fù)形成。每個STR的核心序列結(jié)構(gòu)
2019
05-30

細(xì)胞復(fù)蘇方法
細(xì)胞操作流程復(fù)蘇1.將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到37℃；2.從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入恒溫水浴鍋中復(fù)溫，不斷震蕩凍存管以提高復(fù)溫速率；將融化了的凍存管中的用移液管轉(zhuǎn)入一直裝有5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中，充分混勻后，300g離心5min；3.離心完成后棄去上清，用1ml*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入T-25細(xì)胞培養(yǎng)中，再加*培養(yǎng)基4ml，之后轉(zhuǎn)入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。鏡像綺點(diǎn)（上海）細(xì)胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)：一、原代細(xì)胞服務(wù)各類模式哺乳動物的多種原代細(xì)胞資源；多種人源性正常及腫瘤
2017
10-09

細(xì)胞轉(zhuǎn)染的類型及方法
轉(zhuǎn)染（Transfection）是指將DNA或者RNA導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過程。轉(zhuǎn)染的目的是產(chǎn)生重組蛋白，或特異性增強(qiáng)或抑制轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的基因表達(dá)。細(xì)胞轉(zhuǎn)染有哪些類型和方法呢？1）根據(jù)導(dǎo)入的核酸存在于宿主細(xì)胞的時間長短，可以分為瞬轉(zhuǎn)和穩(wěn)轉(zhuǎn)。瞬轉(zhuǎn)穩(wěn)轉(zhuǎn)導(dǎo)入的DNA沒有整合到基因組中，而是保留在細(xì)胞核上導(dǎo)入的DNA整合到基因組中導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)不傳遞到子代；遺傳改變只是暫時的導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)能夠代代相傳；遺傳改變是*的不需要選擇性篩選需要選擇性篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞DNA載體和RNA都可用于瞬時轉(zhuǎn)染只有DNA載體
2017
10-09

血清質(zhì)檢方法和重要作用
細(xì)胞培養(yǎng)基的構(gòu)成中動物血清對細(xì)胞的生長繁殖起著重要作用。在動物血清中牛血清的應(yīng)用又是zui廣泛的，所以想要細(xì)胞在培養(yǎng)過程中長的好、穩(wěn)定，牛血清的質(zhì)量好壞直接影響生物研究的質(zhì)量和安全性，使用質(zhì)量好的牛血清也是細(xì)胞培養(yǎng)中的重要環(huán)節(jié)。血清是提供生長激素、營養(yǎng)物，以及低分子營養(yǎng)物；提供結(jié)合蛋白；能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力；是細(xì)胞貼壁、鋪展生長所需因子的來源；起酸堿度緩沖液作用；提供蛋白酶抑制劑；細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受損傷；能與有毒金屬和熱源物質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。血清分類胎牛血
2017
10-09

養(yǎng)細(xì)胞需要注意的細(xì)節(jié)
養(yǎng)細(xì)胞可謂是個精細(xì)活，從事養(yǎng)細(xì)胞的人都知道養(yǎng)細(xì)胞的時候一旦不注意，就很容易造成細(xì)胞污染，所以想要養(yǎng)好細(xì)胞除了小心謹(jǐn)慎以外，還要提前做好準(zhǔn)備：細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備1）在帶上手套開始細(xì)胞培養(yǎng)之前,先檢查一下移液管和瓶子的數(shù)量是否充足,以免在開始實(shí)驗(yàn)后再次出入操作臺，這樣可以降低細(xì)胞污染的風(fēng)險。2）細(xì)胞培養(yǎng)基也應(yīng)先預(yù)熱,選擇只預(yù)熱部分培養(yǎng)基而非整瓶加熱,不但可以節(jié)約實(shí)驗(yàn)時間,而且可以避免因反復(fù)加熱培養(yǎng)基而造成的蛋白質(zhì)降解。3）結(jié)束操作后,別忘了培養(yǎng)基對光敏感,應(yīng)盡可能避光保存。細(xì)胞培養(yǎng)的定期檢查1）定期檢
2017
10-09

制成免疫熒光容易出現(xiàn)的問題和注意事項
在制作原代細(xì)胞免疫熒光時，容易出現(xiàn)一些問題，造成熒光鑒定失敗，將抗原或抗體標(biāo)記上熒光素，制成熒光抗體檢測組織或細(xì)胞內(nèi)的相應(yīng)抗原（或抗體）時，一定要注意抗體的比例高低和濃度。制作免疫熒光常用的方法有：方法一：直接法步驟：將熒光標(biāo)記的特異性抗體（抗原）直接加在抗原（抗體）上，經(jīng)一定的溫度和時間染色，水洗—干燥—封片—鏡檢優(yōu)點(diǎn)：操作簡便、特異性高、非特異性染色少缺點(diǎn)：敏感性低方法二：間接法步驟：先用已知未標(biāo)記的特異性抗體（一抗）與抗原反應(yīng)，再用標(biāo)記的抗體（二抗）與其反應(yīng)，形成抗原—抗體—抗體復(fù)合物，水

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