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2013
06-17

影響ELISA試驗(yàn)效果常見(jiàn)問(wèn)題原因分析及解決辦法
ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。操作步驟可能原因解決辦法選擇試劑選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；2.手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)（特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)）；3
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實(shí)驗(yàn)采血要點(diǎn)
材料與試劑1．抗凝劑（1）肝素：肝素是含硫酸基的粘多糖，常用其鈉鹽或鉀鹽，它能阻止凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶，進(jìn)而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白，從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1000U/ml，市售肝素多為100U~126U／mg。（2）乙二胺四乙酸（EDTA）：是一種螯合劑。用生理鹽水配制成4％的溶液備用。（3）阿氏液（Alsever液），配方如下：枸櫞酸鈉（Na3C6H5O7·5H2O）0.80g枸櫞酸0.0325g葡萄糖2.05g氯化鈉0.42gH2O加至100.00ml混勻溶解后，114.
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血細(xì)胞分離原理
在體外進(jìn)行細(xì)胞免疫檢測(cè)時(shí)，首先必須進(jìn)行淋巴細(xì)胞的分離。分離淋巴細(xì)胞的方法很多，但不管采用哪種方法，均要求分離的淋巴細(xì)胞純度高、產(chǎn)量多，而且不喪失活性，同時(shí)也要求分離技術(shù)簡(jiǎn)單、操作方便。外周血液中紅細(xì)胞和白細(xì)胞的比例在幾百甚至上千比一，兩類(lèi)細(xì)胞的大小和密度不同，其沉降速度也就不同。紅細(xì)胞的自然沉降率較快，加入高分子量的聚合物，如明膠、右旋糖酐等還可以加速其凝聚。利用自然沉降法、密度梯度離心法或二者結(jié)合，可以將淋巴細(xì)胞從血液中分離出來(lái)。這種分離出的淋巴細(xì)胞一般包括單核細(xì)胞。除去單核細(xì)胞，可以利用單核
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ELI-SPOT 及其應(yīng)用
一、原理ELI-SPOT，即斑點(diǎn)ELISA，是利用酶標(biāo)板作反應(yīng)容器進(jìn)行的酶聯(lián)免疫反應(yīng)。其基本原理與ELISA相同。首先用捕獲抗體包被反應(yīng)板，封閉后，依次加入待檢標(biāo)本、生物素化檢測(cè)抗體、鏈霉菌抗生物素蛋白-堿性磷酸酶及底物，陽(yáng)性結(jié)果出現(xiàn)斑點(diǎn)顯色，利用倒置顯微鏡進(jìn)行斑點(diǎn)計(jì)數(shù)。其優(yōu)勢(shì)在于可在與體內(nèi)（活體條件）極接近的條件下，在體外對(duì)細(xì)胞分泌成分（如細(xì)胞因子、Fas等）進(jìn)行追蹤研究。幾點(diǎn)說(shuō)明：l反應(yīng)板：ELI-SPOT所用的反應(yīng)板可以是PVDF膜包被好的，也可以是普通酶標(biāo)板。如用普通酶標(biāo)板，需用特制的瓊
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細(xì)胞內(nèi)鈣離子PH值和其它離子的動(dòng)態(tài)分析
細(xì)胞內(nèi)鈣離子PH值和其它離子的動(dòng)態(tài)分析通過(guò)Indo-1、Fluo-2、Fluo-3、Calciumgreen、SNARF等多種熒光探針，可對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈣離子、鈉離子及PH值等作熒光標(biāo)記并對(duì)它們進(jìn)行比率值和濃度梯度變化測(cè)定。由于細(xì)胞內(nèi)鈣離子為傳遞信息的第二信使，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)分化起著重要作用，通過(guò)單標(biāo)記或雙標(biāo)記對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈣離子和其它離子的熒光強(qiáng)度和分布測(cè)定，測(cè)定樣品達(dá)到毫秒級(jí)的快速變化。借助光學(xué)切片功能可以測(cè)量樣品深層的熒光分布以及細(xì)胞光學(xué)切片的生物化學(xué)特性的變化。通過(guò)不同時(shí)間段的檢測(cè)可測(cè)定細(xì)胞內(nèi)離子的擴(kuò)散
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重組人的載脂蛋白E2 ApoE2
Synonyms:ApolipoproteinE2Description:ApoEbelongstoagroupofproteinsthatbindreversiblywithlipoproteinａndplayanimportantroleinlipidmetabolism.Inadditiontofacilitatingsolublizationoflipids,theseproteinshelptomaintainthestructuralintegrityoflipoproteins,s
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脂聯(lián)素和肥胖的關(guān)系
脂聯(lián)素的概念A(yù)diponectin（脂聯(lián)素）是脂肪細(xì)胞分泌的一種內(nèi)源性生物活性多肽或蛋白質(zhì).人體內(nèi)的Adiponectin（脂聯(lián)素）由244個(gè)氨基酸組成,分子量為30KD.Adiponectin（脂聯(lián)素作為一種胰島素增敏激素（AnInsulin-sensitizingHormone）,可以增加促進(jìn)骨骼肌細(xì)胞的脂肪酸氧化和糖吸收,明顯加強(qiáng)胰島素的糖元異生作用,抑制肝臟的糖生成,是機(jī)體的脂質(zhì)代謝和血糖穩(wěn)態(tài)的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的重要調(diào)節(jié)因子.日本學(xué)者近來(lái)證明Adiponectin（脂聯(lián)素）的單聚體和三聚體是其
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人腫瘤壞死因子（TNFα elisa kit）酶聯(lián)免疫法定量檢測(cè)試劑盒
人腫瘤壞死因子酶聯(lián)免疫法定量檢測(cè)試劑盒HumanTNF-aELISAKit產(chǎn)品描述：腫瘤壞死因子（TNF）是一種具有廣泛生物學(xué)活性的細(xì)胞因子，主要由激活的單核-巨噬細(xì)胞所分泌，參與機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)與炎癥反應(yīng)，也是某些感染性疾病和肝臟損傷的致病因素。正常人體液中的TNF水平一般在100pg/ml以下，當(dāng)患有某些疾病時(shí)，TNF水平可有不同程度增高。因此，檢測(cè)患者體液中的TNF水平，具有一定的臨床意義。本試劑盒采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫檢測(cè)法測(cè)定人血漿或血清中的TNF，包被抗體及檢測(cè)抗體采用鼠抗人TNF單克隆
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血漿脂聯(lián)素和腫瘤壞死因子-α在2 型糖尿病中
血漿脂聯(lián)素和腫瘤壞死因子-α在2型糖尿病中的作用及相關(guān)性柳江燕，陳雪紅，胡金貴，王正江，馬冬梅，魯秀娟柳江燕730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科；陳雪紅730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科；胡金貴730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科；王正江730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科；馬冬梅730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科；魯秀娟730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科通訊作者：柳江燕730030蘭州大學(xué)第二醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科【摘要】目的探討血漿脂聯(lián)素（adiponectin）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）
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甲基強(qiáng)的松龍對(duì)嗅鞘細(xì)胞移植治療受損視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的
甲基強(qiáng)的松龍對(duì)嗅鞘細(xì)胞移植治療受損視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的早期保護(hù)效應(yīng)裴群羽，許媛媛，王珂，楊立元，楊磊，雷季良北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部解剖學(xué)教研室，北京市100083裴群羽★，女，1980年生，黑龍江省哈爾濱市人，漢族，北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部在讀碩士，主要從事中樞神經(jīng)再生方面研究。Hxz800829通訊作者：雷季良,副教授，北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部解剖學(xué)教研室，北京市100083leijiliang中圖分類(lèi)號(hào):R617文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1673-8225（2007）29-05701-04收稿日期：2007-01-04修回
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表皮生長(zhǎng)因子EGF與胚胎發(fā)育和著床
國(guó)外醫(yī)學(xué)計(jì)劃生育分冊(cè)2000年2月第19卷第1期重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院婦產(chǎn)科（400046）審校摘要胚胎著床過(guò)程的調(diào)節(jié)十分復(fù)雜，近年來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)因子參與胚胎發(fā)育和著床的功能研究十分熱門(mén)，在細(xì)胞生長(zhǎng)因子發(fā)揮作用的網(wǎng)絡(luò)中，表皮生長(zhǎng)因子起著舉足輕重的作用，是著床過(guò)程順利完成*的因子之一。本文就表皮生長(zhǎng)因子改善胚胎發(fā)育、啟動(dòng)胚胎著床、調(diào)節(jié)植入過(guò)程等內(nèi)容進(jìn)行簡(jiǎn)要綜述。關(guān)鍵詞：表皮生長(zhǎng)因子胚胎發(fā)育著床自1962年Cohen從雄鼠頜下腺分離提純出表皮生長(zhǎng)因子（epidermalgrowthfactor,EGF
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ELISA的操作要點(diǎn)
的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異，國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘述板式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球ELSIA，國(guó)外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有詳細(xì)的使用說(shuō)明，嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。4.1標(biāo)本的采取和保存可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如
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急性腦梗死患者細(xì)胞因子測(cè)定及其臨床意義
急性腦梗死患者細(xì)胞因子測(cè)定及其臨床意義黃勤華2006-10-1922:55:12《吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào)》2006年9月第27卷第3期關(guān)鍵詞：腦梗死；血漿組織型纖溶酶原激活劑；血管性血友病因子；纖維連接蛋白；內(nèi)皮素；6酮前列腺素摘要：目的探討急性腦梗死患者血漿中血栓與止血檢驗(yàn)相關(guān)標(biāo)記物含量變化及其與臨床之間的關(guān)系。方法測(cè)定急性腦梗死患者53例血漿組織型纖溶酶原激活劑（tPA）、血管性血友病因子（vWF）、纖維連接蛋白（Fn）、內(nèi)皮素（ET）、6酮前列腺素（6KPGF1α）含量，并與正常對(duì)
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關(guān)于diaclone的盒子的樣本收集要點(diǎn)
樣品收集，處理和保存1.血清——操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000xg離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2．血漿——EDTA，檸檬酸鹽和肝素血漿可用于檢測(cè)。1000Xg離心30分鐘去除顆粒。3．保存——如果樣品不直接使用，將其分為小部分（250-500ul）-70℃下保存，避免反復(fù)冷凍。如果可能，不要使用溶血和高脂血。如果血清中有大量的顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。注意：不要在37℃或56℃加熱解凍。在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。包含有可見(jiàn)沉
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降鈣素基因相關(guān)肽對(duì)心肌細(xì)胞缺血缺氧狀態(tài)下胞內(nèi)鈣的影響
第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)2000年第21卷第4期商立軍臧益民王春梅臧偉進(jìn)董明清陳賢明王四旺摘要:目的觀察降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）對(duì)急性分離心肌細(xì)胞在模擬缺血缺氧狀態(tài)下胞內(nèi)鈣的影響.方法急性分離心肌細(xì)胞在模擬缺血缺氧狀態(tài)下，以Fluo-3作為鈣指示劑，用共聚焦顯微鏡測(cè)定胞內(nèi)鈣的變化.結(jié)果急性缺血缺氧時(shí)，心肌細(xì)胞胞內(nèi)鈣濃度降低，加入CGRP后，鈣濃度恢復(fù)；先加入CGRP,再在缺血缺氧的條件下，胞內(nèi)鈣濃度基本保持不變.結(jié)論CGRP可恢復(fù)因急性缺血缺氧而導(dǎo)致的細(xì)胞內(nèi)鈣濃度降低.關(guān)鍵詞：降鈣素基因相關(guān)肽；缺血
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共焦鏡同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Ca2+和pH的變化
中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志1998年第1期第1卷論著作者：黃行許鮑永耀黃輝張薇霍霞樸英杰單位：510515*軍醫(yī)大學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室關(guān)鍵詞：顯微鏡檢查,熒光/方法;巨噬細(xì)胞/生理學(xué)；鈣/分析；酸堿平衡；小鼠摘要目的細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+與胞漿的pH在不同因素作用下可以改變。研究可以同時(shí)檢測(cè)游離Ca2+與pH變化的方法激光掃描共聚焦顯微鏡觀察。方法用胞內(nèi)游離Ca2+和pH熒光探針fluo-3/AM和SNARF-1/AM標(biāo)記小鼠腹腔巨噬細(xì)胞后，在激光掃描共聚焦顯微鏡（ACAS570）下，同時(shí)用zui適發(fā)射波長(zhǎng)分別
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肥胖與PPARγ及脂肪因子的研究進(jìn)展
關(guān)亞群趙學(xué)信2006-8-228:41:43《新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2000年7月第29卷第7期關(guān)健詞：肥胖肥胖，即脂肪細(xì)胞數(shù)量的過(guò)度增加和體積的過(guò)度增大,并以體脂的形式儲(chǔ)存過(guò)多攝入的能量,它是糖尿病、冠心病、高血壓、高脂血癥等許多嚴(yán)重疾病的共同危險(xiǎn)因素。肥胖的發(fā)生除與不良生活習(xí)慣有關(guān)外，遺傳因素和胰島素抵抗是導(dǎo)致肥胖的zui主要原因。過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體（PPARγ）是脂肪細(xì)胞基因表達(dá)和胰島素細(xì)胞間信號(hào)傳遞的主要調(diào)節(jié)者，參與脂肪細(xì)胞分化和脂代謝調(diào)節(jié)，與肥胖密切相關(guān)。因此，涉及脂肪細(xì)胞的過(guò)度增
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新陳代謝產(chǎn)物檢測(cè)試劑盒精彩薈萃
新陳代謝是存在于生物體內(nèi)的生物化學(xué)作用，而細(xì)胞代謝是活細(xì)胞處理營(yíng)養(yǎng)分子、維持生存狀態(tài)的過(guò)程（或者說(shuō)是正在進(jìn)行的很多個(gè)作用的總和）。代謝可分為兩類(lèi)：合成代謝（細(xì)胞利用能量和還原能力來(lái)構(gòu)建復(fù)雜的分子，執(zhí)行其它生命功能如建立細(xì)胞結(jié)構(gòu)）和分解代謝（細(xì)胞分解復(fù)雜的分子來(lái)獲取能量細(xì)胞代謝包括了被稱(chēng)為“代謝通路”的及其復(fù)雜的有序化學(xué)反應(yīng)）。對(duì)于各種代謝產(chǎn)物和過(guò)程的檢測(cè)是對(duì)于機(jī)體代謝方面的基礎(chǔ)研究、藥物開(kāi)發(fā)以及食物中殘留成分檢測(cè)等具有很重要的作用。在此，我們匯集了各種常用代謝物檢測(cè)試劑盒，方便您研究的需要。乳酸
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全套豬細(xì)胞因子ELISA試劑盒
產(chǎn)品說(shuō)明規(guī)格報(bào)價(jià)KSC0011IL-1bSwineELISA1plate4050KSC0012IL-1bSwineELISA2plates6930PLB00PorcineIL-1beta/IL-1F2QuantikineELISAKit1KT5400KSC0041IL-4SwineELISA1plate4104KSC0042IL-4SwineELISA2plates6930P6000PorcineIL-6QuantikineELISAKit1KT5400P8000PorcineIL-8/CXCL
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Biosource ELISA kits
Biosource的ELISAkits系列產(chǎn)品是您方便、快速、準(zhǔn)確地探索細(xì)胞內(nèi)（信號(hào)通路研究）和細(xì)胞外（細(xì)胞因子檢測(cè)分析）的信號(hào)通路的必需裝備。Biosource細(xì)胞內(nèi)外信號(hào)通路的CytokineELISAkits系列產(chǎn)品研究領(lǐng)域涉細(xì)胞凋亡、腫瘤、細(xì)胞周期、糖尿病、炎癥、神經(jīng)退行性病變、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、淋巴細(xì)胞激活、MAPK等。檢測(cè)物種涉及人、小鼠、大鼠、猴、豬等。它以*的性?xún)r(jià)比廣受科研工作者的喜愛(ài)。試劑盒特點(diǎn)：》高度敏感，高度特異，結(jié)果準(zhǔn)確可靠》試劑盒內(nèi)的組合優(yōu)化、齊全，操作簡(jiǎn)單方便》短時(shí)

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